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公开(公告)号:CN104312935B
公开(公告)日:2018-07-06
申请号:CN201410568277.4
申请日:2014-10-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种构建重组酵母发酵生产葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。本发明通过在酵母中表达肌醇‑1‑磷酸合成酶基因(Ino1)、肌醇加氧酶基因(MIOX),实现葡萄糖醛酸的生成途径,同时表达来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的醛酸脱氢酶(Udh),成功构建了葡萄糖二酸的合成途径。其中,重组毕赤酵母在YPD发酵培养基中生成葡萄糖二酸40mg/L,在YPD‑MI(YPD培养基中加入60mM肌醇)发酵培养基中生成葡萄糖二酸60mg/L。本发明提出的重组酵母发酵生成葡萄糖二酸的方法,具有广阔的发展前景,为生物合成葡萄糖二酸奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104312935A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410568277.4
申请日:2014-10-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0069 , C12N9/0006 , C12N9/90 , C12P7/58 , C12Y101/01203 , C12Y113/99001 , C12Y505/01004
Abstract: 本发明公开了一种构建重组酵母发酵生产葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。本发明通过在酵母中表达肌醇-1-磷酸合成酶基因(Ino1)、肌醇加氧酶基因(MIOX),实现葡萄糖醛酸的生成途径,同时表达来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的醛酸脱氢酶(Udh),成功构建了葡萄糖二酸的合成途径。其中,重组毕赤酵母在YPD发酵培养基中生成葡萄糖二酸40mg/L,在YPD-MI(YPD培养基中加入60mM肌醇)发酵培养基中生成葡萄糖二酸60mg/L。本发明提出的重组酵母发酵生成葡萄糖二酸的方法,具有广阔的发展前景,为生物合成葡萄糖二酸奠定了基础。
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公开(公告)号:CN104312934A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410568261.3
申请日:2014-10-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0069 , C12P19/02 , C12Y113/99001
Abstract: 本发明公开了一种构建重组酵母生物合成葡萄糖醛酸的方法,属于代谢工程领域。本发明将不同来源的肌醇加氧酶基因(MIOX)在不同酵母宿主中表达,以葡萄糖或肌醇为底物,实现了葡萄糖醛酸的生物合成。其中,重组毕赤酵母菌株在YPD发酵培养基中生成葡萄糖醛酸20mg/L,在YPD-MI(YPD培养基中加入60mM肌醇)发酵培养基中生成葡萄糖醛酸50mg/L。本发明提出的重组酵母合成葡萄糖醛酸的方法,具有广阔的发展前景,为生物法合成葡萄醛酸提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN104312987B
公开(公告)日:2017-12-29
申请号:CN201410564643.9
申请日:2014-10-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种生物合成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。通过在大肠杆菌中表达来源于毕赤酵母(Pichia pastoris)的肌醇加氧酶(MIOX),将肌醇转化为葡萄糖醛酸,再通过表达来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的醛酸脱氢酶(Udh),将生成的葡萄糖醛酸转化为葡萄糖二酸,成功构建了从肌醇到葡萄糖二酸的合成途径。本发明构建的重组大肠杆菌,具有非常大的应用前景,为生物法转化生成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸提供了新的思路。
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公开(公告)号:CN104911117A
公开(公告)日:2015-09-16
申请号:CN201510356992.6
申请日:2015-06-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种利用融合表达提高酵母发酵生产葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。本发明通过将肌醇加氧酶(MIOX)及醛酸脱氢酶(Udh)融合,采用直接融合及添加不同连接肽的方式,克隆表达至酵母菌株中,强化了葡萄糖二酸的合成途径。经比较,重组毕赤酵母Pichia pastoris GS115-Udh-(GS)1-MIOX产量最高,摇瓶发酵培养时,在YPD-MI(在YPD培养基中添加10g/L肌醇)的培养基中,产生葡萄糖二酸944.67mg/L。3L发酵罐培养时,葡萄糖二酸产量可达6.02g/L。本发明采用代谢工程的策略,改造微生物菌株来合成目的产物葡萄糖二酸,为生物法高效生产葡萄糖二酸打下了坚实的基础。
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公开(公告)号:CN104312987A
公开(公告)日:2015-01-28
申请号:CN201410564643.9
申请日:2014-10-21
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/0069 , C12P7/58 , C12P19/02 , C12Y113/99001
Abstract: 本发明公开了一种生物合成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸的方法,属于代谢工程领域。通过在大肠杆菌中表达来源于毕赤酵母(Pichia pastoris)的肌醇加氧酶(MIOX),将肌醇转化为葡萄糖醛酸,再通过表达来源于恶臭假单胞菌(Pseudomonas putida)的醛酸脱氢酶(Udh),将生成的葡萄糖醛酸转化为葡萄糖二酸,成功构建了从肌醇到葡萄糖二酸的合成途径。本发明构建的重组大肠杆菌,具有非常大的应用前景,为生物法转化生成葡萄糖醛酸及葡萄糖二酸提供了新的思路。
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