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公开(公告)号：CN101899526A
公开(公告)日：2010-12-01
申请号：CN201010263060.4
申请日：2010-08-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用引物P1和P2在PCR条件下分别扩增KITL基因内含子1和6，根据琼脂糖凝胶电泳结果判定目的片段的大小；用限制性内切酶CviAⅡ消化引物P1的PCR扩增产物后，再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切后的扩增片段，引物P1的扩增产物存在2个碱基的突变；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P2的PCR扩增产物，引物P2的扩增产物存在1个碱基的突变，然后对引物P1和P2的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊、西农萨能奶山羊和布尔山羊的产羔数之间进行关联分析，表明KITL基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可作为山羊产羔数性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN101845506A
公开(公告)日：2010-09-29
申请号：CN201010199486.8
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法，以连续产2羔及以上的奶山羊基因组DNA为模板，利用4对引物分别扩增催乳素受体基因内含子2和外显子10，以及促黄体素beta亚基基因5′非翻译区(5′UTR)和外显子1，以琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查4对引物扩增产物的位点突变，然后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对催乳素受体基因和促黄体素beta亚基基因的4个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析高产奶山羊个体(F1代)多态性与产羔数的关系及不同基因型组合与产羔数之间的关系，并上溯亲代(F0代)，跟踪子代(F2代)，检测母羊个体的基因型组合与产羔数的关系，分析不同基因型在多胎性状形成中的贡献。
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公开(公告)号：CN101845507B
公开(公告)日：2012-05-09
申请号：CN201010199506.1
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊促性腺激素释放激素基因外显子4和生长分化因子9基因外显子2三个碱基突变多态性的方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用2对引物P1和P2在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1和P2的PCR扩增产物，发现这两个扩增位点存在3个碱基的突变，然后对两个基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：GnRH基因外显子4(包含部分内含子3和3′非翻译区)和GDF9基因外显子2基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊产羔性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN101845507A
公开(公告)日：2010-09-29
申请号：CN201010199506.1
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68 , G01N27/447
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊促性腺激素释放激素基因外显子4和生长分化因子9基因外显子2三个碱基突变多态性的方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在Taq DNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用2对引物P1和P2在PCR条件下进行扩增，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1和P2的PCR扩增产物，发现这两个扩增位点存在3个碱基的突变，然后对两个基因的SNPs进行基因分型和基因频率分析，以及与布尔山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：GnRH基因外显子4(包含部分内含子3和3′非翻译区)和GDF9基因外显子2基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可用作山羊产羔性状选择的分子标记。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102605064A
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN201210061547.3
申请日：2012-03-09
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种良种奶山羊多基因聚合的选育方法，以连续产2羔及以上的奶山羊基因组DNA为模板，利用4对引物分别扩增催乳素受体基因内含子2和外显子10，以及促黄体素beta亚基基因5′非翻译区(5′UTR)和外显子1，以琼脂糖凝胶电泳对各扩增产物进行大小判定，采用DNA测序技术筛查4对引物扩增产物的位点突变，然后利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对催乳素受体基因和促黄体素beta亚基基因的4个位点的SNPs进行基因分型和基因频率分析，分析高产奶山羊个体(F1代)多态性与产羔数的关系及不同基因型组合与产羔数之间的关系，并上溯亲代(F0代)，跟踪子代(F2代)，检测母羊个体的基因型组合与产羔数的关系，分析不同基因型在多胎性状形成中的贡献。
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公开(公告)号：CN101921797A
公开(公告)日：2010-12-22
申请号：CN201010199334.8
申请日：2010-06-12
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 人白细胞介素-2基因整合表达载体的构建，以人静脉血为试验材料，提取总RNA，反转录成cDNA，针对人白介素2基因的编码区，设计一对含酶切位点的特异性引物，分别引入白介素-2基因的编码区的ApaI酶切位点和SalI酶切位点，PCR扩增并克隆到pMDTM19-TVector载体中；以pBC1质粒为模板，扩增β-酪蛋白5′同源短臂和β-酪蛋白3′同源长臂，以pIRES质粒为模板，扩增新霉素抗性筛选标记基因序列；以pBluskm为载体骨架，分别与5′同源短臂、3′同源长臂和新霉素抗性筛选标记基因序列相连，构建重组载体5′-3′-E-neor，双酶切含IL-2基因的pMDTM19-T Vector载体，凝胶回收目的片段并与5′-3′-E-neor相连，构建IL-2基因整合表达载体；利用脂质体将构建的IL-2基因整合表达载体转染胎儿成纤维细胞，定位在β-酪蛋白基因序列中。
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公开(公告)号：CN101906480A
公开(公告)日：2010-12-08
申请号：CN201010278144.5
申请日：2010-09-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用神经内分泌因子基因选择山羊产羔性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用对引物P1在PCR条件下进行扩增Kisspeptin基因内含子2，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1的PCR扩增产物，发现引物P1扩增位点存在1个碱基的突变和8bp的碱基缺失，然后对引物P1的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：Kisspeptin基因内含子2由引物P1检测的SNPs位点可用作山羊产羔数性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN101899526B
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201010263060.4
申请日：2010-08-26
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种山羊产羔性状的分子标记选择方法，以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用引物P1和P2在PCR条件下分别扩增KITL基因内含子1和6，根据琼脂糖凝胶电泳结果判定目的片段的大小；用限制性内切酶CviAⅡ消化引物P1的PCR扩增产物后，再用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测酶切后的扩增片段，引物P1的扩增产物存在2个碱基的突变；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P2的PCR扩增产物，引物P2的扩增产物存在1个碱基的突变，然后对引物P1和P2的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊、西农萨能奶山羊和布尔山羊的产羔数之间进行关联分析，表明KITL基因由引物P1和P2检测的SNPs位点可作为山羊产羔数性状选择的分子标记。
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公开(公告)号：CN101906480B
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201010278144.5
申请日：2010-09-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开了一种利用神经内分泌因子基因选择山羊产羔性状的分子标记方法，该方法以山羊基因组DNA序列为模板，在TaqDNA聚合酶、缓冲环境、Mg2+、dNTPs存在的情况下，利用对引物P1在PCR条件下进行扩增Kisspeptin基因内含子2，根据琼脂糖凝胶电泳对其进行目的片段大小判定；采用聚丙烯酰胺凝胶电泳检测引物P1的PCR扩增产物，发现引物P1扩增位点存在1个碱基的突变和8bp的碱基缺失，然后对引物P1的扩增产物进行基因分型和基因频率分析，以及与关中奶山羊和西农萨能奶山羊的产羔性状之间进行关联分析；结果表明：Kisspeptin基因内含子2由引物P1检测的SNPs位点可用作山羊产羔数性状选择的分子标记。
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