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公开(公告)号:CN103525749B
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201310538151.8
申请日:2013-11-04
Applicant: 大连海洋大学
Abstract: 本发明提供一种三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法。所述三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为C2013110。所述三倍体泥鳅鳍细胞系具有对鲤春病毒血症病毒的易感性。所述三倍体泥鳅鳍细胞系的生物学特性包括:细胞为成纤维细胞样、胞浆丰富贴壁生长、具有接触抑制生长特性,细胞倍增时间为36.01小时,特征染色体数目为75条。
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公开(公告)号:CN103525749A
公开(公告)日:2014-01-22
申请号:CN201310538151.8
申请日:2013-11-04
Applicant: 大连海洋大学
Abstract: 本发明提供一种三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法。所述三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为C2013110。所述三倍体泥鳅鳍细胞系具有对鲤春病毒血症病毒的易感性。所述三倍体泥鳅鳍细胞系的生物学特性包括:细胞为成纤维细胞样、胞浆丰富贴壁生长、具有接触抑制生长特性,细胞倍增时间为36.01小时,特征染色体数目为75条。
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公开(公告)号:CN101974627B
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201010505137.4
申请日:2010-10-13
Applicant: 大连海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法,是取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗;将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段,置于摇床上室温避光培养1~3h;在培养皿底部涂一层1%琼脂并盛入4%冰醋酸溶液,从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4%冰醋酸溶液中,待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来,再将卵核周围的卵黄剥掉,将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜,所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成,甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1;再取出冷冻过夜的3~5粒卵核于载玻片上放置10~20秒;然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30~45min,纯水避光浸泡载玻片30min后,将盖玻片盖在载玻片上。
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公开(公告)号:CN103555657B
公开(公告)日:2016-05-04
申请号:CN201310538211.6
申请日:2013-11-04
Applicant: 大连海洋大学
Abstract: 本发明提供一种四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF及其建立方法。所述细胞系于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCC No:C2013111。所述四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF支持鲤春病毒血症病毒的生长和复制。所述四倍体泥鳅鳍细胞系TEMF的生物学特性包括:细胞为成纤维细胞样、胞浆丰富贴壁生长、具接触抑制生长特性;细胞倍增时间为41.45小时;特征染色体数目为100条。
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公开(公告)号:CN103525749A9
公开(公告)日:2014-04-23
申请号:CN201310538151.8
申请日:2013-11-04
Applicant: 大连海洋大学
Abstract: 本发明提供一种三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF及其建立方法。所述三倍体泥鳅鳍细胞系TRMF于2013年8月19日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏编号为C2013110。所述三倍体泥鳅鳍细胞系具有对鲤春病毒血症病毒的易感性。所述三倍体泥鳅鳍细胞系的生物学特性包括:细胞为成纤维细胞样、胞浆丰富贴壁生长、具有接触抑制生长特性,细胞倍增时间为36.01小时,特征染色体数目为75条。
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公开(公告)号:CN102835338A
公开(公告)日:2012-12-26
申请号:CN201210345266.0
申请日:2012-09-18
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明公开一种无需卵子失活及不经染色体加倍处理,可快速、高效生产雄核发育二倍体泥鳅且孵化率高的冷休克诱导天然四倍体泥鳅雄核发育的方法,依次按如下步骤进行:取天然雄性四倍体泥鳅及雌性二倍体泥鳅进行催产,分别取雄性四倍体泥鳅的精液及雌性二倍体泥鳅的卵子,所得精液用Kurokura’ssolution溶液100倍稀释待用;将稀释后的精液与卵子混合形成受精卵,将受精卵置于3℃冰水中,浸泡60min,然后置于常温水中进行孵化。
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公开(公告)号:CN101974627A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010505137.4
申请日:2010-10-13
Applicant: 大连海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法,是取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗;将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段,置于摇床上室温避光培养1~3h;在培养皿底部涂一层1%琼脂并盛入4%冰醋酸溶液,从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4%冰醋酸溶液中,待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来,再将卵核周围的卵黄剥掉,将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜,所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成,甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1;再取出冷冻过夜的3~5粒卵核于载玻片上放置10~20秒;然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30~45min,纯水避光浸泡载玻片30min后,将盖玻片盖在载玻片上。
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公开(公告)号:CN101974622A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010293726.0
申请日:2010-09-28
Applicant: 大连海洋大学
Abstract: 本发明公开一种鱼类染色体荧光原位杂交方法,是在获得图像清晰、染色体分散良好的中期分裂相标本的基础上,应用荧光原位杂交技术(FISH),以Biotin-16-dUTP为标记物,用切口平移法标记探针,杂交信号经过两级放大,将人的5.8S+28SrDNA探针清晰地定位在多倍体鱼类的染色体核仁组织区域(NOR)。可通过观察核糖体5.8S+28SrDNA在多倍体鱼类的染色体定位来比较分析多倍体的染色体倍性及核型,即分析多倍体鱼类是遗传多倍体,还是进化多倍体,以及是同源多倍体还是异源多倍体。
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公开(公告)号:CN103651195A
公开(公告)日:2014-03-26
申请号:CN201310592906.2
申请日:2013-11-22
IPC: A01K61/00
CPC classification number: Y02A40/81
Abstract: 本发明公开一种冷休克诱导大鳞副泥鳅雄核发育单倍体的方法,其特征在于:所述的方法按照以下步骤进行:取性腺发育良好的大鳞副泥鳅进行催产,分别取雄性大鳞副泥鳅的精液和雌性大鳞副泥鳅的卵子,将所得的精液用Kurokura’ssolution溶液稀释80-120倍;将稀释后的精子与卵子混合形成受精卵,将受精卵至于2.5-3.5℃的水中,冷休克处理50-70min,然后将受精卵放入常温水中进行孵化。这是一种无需卵子失活、可快速、高效生产大鳞副泥鳅雄核发育单倍体的方法。
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公开(公告)号:CN106376501A
公开(公告)日:2017-02-08
申请号:CN201610924511.1
申请日:2016-10-24
Applicant: 大连海洋大学
IPC: A01K61/10
CPC classification number: Y02A40/812 , A01K61/00
Abstract: 本发明公开了一种生产泥鳅四倍体的方法,所用雄亲鱼为自然四倍体泥鳅,雌亲鱼为二倍体泥鳅,干法受精,受精后立即将受精卵放入0℃水中处理50-60min,之后置于常温曝气水中正常孵化。本发明选用染色体数目不同的两种泥鳅即二倍体(2n=50)和四倍体(4n=100)泥鳅,通过冷休克处理抑制第二极体释放,诱导四倍体,对其所产生后代的染色体数目、DNA相对含量、血红细胞核体积、染色体数目及微卫星等进行了较系统的分析,证明四倍体泥鳅诱导真实性和可靠性,为泥鳅种质资源保护与利用以及进一步对泥鳅在水产养殖在生产起到应用价值。
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