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公开(公告)号:CN101974627A
公开(公告)日:2011-02-16
申请号:CN201010505137.4
申请日:2010-10-13
Applicant: 大连海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法,是取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗;将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段,置于摇床上室温避光培养1~3h;在培养皿底部涂一层1%琼脂并盛入4%冰醋酸溶液,从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4%冰醋酸溶液中,待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来,再将卵核周围的卵黄剥掉,将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜,所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成,甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1;再取出冷冻过夜的3~5粒卵核于载玻片上放置10~20秒;然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30~45min,纯水避光浸泡载玻片30min后,将盖玻片盖在载玻片上。
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公开(公告)号:CN101974627B
公开(公告)日:2013-01-16
申请号:CN201010505137.4
申请日:2010-10-13
Applicant: 大连海洋大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 本发明公开一种鱼类卵巢生殖细胞染色体的制备方法,是取活体成熟卵巢并用生理盐水清洗;将卵巢置于含有1μg/ml雌激素的生理盐水中且将卵巢切成小段,置于摇床上室温避光培养1~3h;在培养皿底部涂一层1%琼脂并盛入4%冰醋酸溶液,从所培养的卵巢中取出几粒卵放入4%冰醋酸溶液中,待卵核移动到动物极后将卵核剥离出来,再将卵核周围的卵黄剥掉,将卵核放入装有预冷的卡诺固定液中冷冻过夜,所述卡诺固定液是由甲醇和冰醋酸混合而成,甲醇与冰醋酸的体积比为3∶1;再取出冷冻过夜的3~5粒卵核于载玻片上放置10~20秒;然后再将载有卵核的载玻片放入装有染色剂的染缸中避光染色30~45min,纯水避光浸泡载玻片30min后,将盖玻片盖在载玻片上。
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