高效合成不同来源的血红或肌红蛋白的酿酒酵母菌株的构建及其应用

    公开(公告)号:CN113549561B

    公开(公告)日:2024-02-27

    申请号:CN202110777292.X

    申请日:2021-07-09

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了高效合成不同来源的血红或肌红蛋白的酿酒酵母菌株的构建及其应用,属于基因工程技术领域。本发明通选取合适的表达载体、伴侣蛋白以及启动子,并对宿主进行改造,在酿酒酵母中实现了不同来源的血红蛋白或肌红蛋白的异源表达,保障了血红蛋白和肌红蛋白的安全性,并获得了血红蛋白或肌红蛋白的高效生产,解决了之前报道中表达宿主不是食品级宿主的安全隐患。在摇瓶水平,所得大豆血红蛋白产‑1量至少可达120mg L ,三叶草血红蛋白产量至少可达20mg L‑1,猪肌红蛋白产量至少可达99mg L‑1,牛肌红蛋白产量至少可达89mg L‑1,猪血红蛋白产量至少可达20mg L‑1,牛血红蛋白产量至(56)对比文件苏悦.微生物高效表达异源豆血红蛋白的研究.中国优秀博硕士学位论文全文数据库(硕士)工程科技Ⅰ辑.2021,(第5期),B018-44.

    一种利用人工双碳源高产N-乙酰神经氨酸的重组菌

    公开(公告)号:CN108441461B

    公开(公告)日:2020-11-06

    申请号:CN201810239293.7

    申请日:2018-03-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用人工双碳源高产N‑乙酰神经氨酸的重组菌,属于遗传工程领域。本发明是通过强启动子P43过表达葡萄糖酸激酶基因gntK和葡萄糖酸透性酶gntP,利用葡萄糖、葡萄糖酸钠人工双碳源发酵,实现N‑乙酰神经氨酸合成途径中磷酸烯醇式丙酮酸的高效供给,以加强合成途径,本发明的重组枯草芽孢杆菌与出发菌株相比,其N‑乙酰神经氨酸产量从1.02g/L提高到1.52g/L,为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础。

    一种利用天然双碳源高产N-乙酰神经氨酸的重组菌

    公开(公告)号:CN108424868A

    公开(公告)日:2018-08-21

    申请号:CN201810239281.4

    申请日:2018-03-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种利用天然双碳源高产N-乙酰神经氨酸的重组菌,属于遗传工程领域。本发明通过强启动子P43过表达磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶基因PckA,利用葡萄糖、L-苹果酸钠天然双碳源发酵,实现N-乙酰神经氨酸合成途径中磷酸烯醇式丙酮酸的高效供给,以加强合成途径,本发明的重组枯草芽孢杆菌与出发菌株相比,其N-乙酰神经氨酸产量从1.15g/L提高到1.65g/L,为进一步代谢工程改造枯草芽孢杆菌生产N-乙酰神经氨酸奠定了基础。

    一种积累N-乙酰神经氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其应用

    公开(公告)号:CN108330095A

    公开(公告)日:2018-07-27

    申请号:CN201810171868.6

    申请日:2018-03-01

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种积累N-乙酰神经氨酸的重组谷氨酸棒杆菌及其应用,属于遗传工程领域。本发明以谷氨酸棒杆菌作为表达宿主,通过过量表达氨糖-果糖-6磷酸氨基转移酶基因、氨基葡萄糖乙酰化酶编码基因、磷酸酶编码基因、乙酰氨基葡萄糖异构酶编码基因和N-乙酰神经氨酸合酶编码基因,加强了N-乙酰神经氨酸合成途径;并通过敲除谷氨酸棒杆菌中N-乙酰神经氨酸转运蛋白编码基因和胞内N-乙酰神经氨酸分解利用代谢途径上的相关基因,得到了胞外积累N-乙酰神经氨酸的谷氨酸棒杆菌基因工程菌,产量达到110mg/L,为进一步代谢工程改造谷氨酸棒杆菌生产N-乙酰神经氨酸奠定了基础。

