公开(公告)号：CN103995123A

公开(公告)日：2014-08-20

申请号：CN201410266781.9

申请日：2014-06-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  王志明 ,  丁家波 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  冯忠武

IPC: G01N33/577

CPC classification number: G01N33/56911 ,  G01N33/54373 ,  G01N2333/23

Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法，属于生物技术检测领域，将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板；再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中；并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中，水浴后用PBST洗涤，再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体，孵育洗涤后，进行显色反应，测得各板孔的OD450值，计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测，PI值均低于30%，可以有效地排除假阳性结果的发生。

公开(公告)号：CN103995123B

公开(公告)日：2016-08-17

申请号：CN201410266781.9

申请日：2014-06-16

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  王志明 ,  丁家波 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  冯忠武

IPC: G01N33/577

Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法，属于生物技术检测领域，将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板；再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中；并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中，水浴后用PBST洗涤，再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体，孵育洗涤后，进行显色反应，测得各板孔的OD450值，计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测，PI值均低于30%，可以有效地排除假阳性结果的发生。