公开(公告)号：CN116593697A

公开(公告)日：2023-08-15

申请号：CN202310386227.3

申请日：2023-04-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  宋睿 ,  钱昊天 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  叶建强

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/68 ,  G01N33/58 ,  C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种检测Ⅱ型鸡星状病毒抗体的ELISA试剂盒及制备方法，运用感染Ⅱ型鸡星状病毒的LMH细胞进行Cell‑ELISA实验，进行Ⅱ型鸡星状病毒抗体的检测。该方法与新城疫病毒、禽流感病毒、鸡传染性贫血病毒、禽白血病毒、马立克病毒、鸡传染性法氏囊病毒的阳性血清无交叉反应性，说明该方法具有良好的特异性。利用全病毒感染的Cell‑ELISA方法检测待检鸡血清样品，并组装成用于测定血清中鸡星状病毒抗体的试剂盒。该试剂盒可用于Ⅱ型鸡星状病毒感染血清学诊断以及抗体的水平的监测、流行病学调查等，为Ⅱ型鸡星状病毒防制提供一种新型有效的检测手段。

公开(公告)号：CN111217916B

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202010039900.2

申请日：2020-01-15

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  宁晨 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  黄晓星 ,  王加圆 ,  王倩倩 ,  郑建高 ,  王建 ,  王姣 ,  邓建中 ,  王秋生 ,  洪枫

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/866 ,  C12N7/01 ,  A61K39/295 ,  A61K39/215 ,  A61K39/225 ,  A61K39/15 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明涉及猪三种致腹泻病毒中和抗原表位融合蛋白重构体及其制备方法和应用。所述猪三种致腹泻病毒PEDV、TGEV、PoRV的中和抗原表位融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。编码该中和抗原表位融合蛋白的基因序列如SEQ ID NO.1所示。本发明分别选取PEDV、TGEV、PoRV的主要中和抗原表位基因并进行拼接，而后通过重组杆状病毒真核表达系统对串联基因进行融合蛋白表达。将表达串联基因融合蛋白的重组病毒通过腹腔注射的方式免疫小鼠，可诱导机体产生免疫应答，具有较强的免疫原性。本发明为预防PEDV、TGEV、PoRV感染提供了一种新的方法，也为猪腹泻病毒新型疫苗的开发奠定了基础。

公开(公告)号：CN115820638B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202211207679.2

申请日：2022-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  钱金涵 ,  朱亭帆 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  羊扬 ,  闫彩虹 ,  叶建强 ,  钱琨 ,  王倩倩 ,  邓建中 ,  王建 ,  郑建高 ,  金松 ,  洪枫 ,  王培永 ,  张文成 ,  卞红春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA，是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知，所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖，而且能够作为一种新的基因治疗手段，应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制，同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备，从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。

公开(公告)号：CN116426489A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310320468.8

申请日：2023-03-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋蕙如 ,  叶建强 ,  任丹 ,  曹旭东 ,  郭艺文 ,  李涵 ,  殷楠 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/861 ,  C12N15/40 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术的表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，所述新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端，其序列如SEQ ID NO.1所示。重组血清4型禽腺病毒，其中使用新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端替换FAdV‑4的Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸，FAdV‑4的Fiber‑2基因序列如SEQ ID NO.2所示。通过本发明，利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端，成功获得表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒，为同时免疫防控血清4型禽腺病毒和新型鹅星状病毒提供了技术支撑与二联弱毒疫苗候选。

公开(公告)号：CN116286989A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310132143.7

申请日：2023-02-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 邵红霞 ,  唐浩洋 ,  吉李飞 ,  秦爱建 ,  金文杰 ,  钱琨 ,  叶建强

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/35

Abstract: 本发明涉及一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法，属于生物技术领域；包括以下步骤：（1）构建GPV‑VP3基因重组杆状病毒表达载体。（2）表达重组GPV蛋白的杆状病毒包装和传代。（3）将带有GPV‑VP3基因的重组杆状病毒质粒转染sf9，28℃培养5‑7天，待70%细胞出现病变时收集细胞裂解上清，作为第一代重组杆状病毒种毒并保存，之后进行病毒传代，传至第三代时扩大培养。本发明所述的鹅细小病毒VP3蛋白利用杆状病毒载体表达，表达量高且带有易于纯化的His标签，可以制备成GPV亚单位疫苗，也可以建立基于VP3蛋白的鹅细小病毒间接免疫荧光方法。

