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公开(公告)号：CN114854810B
公开(公告)日：2024-01-26
申请号：CN202210686685.4
申请日：2022-06-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于微生物学发酵领域，具体涉及一种利用脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法：以一株能够合成bacillomycin D的芽孢杆菌为出发菌株，在发酵起始时分别添加0.25~5 mmol/L的丙酸钠、丙酸、丁酸等3种脂肪酸或脂肪酸盐，增加培养基中的游离脂肪酸，进而调控脂肪酸代谢途径，增加活性bacillomycin D发酵产量。本发明在基础培养基中添加丙酸钠、丙酸以及丁酸，均可使bacillomycin D产量显著提高，分别可达到对照组的1.44倍、1.4倍和1.1倍；丙酸钠的添加促进bacillomycin D合成基因的表达，从基因水平上佐证了其对bacillomycin D合成的促进作用。同时，丙酸钠可以引发部分信号因子表达上调，这些上调均可促进bacillomycin D的合成。此外，丙酸钠还可促进部分脂肪酸代谢相关酶的表达上调，进而促进脂肪酸的代谢。
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公开(公告)号：CN114891821B
公开(公告)日：2023-07-18
申请号：CN202210686953.2
申请日：2022-06-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于分子生物学和微生物发酵领域，提供一种Bacillomycin D高活性菌株及其构建方法和应用。该菌株构建方法包括如下步骤：同源臂的扩增、目的基因的扩增、融合片段扩增、线性载体扩增、重组整合质粒获得、转化子获得及检测。本发明利用温敏型质粒pKS2介导的同源重组双交换的方法，将Iturin A合成酶操纵子中的硫酯酶结构域IA‑TE替换至Bacillomycin D合成酶系中，获得高活性菌株fmbJ‑IA‑TE，Bacillomycin D产量为野生菌株的1.31倍，对黄曲霉菌的抑制效果也优于野生菌株。
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公开(公告)号：CN115976081A
公开(公告)日：2023-04-18
申请号：CN202211527707.9
申请日：2022-12-01
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种副溶血性弧菌和大肠杆菌O157：H7标准质粒、制备方法及其应用。本发明的副溶血性弧菌标准质粒样品采用副溶血性弧菌tlh、trh、toxR、gyrB、groEL基因以及自筛高特异靶基因VPA1585，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成；大肠杆菌O157：H7标准质粒样品采用大肠杆菌O157：H7 rfbE、fliC、stx1、stx2以及自筛高特异靶基因ECS2840，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成。本发明制备的标准质粒序列来源清晰、纯度高且应用能力良好，可应用于食源性致病菌核酸检测，为副溶血性弧菌、大肠杆菌O157：H7检测获得准确、可靠、具有可比性的检测结果提供保障。
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公开(公告)号：CN115028686A
公开(公告)日：2022-09-09
申请号：CN202210687664.4
申请日：2022-06-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种提高Bacillomycin D发酵产量的方法，以枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，通过添加生长因子VC，来提高Bacillomycin D产量。在本发明方法中，在发酵培养基中添加VC，可提高Bacillomycin D合成酶基因的相对表达量，促进氨基酸前体合成途径中关键酶基因转录，促进了degQ、comA、comP、comQ、sigM和spo0A等参与次级代谢产物合成的正调控信号因子的表达量上调，同时下调了一些负调控因子如rapC和abrB，使Bacillomycin D的产量提升至对照组的1.44倍；同时本发明方法成本低、操作简单方便，可以有效降低脂肽的生产成本、提高生产效率，有望用于大规模生产应用。
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公开(公告)号：CN114854810A
公开(公告)日：2022-08-05
申请号：CN202210686685.4
申请日：2022-06-17
