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公开(公告)号：CN107988245A
公开(公告)日：2018-05-04
申请号：CN201711013192.X
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种密码子优化的普鲁兰酶及其表达载体与构建方法。它是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis168）密码子偏好性为基础，参考耐酸普鲁兰杆菌（Bacillus acidpullulyticus）普鲁兰酶基因，设计碱基序列，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在枯草芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子、mRNA稳定序列、信号肽以及它们的组合进行选择，得到一种能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达的组合。并实现了工业化生产同时提高了酶活稳定性。
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公开(公告)号：CN107988245B
公开(公告)日：2021-11-19
申请号：CN201711013192.X
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种密码子优化的普鲁兰酶及其表达载体与构建方法。它是以枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis168）密码子偏好性为基础，参考耐酸普鲁兰杆菌（Bacillus acidpullulyticus）普鲁兰酶基因，设计碱基序列，通过自主复制性质粒和整合型质粒的方法在枯草芽孢杆菌中表达。本发明还对表达框的启动子、mRNA稳定序列、信号肽以及它们的组合进行选择，得到一种能够在枯草芽孢杆菌中高效分泌表达的组合。并实现了工业化生产同时提高了酶活稳定性。
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公开(公告)号：CN108330079A
公开(公告)日：2018-07-27
申请号：CN201711013184.5
申请日：2017-10-25
Applicant: 南京福斯弗瑞生物科技有限公司 , 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种产普鲁兰酶的解淀粉芽孢杆菌、其发酵得到的普鲁兰酶及重组载体的构建与应用。它是从云南腾冲热泉附近的土壤样品中，通过菌体的富集、筛选得到一株产中温普鲁兰酶的解淀粉芽孢杆菌。通过蛋白质电泳和N端测序技术分析普鲁兰酶N端组成，分析基因组数据得到中温普鲁兰酶的基因。本发明将该基因以整合到枯草芽孢杆菌基因组的方式在枯草芽孢杆菌中表达，得到较原始菌株酶活有极大提高的重组菌株，为后续的工业生产提供基础。
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