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公开(公告)号:CN103278635B
公开(公告)日:2014-10-22
申请号:CN201310213811.5
申请日:2013-05-31
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种动物布鲁氏菌病竞争ELISA抗体检测试剂盒。该试剂盒使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体,检测中该单克隆抗体能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争,而与其它病原细菌无竞争性,特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性,有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157的缺陷,提高了检测特异性;本试剂盒使用了对猪牛羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌S2株LPS作为包被抗原,既提高了LPS的产量,降低生产成本,又提高了检测敏感性。
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公开(公告)号:CN103995123A
公开(公告)日:2014-08-20
申请号:CN201410266781.9
申请日:2014-06-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
CPC classification number: G01N33/56911 , G01N33/54373 , G01N2333/23
Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru-5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。
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公开(公告)号:CN103995123B
公开(公告)日:2016-08-17
申请号:CN201410266781.9
申请日:2014-06-16
Applicant: 扬州大学
IPC: G01N33/577
Abstract: 一种竞争ELISA试剂盒检测牛布氏杆菌病的方法,属于生物技术检测领域,将超声裂解处理的牛种布鲁氏菌A99包被ELISA酶标板;再将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10和稀释的待检血清样品加入酶标板的板孔中;并同时分别将抗布鲁氏菌特异单克隆抗体bru?5C10分别和已知的阴、阳性血清加入酶标板的板孔中,水浴后用PBST洗涤,再向各板孔中分别加入抗小鼠IgG酶标抗体,孵育洗涤后,进行显色反应,测得各板孔的OD450值,计算各板孔的抑制率。本发明利用建立的cELISA方法对小肠结肠炎耶尔森菌O9和大肠杆菌O157高免阳性血清进行检测,PI值均低于30%,可以有效地排除假阳性结果的发生。
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公开(公告)号:CN103278635A
公开(公告)日:2013-09-04
申请号:CN201310213811.5
申请日:2013-05-31
IPC: G01N33/577
Abstract: 本发明涉及一种快速、高效、准确的动物布鲁氏菌病诊断方法。一方面,该方法中使用了一种能与布鲁氏菌特异性结合的3E4株单克隆抗体,在布鲁氏菌病抗体检测中,该单克隆抗体3E4株能与布鲁氏菌产生的抗体产生特异性竞争,而与其它病原细菌无竞争性,特别是与布鲁氏菌有强烈交叉反应的小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157抗血清无竞争性,有效解决了目前商品化布病竞争ELISA试剂盒无法区分小肠结肠炎耶尔森氏菌O9和大肠杆菌O157干扰的技术缺陷,提高了检测的特异性。另一方面,本试剂盒使用了对猪、牛、羊均具有良好反应原性的猪种布鲁氏菌(S2株)脂多糖(LPS)作为包被抗原,不仅提高了LPS的产量,降低了生产成本,而且提高了检测的敏感性。
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