公开(公告)号：CN111704665B

公开(公告)日：2022-04-01

申请号：CN202010105415.0

申请日：2020-02-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  赵丹 ,  韩德敏 ,  董雨豪 ,  赵艳兵

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/11 ,  A61K39/395 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明公开了一种针对H3N2犬流感病毒的重组犬源化抗体scFv‑Fc，其包括，提取感染细胞的总RNA、反转录得cDNA；扩增VH、VL和Fc基因；然后进行PCR融合，提取重组质粒T‑scFv和/或T‑CE‑Fc；以所述T‑scFv和/或T‑CE‑Fc扩增出scFv和/或Fc，将所述scFv和/或所述Fc目的片段连接至克隆载体中，挑选阳性菌株；以所述scFv为模板，用CE‑scFv‑F和/或CE‑scFv‑R为引物，扩增，将产物与载体进行同源重组连接，完成后转化Rosetta感受态细胞，抗性平板筛选后，挑选阳性菌株命名ET‑32a‑scFv‑Fc。本发明可用于类似生物制剂的制备。本发明针对H3N2亚型CIV的重组犬源化抗体，为防控该病毒引起的犬群感染，以及应对其对人类健康和公共卫生构成的潜在威胁奠定物质基础。

公开(公告)号：CN111704665A

公开(公告)日：2020-09-25

申请号：CN202010105415.0

申请日：2020-02-20

Applicant: 南京农业大学

Inventor： 刘永杰 ,  赵丹 ,  韩德敏 ,  董雨豪 ,  赵艳兵

IPC: C07K16/10 ,  C12N15/70 ,  C12N15/11 ,  A61K39/395 ,  A61P31/16

Abstract: 本发明公开了一种针对H3N2犬流感病毒的重组犬源化抗体scFv-Fc，其包括，提取感染细胞的总RNA、反转录得cDNA；扩增VH、VL和Fc基因；然后进行PCR融合，提取重组质粒T-scFv和/或T-CE-Fc；以所述T-scFv和/或T-CE-Fc扩增出scFv和/或Fc，将所述scFv和/或所述Fc目的片段连接至克隆载体中，挑选阳性菌株；以所述scFv为模板，用CE-scFv-F和/或CE-scFv-R为引物，扩增，将产物与载体进行同源重组连接，完成后转化Rosetta感受态细胞，抗性平板筛选后，挑选阳性菌株命名ET-32a-scFv-Fc。本发明可用于类似生物制剂的制备。本发明针对H3N2亚型CIV的重组犬源化抗体，为防控该病毒引起的犬群感染，以及应对其对人类健康和公共卫生构成的潜在威胁奠定物质基础。