公开(公告)号：CN116286989A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310132143.7

申请日：2023-02-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 邵红霞 ,  唐浩洋 ,  吉李飞 ,  秦爱建 ,  金文杰 ,  钱琨 ,  叶建强

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/35

Abstract: 本发明涉及一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法，属于生物技术领域；包括以下步骤：（1）构建GPV‑VP3基因重组杆状病毒表达载体。（2）表达重组GPV蛋白的杆状病毒包装和传代。（3）将带有GPV‑VP3基因的重组杆状病毒质粒转染sf9，28℃培养5‑7天，待70%细胞出现病变时收集细胞裂解上清，作为第一代重组杆状病毒种毒并保存，之后进行病毒传代，传至第三代时扩大培养。本发明所述的鹅细小病毒VP3蛋白利用杆状病毒载体表达，表达量高且带有易于纯化的His标签，可以制备成GPV亚单位疫苗，也可以建立基于VP3蛋白的鹅细小病毒间接免疫荧光方法。