一种miR-574-5p靶基因筛选的方法

    公开(公告)号:CN108300761A

    公开(公告)日:2018-07-20

    申请号:CN201810193251.4

    申请日:2018-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种筛选miR-574-5p靶基因的方法,该方法以山羊基因组DNA序列为模板,在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用MAP3K9引物在PCR条件下进行扩增MAP3K9基因3'UTR区;构建双荧光素酶报告系统,检测荧光素酶活性,结果显示,miR-574-5p降低了荧光素酶的活性,初步确定MAP3K9为miR-574-5p的靶基因;采用RT-qPCR和Western blot方法验证miR-574-5p对MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平表达的影响。结果显示:miR-574-5p可以抑制MAP3K9基因在mRNA和蛋白水平上的表达,进一步确定miR-574-5p可与MAP3K93'UTR结合,MAP3K9是miR-574-5p的靶基因,为进一步研究miR-574-5p对奶山羊乳腺发育和泌乳功能的影响奠定了基础。

    褪黑素作为奶山羊常温精液保存制备方法

    公开(公告)号:CN116114688A

    公开(公告)日:2023-05-16

    申请号:CN202310013264.X

    申请日:2023-01-05

    Abstract: 本发明公开了褪黑素作为奶山羊常温精液保存制备方法,包括以下步骤:S1、选取原材料;S2、配置基础稀释液;S3、配置褪黑素溶液;S4、基于步骤2与步骤3对山羊精液进行保存。本发明提供以褪黑素为奶山羊精液常温抗菌保存中的抗氧化活性成分以及其他物质结合的奶山羊精液常温保存稀释液配制方法。通过在常温基础稀释液中添加褪黑素常温保存后,对山羊精子活率,活力,以及对其他指标进行测量,其中褪黑素作为稀释液中唯一的抗氧化剂和保存质量提高的活性成分。

    一种猪精液净化剂
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113545336A

    公开(公告)日:2021-10-26

    申请号:CN202110815619.8

    申请日:2021-07-19

    Abstract: 本发明涉及养猪业领域,具体为一种猪精液净化剂,由以下原料制成:葡萄糖15‑25克、柠檬酸三钠6‑16克、乙二胺四乙酸二钠1‑5克、碳酸氢钠0.5‑3.5克、聚乙烯醇0.5‑1.5克、三羧甲基氨基甲烷2‑11克、柠檬酸1‑8克、半胱胺酸0.1‑0.3克、利巴韦林注射液0.05‑0.15ml、恩诺沙星注射液0.05‑0.15ml、柴胡注射液0.05‑0.15ml和去离子水800‑1200ml。本技术通过精液稀释过程中广谱抗菌剂及中草药提取液的增加,对精液隐形带毒、采集及稀释精液过程中滋生细菌发生缓解净化,优化精液品质,提高繁育性能。

    一种干料湿喂方法及其系统

    公开(公告)号:CN106818631A

    公开(公告)日:2017-06-13

    申请号:CN201710024632.5

    申请日:2017-01-11

    CPC classification number: A01K67/02 A01K5/00 A01K7/00

    Abstract: 本发明公开了一种干料湿喂方法及其系统,该方法包括:在猪圈内建造一个采食饮水槽,食槽上安装定量进水器,根据猪的日龄、体重、每圈猪的头数计算出每次饲喂需水量,并调整好进水量;食槽的上方安装若干个定量投料器,计算出每次饲喂的投料量,并调整好定量投料器的总投料量;每次饲喂时,打开开关,干料落入食槽的水中,进行干料湿喂;所述系统包括采食饮水槽、定量进水器、定量投料器、供水总开关和下料开关。本发明使猪生长速度提高,出栏时间缩短,饲料的利用率上升;本发明与国际上通用的湿料饲喂系统比较,造价只有湿料饲喂系统的40%,维护简单、故障少,与机械料线干喂系统造价相当。

