公开(公告)号：CN115976081A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202211527707.9

申请日：2022-12-01

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 别小妹 ,  崔心平 ,  杨军 ,  陆兆新 ,  周海波 ,  胡安妥 ,  孔梁宇 ,  刘新梅

IPC: C12N15/63 ,  C12N15/64 ,  C12N15/31 ,  C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11 ,  C12R1/19 ,  C12R1/63

Abstract: 本发明公开了一种副溶血性弧菌和大肠杆菌O157：H7标准质粒、制备方法及其应用。本发明的副溶血性弧菌标准质粒样品采用副溶血性弧菌tlh、trh、toxR、gyrB、groEL基因以及自筛高特异靶基因VPA1585，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成；大肠杆菌O157：H7标准质粒样品采用大肠杆菌O157：H7 rfbE、fliC、stx1、stx2以及自筛高特异靶基因ECS2840，使用重叠延伸PCR将特异性扩增片段串联并克隆至pUC19质粒形成。本发明制备的标准质粒序列来源清晰、纯度高且应用能力良好，可应用于食源性致病菌核酸检测，为副溶血性弧菌、大肠杆菌O157：H7检测获得准确、可靠、具有可比性的检测结果提供保障。

公开(公告)号：CN108018366A

公开(公告)日：2018-05-11

申请号：CN201810008513.5

申请日：2018-01-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 薛峰 ,  戴建君 ,  曾德新 ,  訾臣 ,  蒋原 ,  陈伟 ,  周海波 ,  任建鸾 ,  李保广 ,  凌南 ,  汤芳 ,  诸葛祥凯

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/445

Abstract: 本发明公开了一种用于金黄色葡萄球菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括：引物对，包括序列分别如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的引物；以及探针，其序列如SEQ ID NO：1所示。所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团，5’端标记有荧光报告基团。本发明使用了可特异性识别致病菌基因序列的扩增探针和引物对，因而具有特异性高、稳定性好的特点，本发明提供的检测方法还具有简单、快速、灵敏的优点。

公开(公告)号：CN108018366B

公开(公告)日：2021-09-17

申请号：CN201810008513.5

申请日：2018-01-04

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 薛峰 ,  戴建君 ,  曾德新 ,  訾臣 ,  蒋原 ,  陈伟 ,  周海波 ,  任建鸾 ,  李保广 ,  凌南 ,  汤芳 ,  诸葛祥凯

IPC: C12Q1/689 ,  C12Q1/6851 ,  C12R1/445

Abstract: 本发明公开了一种用于金黄色葡萄球菌活菌检测的试剂、试剂盒及应用。所述检测试剂包括：引物对，包括序列分别如SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示的引物；以及探针，其序列如SEQ ID NO：1所示。所述探针的3’端标记有荧光淬灭基团，5’端标记有荧光报告基团。本发明使用了可特异性识别致病菌基因序列的扩增探针和引物对，因而具有特异性高、稳定性好的特点，本发明提供的检测方法还具有简单、快速、灵敏的优点。