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公开(公告)号:CN103484533A
公开(公告)日:2014-01-01
申请号:CN201310227137.6
申请日:2013-06-08
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属药物基因组学和基因诊断领域,涉及检测HLA-B*5801等位基因的方法,包括:取待测样本DNA,用三对特异性引物和一对内参引物,用序列特异性引物法扩增DNA片段后用琼脂糖凝胶电泳分析扩增结果,或,抽提样本DNA后,用一对特异性引物、一对内参引物和3条荧光探针,用Taqman探针法在荧光定量PCR仪上扩增DNA片段,通过扩增曲线分析结果。本方法可结合琼脂糖凝胶电泳、高分辨率熔解曲线、SYBRGreen荧光定量PCR等结果判读工具,具有快速、简便、灵活、分辨率高、无污染等特点,适用检测外周血、毛发等样本中HLA-B*5801等位基因,用以判断痛风或高尿酸血症患者服用别嘌呤醇后出现严重皮肤不良反应的概率。
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公开(公告)号:CN101597617A
公开(公告)日:2009-12-09
申请号:CN200910054031.4
申请日:2009-06-26
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属微生物领域,涉及一种用于革兰氏阳性菌的高效转座系统pBTn,采用温度敏感性质粒pBT2作为载体,其成功转入目的菌中后,通过升高培养温度而被去除;温度敏感性质粒中插入两端带有重复序列的红霉素的耐药基因,在红霉素的耐药基因和来源于mariner真核转座子的转座酶间插入来源于pTX15的启动子,该启动子在葡萄糖存在下被遏制表达,在无葡萄糖,木糖存在可活化,能有效地控制转座酶表达的时间。本发明建立的转座子突变文库无明显插入热点,具有高度随机性和单一性插入到革兰氏阳性菌基因组的特点。实用性明显高于目前被广泛使用于原核生物的转座系统Tn551或Tn917。
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公开(公告)号:CN113373219A
公开(公告)日:2021-09-10
申请号:CN202010159223.8
申请日:2020-03-09
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/6886 , G01N33/574
Abstract: 本发明属生物和医学检验技术领域,涉及一种肿瘤干性细胞检测方法及其用途,本发明采用原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)系列特异性标志物从体液、肿瘤组织或培养的肿瘤细胞中富集、捕获、分选、检测其中的肿瘤干性细胞‑PGC样肿瘤细胞(PGC‑like tumor cells),可用于肿瘤的恶性分级、复发预测、转移预测和疗效评估;本发明的方法能有效为肿瘤的恶性程度分级、复发预测、转移预测和疗效评估。
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公开(公告)号:CN104293873A
公开(公告)日:2015-01-21
申请号:CN201310297273.2
申请日:2013-07-16
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12P33/00
Abstract: 本发明属于生物细胞工程领域,涉及一种制备雌二醇的方法,具体涉及使用诱导后哺乳动物细胞体外培养制备雌二醇的方法。本发明的方法中,采用由哺乳动物细胞通过体外的特殊诱导所产生的细胞群,在体外特定的条件下培养,能源源不断地分泌雌激素;所述体系中雌激素的分泌完全模拟体内的合成过程,生成雌二醇过程中的副产品少、方法简单、条件温和,对环境几乎不构成危害;与现有技术的制备手段相比具有不可取代的优势。本发明方法在体外经过特殊条件诱导后哺乳动物的体细胞具有产生雌二醇的能力,该方法为获得雌二醇提供了一条新的途径。
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公开(公告)号:CN101736078A
公开(公告)日:2010-06-16
申请号:CN200810202235.3
申请日:2008-11-05
Applicant: 上海复星医药(集团)股份有限公司 , 上海复星医学科技发展有限公司 , 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明涉及一种核酸等温扩增检测结核分枝杆菌活菌的方法及其试剂盒,检测步骤依次包括:结核分枝杆菌mRNA模板在60~70℃下解链后降温;加入逆转录酶、核糖核酸酶H、RNA聚合酶,在引物的引导下于37~42℃进行等温扩增,获得RNA扩增子;然后利用纳米金探针和捕获探针检测扩增子,通过层析杂交显色反应获得检测结果。杂交膜出现显色条带为mRNA阳性(有活菌存在),无条带为阴性。采用本方法的试剂盒可检测结核分枝杆菌活菌,具有准确灵敏、简便快速等优点,能克服已有方法鉴定时间长、操作复杂、特异性低等不足,可作为结核病诊断和预防、治疗疗效观察、抗结核药物筛选和敏感性实验等相关研究的辅助实验手段。
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公开(公告)号:CN114672554A
公开(公告)日:2022-06-28
