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公开(公告)号：CN109097316A
公开(公告)日：2018-12-28
申请号：CN201811024408.7
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明通过过表达degU基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌-枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pMAD为骨架构建一个基因过表达载体pCBS-LPDegUR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组DegU基因的方法构建了一株高产bacillomycin D菌株fmbJdegU。经过高效液相色谱分析，确定过表达DegU基因的菌株产bacillomycin D的能力大幅度提高。
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公开(公告)号：CN119673268A
公开(公告)日：2025-03-21
申请号：CN202411770133.7
申请日：2024-12-04
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术和酶工程技术领域，涉及一种提高醛酮还原酶底物特异性的分子改造方法，是通过组建醛酮还原酶AKR13B3的底物文库和分析动力学参数；对构建醛酮还原酶AKR13B3和辅酶NADPH以及底物3‑keto‑DON的复合结构进行loop结构分析以及氨基酸序列比对来确定突变位点，筛选底物特异性增加的突变体；本发明通过对AKR13B3底物结合袋的入口环区域的几何形状进行了设计，以改变底物偏好性，实现该酶对特定底物的催化活性增加；此外，本发明为设计具有良好底物特异性的醛酮还原酶提供了一个可行的方案，为开发高效酶制剂提供了巨大的希望。
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公开(公告)号：CN109097316B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201811024408.7
申请日：2018-09-04
Applicant: 南京农业大学 , 南京福斯弗瑞生物科技有限公司
Abstract: 本发明通过过表达degU基因提高抗真菌肽bacillomycin D产量的方法，属于生物技术领域。本方法首先以CGMCC No.0943枯草芽孢杆菌fmbJ为出发菌株，以大肠杆菌‑枯草芽孢杆菌穿梭克隆载体pCBS为骨架构建一个基因过表达载体pCBS‑LPDegUR，利用同源重组原理，通过双交换过程在淀粉酶位点敲入枯草芽孢杆菌fmbJ基因组DegU基因的方法构建了一株高产bacillomycin D菌株fmbJdegU。经过高效液相色谱分析，确定过表达DegU基因的菌株产bacillomycin D的能力大幅度提高。
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公开(公告)号：CN113693205A
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202010384302.9
申请日：2020-05-09
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种健康风味豆乳配方及其生产工艺，属于植物蛋白加工技术领域。本发明所述配方包括大豆、大豆蛋白粉、木糖醇、蔗糖、微晶纤维素、低聚异麦芽糖、菊粉和发酵剂，每1L的份量中由以下组分的原料制备而成：豆乳0.9‑1.0L，蔗糖0g或8‑12g或38‑42g，木糖醇0g或38‑42g，发酵剂40mL，微晶纤维素或低聚异麦芽糖或菊粉0g或0.18‑0.22g，所述发酵剂为植物乳酸杆菌经活化后制得，所述植物乳酸杆菌(Lactobacillu paraplantarum JMLPS‑1)为保藏号CCTCC NO：M2016256。本发明所述生产工艺包括将所述植物乳杆菌活化后制得发酵剂，将发酵剂以4％接种量接种到调配后经过均质、灭菌的豆乳中，37℃恒温发酵至pH5.6终止发酵，经后熟制得健康风味豆乳。本发明制得的健康风味豆乳风味好，产品稳定性高，无豆腥味、泡菜味等异味，益生作用明显，其低热量的特性符合现代人的轻食观念，且配方和工艺有利于健康风味豆乳商业化、市场化和工业化的发展。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107904198B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201711121738.3
申请日：2017-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产杆菌肽A的地衣芽孢杆菌基因改组菌株及应用。本发明采取了育种新技术中的等离子体诱变技术，与传统物理、化学诱变方法相结合，并采用基因组改组技术，效果明显，产量提高显著。本发明提供的用于杆菌肽A高效发酵生产的基因改组菌株F2‑X1，降低了以地衣芽孢杆菌为发酵菌株，生产杆菌肽的成本。而且产量提高明显，经所述条件发酵后，杆菌肽A产量可达到1.7g/L,适用于大规模发酵生产杆菌肽A。本发明提供的以HPLC检测方法简单准确，是用于快速准确检测杆菌肽A产量。
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公开(公告)号：CN119144623A
公开(公告)日：2024-12-17
申请号：CN202411469671.2
申请日：2024-10-21
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体涉及一种呕吐毒素解毒酶及其应用，公开了来源于酸杆菌门(Acidobacteriota)的DON解毒酶基因aadh序列、由DON解毒酶基因aadh编码而成的DON解毒酶和DON解毒酶的制备方法以及DON解毒酶在降解呕吐毒素中的应用，其中，所述制备方法包括如下步骤：对DON解毒酶基因aadh进行密码子优化和基因合成；构建DON解毒酶基因aadh的原核表达载体；将原核表达载体在原核宿主细胞中进行表达；本发明所述的DON解毒酶能降解呕吐毒素，以及能脱除霉变谷物原料及饲料中的毒素。
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公开(公告)号：CN107904198A
公开(公告)日：2018-04-13
申请号：CN201711121738.3
申请日：2017-11-14
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产杆菌肽A的地衣芽孢杆菌基因改组菌株及应用。本发明采取了育种新技术中的等离子体诱变技术，与传统物理、化学诱变方法相结合，并采用基因组改组技术，效果明显，产量提高显著。本发明提供的用于杆菌肽A高效发酵生产的基因改组菌株F2-X1，降低了以地衣芽孢杆菌为发酵菌株，生产杆菌肽的成本。而且产量提高明显，经所述条件发酵后，杆菌肽A产量可达到1.7g/L,适用于大规模发酵生产杆菌肽A。本发明提供的以HPLC检测方法简单准确，是用于快速准确检测杆菌肽A产量。
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公开(公告)号：CN117467684B
公开(公告)日：2024-09-17
申请号：CN202311171186.2
申请日：2023-09-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用，双功能融合酶的制备方法包括：对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增；构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体；将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON，可提高酶的催化效率，降低酶的生产成本，在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。
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公开(公告)号：CN117467684A
公开(公告)日：2024-01-30
申请号：CN202311171186.2
申请日：2023-09-11
Applicant: 南京农业大学
Abstract: 本发明涉及一种双功能融合酶及其制备方法和应用，双功能融合酶的制备方法包括：对脱氧雪腐镰刀菌烯醇解毒酶基因dadh和akr13b3进行PCR扩增；构建不同Linker介导的双功能融合酶DADH‑AKR13B3原核表达载体；将双功能融合酶DADH‑AKR13B3在宿主细胞中进行表达。该双功能融合酶将脱氧雪腐镰刀菌烯醇一步酶法解毒为无毒的3‑epi‑DON。上述技术方案中提供的融合酶能有效的将DON直接降解为3‑epi‑DON，可提高酶的催化效率，降低酶的生产成本，在食品和饲料工业中具有潜在的工业化应用前景。
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