    一种山羊产羔性状的分子标记选择方法

    公开(公告)号:CN101899526A

    公开(公告)日:2010-12-01

    申请号:CN201010263060.4

    申请日:2010-08-26

    Abstract: 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法,以山羊基因组DNA序列为模板,在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用引物P1和P2在PCR条件下分别扩增KITL基因内含子1和6,根据琼脂糖凝胶电泳结果判定目的片段的大小;用限制性内切酶CviAⅡ消化引物P1的PCR扩增产物后,再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切后的扩增片段,引物P1的扩增产物存在2个碱基的突变;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P2的PCR扩增产物,引物P2的扩增产物存在1个碱基的突变,然后对引物P1和P2的扩增产物进行基因分型和基因频率分析,以及与关中奶山羊、西农萨能奶山羊和布尔山羊的产羔数之间进行关联分析,表明KITL基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可作为山羊产羔数性状选择的分子标记。

    一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法

    公开(公告)号:CN101845506A

    公开(公告)日:2010-09-29

    申请号:CN201010199486.8

    申请日:2010-06-12

    Abstract: 本发明公开了一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法,以连续产2羔及以上的奶山羊基因组DNA为模板,利用4对引物分别扩增催乳素受体基因内含子2和外显子10,以及促黄体素beta亚基基因5′非翻译区(5′UTR)和外显子1,以琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定,采用DNA测序技术筛查4对引物扩增产物的位点突变,然后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对催乳素受体基因和促黄体素beta亚基基因的4个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析,分析高产奶山羊个体(F1代)多态性与产羔数的关系及不同基因型组合与产羔数之间的关系,并上溯亲代(F0代),跟踪子代(F2代),检测母羊个体的基因型组合与产羔数的关系,分析不同基因型在多胎性状形成中的贡献。

    一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法

    公开(公告)号:CN102605064A

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201210061547.3

    申请日:2012-03-09

    Abstract: 本发明公开了一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法,以连续产2羔及以上的奶山羊基因组DNA为模板,利用4对引物分别扩增催乳素受体基因内含子2和外显子10,以及促黄体素beta亚基基因5′非翻译区(5′UTR)和外显子1,以琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定,采用DNA测序技术筛查4对引物扩增产物的位点突变,然后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对催乳素受体基因和促黄体素beta亚基基因的4个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析,分析高产奶山羊个体(F1代)多态性与产羔数的关系及不同基因型组合与产羔数之间的关系,并上溯亲代(F0代),跟踪子代(F2代),检测母羊个体的基因型组合与产羔数的关系,分析不同基因型在多胎性状形成中的贡献。

    白细胞介素-2基因整合表达载体的构建及定位方法

    公开(公告)号:CN101921797A

    公开(公告)日:2010-12-22

    申请号:CN201010199334.8

    申请日:2010-06-12

    Abstract: 人白细胞介素-2基因整合表达载体的构建,以人静脉血为试验材料,提取总RNA,反转录成cDNA,针对人白介素2基因的编码区,设计一对含酶切位点的特异性引物,分别引入白介素-2基因的编码区的ApaI酶切位点和SalI酶切位点,PCR扩增并克隆到pMDTM19-TVector载体中;以pBC1质粒为模板,扩增β-酪蛋白5′同源短臂和β-酪蛋白3′同源长臂,以pIRES质粒为模板,扩增新霉素抗性筛选标记基因序列;以pBluskm为载体骨架,分别与5′同源短臂、3′同源长臂和新霉素抗性筛选标记基因序列相连,构建重组载体5′-3′-E-neor,双酶切含IL-2基因的pMDTM19-T Vector载体,凝胶回收目的片段并与5′-3′-E-neor相连,构建IL-2基因整合表达载体;利用脂质体将构建的IL-2基因整合表达载体转染胎儿成纤维细胞,定位在β-酪蛋白基因序列中。

    利用神经内分泌因子基因选择山羊产羔性状的分子标记方法

    公开(公告)号:CN101906480A

    公开(公告)日:2010-12-08

    申请号:CN201010278144.5

    申请日:2010-09-10

    Abstract: 本发明公开了一种利用神经内分泌因子基因选择山羊产羔性状的分子标记方法,该方法以山羊基因组DNA序列为模板,在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下,利用对引物P1在PCR条件下进行扩增Kisspeptin基因内含子2,根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定;采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1的PCR扩增产物,发现引物P1扩增位点存在1个碱基的突变和8bp的碱基缺失,然后对引物P1的扩增产物进行基因分型和基因频率分析,以及与关中奶山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析;结果表明:Kisspeptin基因内含子2由引物P1检测的SNPs位点可用作山羊产羔数性状选择的分子标记。

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