申请号:CN202011549398.6
申请日:2020-12-24
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/6886 , C12N15/11
Abstract: 本发明属生物和医学检验技术领域,涉及检测肿瘤相关基因产物表达量的一种分子生物学方法,该方法可用于提供鉴别结直肠癌变、结直肠癌分类/型、预后评估等的参考。所涉及的基因包括:KRT23,KRT80,CA9,FOXQ1,CDH3,KIAA1199,CLDN2,KLK10,CLDN1,GRIN2D,NKD1,C6ORF223,MMP3,MMP11,TRIM29,TESC,GYLTL1B,NKD2,PRSS22,VWA2,REG1A,DPEP1,FABP6,CEL,CELP,CPNE7,RPL13AP20,TNFRSF6B,CYP19A1,RPLP0P2,GUCA2B,AQP8,CA1,GUCA2A,CA2,CLCA4,H19,FAP,NAT1等。上述基因(单个或任意组合)的联合应用有助于提供对结直肠癌的鉴定、分类/型、预后评估等参考;联合应用上述基因鉴别结直肠癌和正常结直肠组织,在特异性100%时,灵敏度可达97%。
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公开(公告)号:CN104293873B
公开(公告)日:2019-02-26
申请号:CN201310297273.2
申请日:2013-07-16
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12P33/00
Abstract: 本发明属于生物细胞工程领域,涉及制备雌二醇的方法,具体涉及使用诱导后哺乳动物细胞体外培养制备雌二醇的方法。本发明的方法中,采用由哺乳动物细胞通过体外的特殊诱导所产生的细胞群,在体外特定的条件下培养,能源源不断地分泌雌激素;所述体系中雌激素的分泌完全模拟体内的合成过程,生成雌二醇过程中的副产品少、方法简单、条件温和,对环境几乎不构成危害;与现有技术的制备手段相比具有不可取代的优势。本发明方法在体外经过特殊条件诱导后哺乳动物的体细胞具有产生雌二醇的能力,该方法为获得雌二醇提供了一条新的途径。
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公开(公告)号:CN101560480A
公开(公告)日:2009-10-21
申请号:CN200910006605.0
申请日:2009-01-24
Applicant: 复旦大学附属华山医院 , 上海交通大学
Abstract: 本发明属于微生物动物细胞系领域,涉及一株携带有与细菌生长有关的新基因组岛KpGI-2的肺炎克雷伯临床耐药菌株HS04160。已于2008年6月25日保藏,保藏单位:CGMCC,北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所,保藏编号:CGMCC No.2558,分类命名:肺炎克雷伯菌Klebsiella pneumoniae。本发明通过对肺炎克雷伯临床耐药菌株的筛选,得到6.4kb的基因序列并证明其属新的基因组岛,细菌活细胞计数试验证明KpGI-2中携带的基因对细菌的生长分别具有促进/抑制作用,提示该基因组岛与细菌生长相关。本发明实验显示,KpGI-2参与了肺炎克雷伯临床菌株感染的致病过程。所述的含有基因组岛KpGI-2的菌株对于肺炎克雷伯菌株的致病与耐药有着重要影响。
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公开(公告)号:CN101280301A
公开(公告)日:2008-10-08
申请号:CN200810034791.4
申请日:2008-03-18
Applicant: 复旦大学附属华山医院
Abstract: 本发明属生物技术领域,涉及一种利用整合子系统定点、定向的基因重组方法,采用整合子系统作为工具,首先构建在多克隆位点两侧含有attC序列的工具载体,然后将目的基因克隆到该载体,目的基因在宿主菌表达整合酶的情况下,能够定点且定向地插入到大肠杆菌基因组DNA中的attI位点。本方法简便易行,不需要特殊的仪器和试剂,仅需要4天时间就可将目的基因插入到宿主菌的染色体DNA中。所述的整合子系统作为分子生物学工具具有良好的应用前景,可用于获取含有目的基因的大片段DNA;同时,目的基因插入到宿主染色体定点且定向的特性,有助于解决在基因治疗中目的基因插入基因组DNA的靶向性问题。
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公开(公告)号:CN114438201A
公开(公告)日:2022-05-06
申请号:CN202011225857.5
申请日:2020-11-05
Applicant: 复旦大学附属华山医院
IPC: C12Q1/6886 , G01N33/68 , G01N33/574
Abstract: 本发明属生物和医学检验领域,涉及一种肿瘤标志物组合及其应用,本发明的肿瘤标志物组合可用于制备预测肿瘤、肿瘤恶性程度及预后的制品;尤其是利用肿瘤标志物组合中的GDF15和ACVR1基因的甲基化水平及表达改变,预测肿瘤、肿瘤恶性程度及预后。本发明的制品可应用检测肿瘤组织、肿瘤组织培养物、体液中GDF15和ACVR1两个基因甲基化降低、表达量增加以实现预测肿瘤、鉴别肿瘤恶性程度和评估肿瘤预后等,其中所述的GDF15和ACVR1的单独检测和联合应用。本发明可为有效评估肿瘤恶性程度及预后,提供可靠的方法。
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