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于微生物学发酵领域，具体涉及一种利用脂肪酸代谢调控提高抗菌脂肽bacillomycin D产量的方法：以一株能够合成bacillomycin D的芽孢杆菌为出发菌株，在发酵起始时分别添加0.25~5 mmol/L的丙酸钠、丙酸、丁酸等3种脂肪酸或脂肪酸盐，增加培养基中的游离脂肪酸，进而调控脂肪酸代谢途径，增加活性bacillomycin D发酵产量。本发明在基础培养基中添加丙酸钠、丙酸以及丁酸，均可使bacillomycin D产量显著提高，分别可达到对照组的1.44倍、1.4倍和1.1倍；丙酸钠的添加促进bacillomycin D合成基因的表达，从基因水平上佐证了其对bacillomycin D合成的促进作用。同时，丙酸钠可以引发部分信号因子表达上调，这些上调均可促进bacillomycin D的合成。此外，丙酸钠还可促进部分脂肪酸代谢相关酶的表达上调，进而促进脂肪酸的代谢。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111172055B
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN201911164407.7
申请日：2019-11-25
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了副干酪乳杆菌LHZ‑1及其在去除脱氧雪腐镰刀菌烯醇中的应用，通过筛选得出一种去除脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）的副干酪乳杆菌LHZ‑1，其在固体发酵培养过程中能够有效地去除DON，特别是应用于麦麸发酵过程中，不仅可以去除麦麸中的DON，还可以提高麦麸中粗蛋白以及膳食纤维的含量，改善麦麸适口性。
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公开(公告)号：CN107988245B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201711013192.X
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种密码子优化的普鲁兰酶及其表达载体与构建方法。它是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis168）密码子偏好性为基础，参考耐酸普鲁兰杆菌（Bacillus acidpullulyticus）普鲁兰酶基因，设计碱基序列，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在枯草芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子、mRNA稳定序列、信号肽以及它们的组合进行选择，得到一种能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达的组合。并实现了工业化生产同时提高了酶活稳定性。
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公开(公告)号：CN112625951A
公开(公告)日：2021-04-09
申请号：CN202011536832.7
申请日：2020-12-23
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种复合益生菌发酵剂及其制备方法与应用，属于食品加工技术领域。本发明所采用的菌种酿酒酵母、约氏乳杆菌和巴氏醋杆菌分离自传统酸面团，以菌体数量1~5：1~50：1的比例制备复合益生菌发酵剂，并将其加入全麦粉中经发酵制成全麦馒头。经复合益生菌制剂发酵制成的全麦馒头与普通全麦馒头相比更加松软，硬度与咀嚼度下降，弹性提高，口感细腻。同时，复合益生菌发酵剂在全麦粉发酵过程中共同作用，赋予全麦馒头独特的质地和风味，使得产品更加香醇。
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公开(公告)号：CN107904198B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201711121738.3
申请日：2017-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产杆菌肽A的地衣芽孢杆菌基因改组菌株及应用。本发明采取了育种新技术中的等离子体诱变技术，与传统物理、化学诱变方法相结合，并采用基因组改组技术，效果明显，产量提高显著。本发明提供的用于杆菌肽A高效发酵生产的基因改组菌株F2‑X1，降低了以地衣芽孢杆菌为发酵菌株，生产杆菌肽的成本。而且产量提高明显，经所述条件发酵后，杆菌肽A产量可达到1.7g/L,适用于大规模发酵生产杆菌肽A。本发明提供的以HPLC检测方法简单准确，是用于快速准确检测杆菌肽A产量。
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公开(公告)号：CN109527120A
公开(公告)日：2019-03-29
申请号：CN201811493012.7
申请日：2018-12-07
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明提供了一种基于植物油的富含多不饱和脂肪酸的食品级新型抑菌油凝胶及其制备方法。该油凝胶主要组分及对应质量分数如下：surfactin 0.05%-3%，甘油单酯7-15%，植物油85-93%。本发明先制备植物油-surfactin混合液，之后加入甘油单酯在设定的加热温度、时间和冷却温度下将液体植物油凝胶化形成油凝胶。利用本发明，可以得到不含反式脂肪酸，且不饱和脂肪酸含量高的食用固态油脂，同时固态油脂具有抑菌活性，可直接作为食品中饱和脂肪和反式脂肪的替代品。
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