一种评估无参物种酵母双杂交文库质量的方法

    公开(公告)号:CN111394800B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN202010175583.7

    申请日:2020-03-13

    Abstract: 本发明公开了一种新的评估由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量的方法,该方法能够体现文库中插入基因数量、基因丰度等关键性指标,解决了传统的由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量评估方法的片面性,适合一般的实验室进行准确的文库评估。该方法通过文库15轮循环数的PCR扩增、产物回收之后的浓度测定和电泳情况初步判断,之后将回收产物进行高通量测序、de novo组装后详细分析,获得文库的插入基因数量、基因丰度等关键性指标,完成由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量的准确评估。同时,还能获得无参考基因组物种基因的序列信息,为下一步互作蛋白编码基因的克隆提供基础。

    一种通过人工干扰提高菊花黑斑病抗性的方法

    公开(公告)号:CN111635902B

    公开(公告)日:2022-03-25

    申请号:CN202010482826.1

    申请日:2020-05-29

    Abstract: 本发明属于植物基因工程育种领域,涉及一种通过人工干扰提高菊花黑斑病抗性的方法,包括以下步骤:构建pMDC32‑amiCmKIC植物表达载体;采用农杆菌介导法将其转入菊花中,进行培养获得抗性植株。对转化植株进行PCR、定量RT‑PCR检测证实amiRNA在转录水平上影响靶基因CmKIC的表达。对转基因植株进行抗病性检测,发现与野生型植株相比,转基因植株抗病性有很大提高。本发明通过人工干扰CmKIC基因提高菊花的黑斑病抗性,为利用基因工程技术选育菊花抗病品种提供新颖而实用的方法,将有效推动菊花生物技术育种进程。

    一种评估无参物种酵母双杂交文库质量的方法

    公开(公告)号:CN111394800A

    公开(公告)日:2020-07-10

    申请号:CN202010175583.7

    申请日:2020-03-13

    Abstract: 本发明公开了一种新的评估由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量的方法,该方法能够体现文库中插入基因数量、基因丰度等关键性指标,解决了传统的由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量评估方法的片面性,适合一般的实验室进行准确的文库评估。该方法通过文库15轮循环数的PCR扩增、产物回收之后的浓度测定和电泳情况初步判断,之后将回收产物进行高通量测序、de novo组装后详细分析,获得文库的插入基因数量、基因丰度等关键性指标,完成由无参考基因组物种构建的酵母双杂交文库质量的准确评估。同时,还能获得无参考基因组物种基因的序列信息,为下一步互作蛋白编码基因的克隆提供基础。

    一种通过人工干扰提高菊花黑斑病抗性的方法

    公开(公告)号:CN111635902A

    公开(公告)日:2020-09-08

    申请号:CN202010482826.1

    申请日:2020-05-29

    Abstract: 本发明属于植物基因工程育种领域,涉及一种通过人工干扰提高菊花黑斑病抗性的方法,包括以下步骤:构建pMDC32-amiCmKIC植物表达载体;采用农杆菌介导法将其转入菊花中,进行培养获得抗性植株。对转化植株进行PCR、定量RT-PCR检测证实amiRNA在转录水平上影响靶基因CmKIC的表达。对转基因植株进行抗病性检测,发现与野生型植株相比,转基因植株抗病性有很大提高。本发明通过人工干扰CmKIC基因提高菊花的黑斑病抗性,为利用基因工程技术选育菊花抗病品种提供新颖而实用的方法,将有效推动菊花生物技术育种进程。

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