公开(公告)号：CN115976081A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202211527707.9

申请日：2022-12-01

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 别小妹 ,  崔心平 ,  杨军 ,  陆兆新 ,  周海波 ,  胡安妥 ,  孔梁宇 ,  刘新梅

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/31 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明公开了一种副溶血性弧菌和大肠杆菌O157：H7标准质粒、制备方法及其应用。本发明的副溶血性弧菌标准质粒样品采用副溶血性弧菌tlh、trh、toxR、gyrB、groEL基因以及自筛高特异靶基因VPA1585，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成；大肠杆菌O157：H7标准质粒样品采用大肠杆菌O157：H7 rfbE、fliC、stx1、stx2以及自筛高特异靶基因ECS2840，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成。本发明制备的标准质粒序列来源清晰、纯度高且应用能力良好，可应用于食源性致病菌核酸检测，为副溶血性弧菌、大肠杆菌O157：H7检测获得准确、可靠、具有可比性的检测结果提供保障。