公开(公告)号：CN111825761B

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN202010521152.1

申请日：2020-06-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  刘明珠 ,  钱琨 ,  邵红霞 ,  叶建强

IPC: C07K16/08 ,  C12N5/20 ,  G01N33/535 ,  G01N33/543 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开的抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体针对的抗原表位位于猪瘟病毒E2蛋白的第1~50位氨基酸和/或第51~100位氨基酸。本发明还公开了抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体的制备方法及其应用。本发明还公开猪瘟病毒定性或定量检测试剂盒。本发明通过定向克隆猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的E2蛋白第1~50位氨基酸或第51‑100位氨基酸对应的基因片段，表达得到的蛋白进行免疫动物得到能分泌2株抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体的杂交细胞瘤。本发明可以很好地检测出样本中的E2蛋白，并进一步定量，从而控制疫苗的质量。

公开(公告)号：CN111944032B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202010745120.X

申请日：2020-07-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  沈逵 ,  何倩 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C07K14/465 ,  C07K16/18 ,  A61K39/00 ,  A61P37/04 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能诱导抗鸡STING蛋白抗体的多肽，其氨基酸序列为MPQDPSTRSSPARL，如SEQ ID NO.1所示。本发明制备的抗体能够与转染STING的293T细胞反应，还可以与天然家禽细胞中的STING蛋白发生特异性反应，该抗体不仅可以用于间接免疫荧光检测STING蛋白，还可以用于免疫蛋白印迹实验中STING蛋白的检测。该发明经济快速，方便，适用于相关研究中快速制备抗体工具。

公开(公告)号：CN109055613A

公开(公告)日：2018-12-21

申请号：CN201810981234.7

申请日：2018-08-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  冯春 ,  武宗仪 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  叶建强 ,  金文杰

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/6844 ,  C12N15/11 ,  C12R1/93

CPC classification number: C12Q1/701 ,  C12Q1/6844 ,  C12Q2531/119 ,  C12Q2563/107

Abstract: 本发明属于动物传染病学检测领域，本发明公开了鸡Ⅰ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组，根据鸡Ⅰ型星状病毒基因组保守序列设计引物：外引物F3和B3，序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所列；内引物FIP和BIP，序列如SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所列。本发明还公开了鸡Ⅰ型星状病毒检测试剂盒，包括鸡Ⅰ型星状病毒环介导等温扩增检测引物组。本发明又公开了鸡Ⅰ型星状病毒环介导等温扩增检测方法：根据所设计的引物建立一种检测鸡Ⅰ型星状病毒的环介导等温扩增方法。本发明的检测方法具有快速、高效、特异性强、准确性好、灵敏度高、无需昂贵仪器设备，便于基层现场使用，方便快速。

公开(公告)号：CN108030917A

公开(公告)日：2018-05-15

申请号：CN201711360855.5

申请日：2017-12-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  邹海涛 ,  叶建强 ,  邵红霞 ,  钱琨

IPC: A61K39/39 ,  A61K39/145 ,  A61P37/04 ,  A61P31/16

CPC classification number: A61K39/12 ,  A61K39/39 ,  A61K2039/5252 ,  A61K2039/55516 ,  A61K2039/57 ,  C12N2760/16034

Abstract: 一种多肽免疫佐剂及其应用，涉及佐剂技术领域，特别是一种多肽免疫佐剂及其疫苗的技术领域。多肽免疫佐剂的主要成分为重组鸡Toll样受体3配体结合域，可在疫苗佐剂、疫苗和在促进机体对抗原产生免疫应答产品中应用。

公开(公告)号：CN103995123B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410266781.9

申请日：2014-06-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  王志明 ,  丁家波 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  冯忠武

IPC: G01N33/577

Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法，属于生物技术检测领域，将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板；再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中；并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中，水浴后用PBST洗涤，再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体，孵育洗涤后，进行显色反应，测得各板孔的OD450值，计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测，PI值均低于30%，可以有效地排除假阳性结果的发生。