    一种全细胞转化苯丙氨酸生产苯乳酸的方法

    公开(公告)号:CN108277190A

    公开(公告)日:2018-07-13

    申请号:CN201810048337.8

    申请日:2018-01-18

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种全细胞转化苯丙氨酸生产苯乳酸的方法,属于酶工程技术领域。本发明成功实现了L-氨基酸脱氨酶,L-乳酸脱氢酶和甲酸脱氢酶共表达菌株的构建。全细胞转化L-苯丙氨酸可生产30g/L苯乳酸,转化率为100%。此全细胞转化体系的建立,解决了化学法合成苯乳酸的步骤繁琐、得率低、污染环境等问题及酶法转化生产α-酮戊二酸的转化率低的问题,实现了无污染、高产率、一步法生产苯乳酸,为后续工业化生产奠定了一定的理论基础。

    一种生物合成葡萄糖醛酸和葡萄糖二酸的方法

    公开(公告)号:CN104312987B

    公开(公告)日:2017-12-29

    申请号:CN201410564643.9

    申请日:2014-10-21

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种生物合成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。通过在大肠杆菌中表达来源于毕赤酵母(Pichia pastoris)的肌醇加氧酶(MIOX),将肌醇转化为葡萄糖醛酸,再通过表达来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的醛酸脱氢酶(Udh),将生成的葡萄糖醛酸转化为葡萄糖二酸,成功构建了从肌醇到葡萄糖二酸的合成途径。本发明构建的重组大肠杆菌,具有非常大的应用前景,为生物法转化生成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸提供了新的思路。

    一种透明质酸四糖和六糖的分离方法

    公开(公告)号:CN104610467B

    公开(公告)日:2017-02-22

    申请号:CN201510042090.5

    申请日:2015-01-27

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种透明质酸四糖和六糖的分离方法,属于生物工程技术领域。本发明采用Q Sepharose fast flow为离子交换剂,pH8~9Tris-HCl为平衡液,pH80.125M的NaCl线性梯度洗脱,可将透明质酸四糖和六糖进行分离,脱盐后即得透明质酸四糖和六糖纯品。

    一种基于米曲霉培养物的非乳益生菌饮料的制备方法

    公开(公告)号:CN103734851B

    公开(公告)日:2015-06-24

    申请号:CN201410001115.2

    申请日:2014-01-02

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种基于米曲霉培养物的非乳益生菌饮料的制备方法,属于发酵饮料技术领域。本发明通过将麦麸豆粕混合后蒸煮,冷却后接入米曲霉培养,另取麦麸进行预处理,获得预处理麦麸混合物,再将成熟培养物调整水分后与预处理麦麸混合物混合搅拌水解,分离水解物获得提取液,再将提取液灭菌后接入乳酸菌发酵,获得发酵液,利用发酵液制备饮料。利用本发明公开方法所制备的饮料具有独特的风味口感,以及抗氧化、抗α-葡萄糖苷酶等功能,其中益生菌活菌数可达5×109cfu/ml,总酚含量可达134mg/100ml,α-葡萄糖苷酶抑制活性达到90%,具有很高的营养保健作用。

    一种基于麦麸豆粕的米曲霉发酵饮料的制备方法

    公开(公告)号:CN103734852A

    公开(公告)日:2014-04-23

    申请号:CN201410001802.4

    申请日:2014-01-02

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: A23L2/38 A23L33/00 A23V2002/00 A23V2300/34

    Abstract: 本发明公开了一种基于麦麸豆粕的米曲霉发酵饮料的制备方法,属于发酵饮料技术领域。本发明通过将麦麸豆粕混合后蒸煮,冷却后接入米曲霉,培养后获得成熟培养物,再将成熟培养物水解,并分离水解物获得提取液,利用提取液制备发酵饮料。利用本发明方法制备的饮料具有天然安全,美味健康的特点,且含有丰富的蛋白酶、淀粉酶等活性酵素以及具有抗氧化和抑制α-葡萄糖苷酶功能的酚类物质和寡肽。其中,产品总酚含量可达205mg/100ml,α-葡萄糖苷酶抑制率可达92.41%,十分有利于糖尿病患者控制血糖。

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