一种对硝基苄基酯酶突变体及应用

    公开(公告)号:CN113201516B

    公开(公告)日:2022-05-27

    申请号:CN202110465504.0

    申请日:2021-04-28

    Abstract: 本发明公开了一种对硝基苄基酯酶突变体及其在酶催化dl‑‑薄荷酯的手性拆分制备l‑薄荷醇中的应用。所述突变体由氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示的野生型对硝基苄基酯酶在315位进行定点饱和突变获得。本发明的有益效果主要体现在:①本发明酯酶突变体无需添加助溶剂,酶催化活性维持较高水平;②在无助溶剂体系下,突变体酶催化的立体选择性较野生型显著提高。将该突变体酶通过大肠杆菌过量表达后用于催化反应,并以10~200g/L的dl‑乙酸薄荷酯为底物,进行水解拆分制备l‑薄荷醇,结果表明l‑乙酸薄荷酯底物转化率>70%,产物l‑薄荷醇的eep值>95%,表现出良好的工业应用性能。

    一种天然等同香料乙酸L-薄荷酯的生物合成方法

    公开(公告)号:CN112481317A

    公开(公告)日:2021-03-12

    申请号:CN202011382743.1

    申请日:2020-11-30

    Abstract: 本发明提供一种天然等同香料乙酸L‑薄荷酯的生物合成方法,步骤一,在装有搅拌器、分水器、温度计的三颈烧瓶中,依次加入L‑薄荷脑、乙酸乙烯酯和带水剂,搅拌溶解后,加入Amano脂肪酶IME,设置反应温度为25~35℃,搅拌24小时;本发明采用固定Amano脂肪酶IME,选用薄荷醇和乙酸乙烯酯反应,条件温和,可在低于35℃的条件下生物合成乙酸薄荷酯,反应条件便捷,操作简便,可达到较高的转化率,产品ee值大于99.0%,含量大于99.0%,同时,固定Amano脂肪酶IME和溶剂可循环套用,降低了生产成本,可大规模工业化生产,产品的纯度好,收率高,香气与天然乙酸薄荷酯基本一致,可满足市场对天然乙酸薄荷酯的需求,达到替代效果。

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