-
公开(公告)号：CN115896216A
公开(公告)日：2023-04-04
申请号：CN202211451601.5
申请日：2022-11-18
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种槲皮素‑3,4'‑O‑二葡萄糖苷的合成方法及其所用到的酶，以拟南芥（Arabidopsis thaliana）来源的UGT78D2和洋葱（Allium cepa）来源的UGT73G1突变体73G1_V371A为研究对象，利用蛋白质工程手段改造UGT78D2区域选择性以及73G1_V371A可溶性表达。同时引入蔗糖合酶（Sucrose synthase，SuSy），分别与73G1_V371A和UGT78D2及其突变体构成偶联体系，实现UDPG循环再生，并对SuSy的磷酸化突变进行了比较研究。最终搭建三酶共表达催化体系S31D‑F378S‑V371A，以槲皮素和蔗糖为底物催化合成Q3,4'G，转化合成Q3,4'G的量为4.4±0.03 g/L，产槲皮素‑3,4＇‑O‑二葡萄糖苷的产量较原始酶有显著的提高。
-
公开(公告)号：CN113322219A
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN202110188213.1
申请日：2021-02-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成姜黄素糖苷类化合物的方法。通过将糖基转移酶基因CaUGT2及蔗糖合成酶基因AtSUS1构建到表达载体上，导入到大肠杆菌中得到重组菌株，此重组菌株进行诱导表达后其可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，可对底物姜黄素进行高效催化。所述重组质粒为pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，在Nco I和EcoR I插入蔗糖合成酶AtSUS1基因，在Xho I和NdeI插入糖基转移酶CaUGT2，构成共表达重组质粒pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中得到重组菌株CaUGT2‑AtSUS1，重组菌株进行诱导表达后其糖基转移酶CaUGT2可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，催化合成姜黄素糖苷类化合物转化率达到98%，催化姜黄素生成姜黄素单糖苷和姜黄素双糖苷，其水溶性优于姜黄素，解决姜黄素水溶性差的问题。底物姜黄素浓度75mM，催化底物浓度较高，更适用于工业化中食品及药品行业。
-
公开(公告)号：CN113322219B
公开(公告)日：2023-01-17
申请号：CN202110188213.1
申请日：2021-02-19
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明公开了一种生物法催化合成姜黄素糖苷类化合物的方法。通过将糖基转移酶基因CaUGT2及蔗糖合成酶基因AtSUS1构建到表达载体上，导入到大肠杆菌中得到重组菌株，此重组菌株进行诱导表达后其可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，可对底物姜黄素进行高效催化。所述重组质粒为pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，在Nco I和EcoR I插入蔗糖合成酶AtSUS1基因，在Xho I和NdeI插入糖基转移酶CaUGT2，构成共表达重组质粒pRSF‑CaUGT2‑AtSUS1，将重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中得到重组菌株CaUGT2‑AtSUS1，重组菌株进行诱导表达后其糖基转移酶CaUGT2可溶性表达量比其他植物来源糖基转移酶有所提高，催化合成姜黄素糖苷类化合物转化率达到98%，催化姜黄素生成姜黄素单糖苷和姜黄素双糖苷，其水溶性优于姜黄素，解决姜黄素水溶性差的问题。底物姜黄素浓度75mM，催化底物浓度较高，更适用于工业化中食品及药品行业。
-
-
Search Results
3
records
(took 0.019 seconds)
