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公开(公告)号：CN114990196B
公开(公告)日：2025-03-25
申请号：CN202210602449.X
申请日：2022-05-30
Applicant: 华中农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6834 , C12Q1/6806 , C12Q1/689 , C12N15/11 , C12R1/01 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种基于无酶级联信号放大检测食源性致病菌的方法。具体通过在磁珠和聚苯乙烯微球上分别修饰与目标菌DNA互补的探针1（Probe1）及DNA探针2（Probe2）和引发链（tDNA），通过碱基互补配对原则使目标菌DNA分别与载体上的DNA探针进行分子杂交。随后在该体系中引入分别修饰了发卡1（H1）和发卡2（H2）的磁珠或PS微球，在tDNA的触发下，发卡能够高效结合，导致磁珠或微球载体状态发生显著改变，使得基于磁/电原理的生物传感器能够进行灵敏响应。本发明采用无酶辅助的信号放大方式，成本低、稳定，且克服了免疫反应中修饰抗体后的微球或磁珠因抗体间固有的静电相互作用引起自聚，造成结果假阳性的问题。
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公开(公告)号：CN114990196A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210602449.X
申请日：2022-05-30
Applicant: 华中农业大学 , 岭南现代农业科学与技术广东省实验室
IPC: C12Q1/682 , C12Q1/6834 , C12Q1/6806 , C12Q1/689 , C12N15/11 , C12R1/01 , C12R1/42
Abstract: 本发明公开了一种基于无酶级联信号放大检测食源性致病菌的方法。具体通过在磁珠和聚苯乙烯微球上分别修饰与目标菌DNA互补的探针1（Probe1）及DNA探针2（Probe2）和引发链（tDNA），通过碱基互补配对原则使目标菌DNA分别与载体上的DNA探针进行分子杂交。随后在该体系中引入分别修饰了发卡1（H1）和发卡2（H2）的磁珠或PS微球，在tDNA的触发下，发卡能够高效结合，导致磁珠或微球载体状态发生显著改变，使得基于磁/电原理的生物传感器能够进行灵敏响应。本发明采用无酶辅助的信号放大方式，成本低、稳定，且克服了免疫反应中修饰抗体后的微球或磁珠因抗体间固有的静电相互作用引起自聚，造成结果假阳性的问题。
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公开(公告)号：CN115728495B
公开(公告)日：2025-02-25
申请号：CN202211289368.5
申请日：2022-10-20
Applicant: 华中农业大学 , 大冶市公共检验检测中心
IPC: G01N33/74 , G01N33/569 , G01N33/53 , G01N27/26 , B01L3/00
Abstract: 本发明涉及一种基于定向偶联技术的电荷介导微通道电流生物传感方法及其应用，通过预先将点击试剂1高效地修饰在微通道内表面，待检测时加入偶联有点击试剂2的生物识别分子，诱发点击反应使生物识别分子定向偶联固定于微通道内壁。依次加入待测目标物和含有检测抗体、牛血清白蛋白的自组装蛋白球发生免疫捕获反应，固定在微通道反应区域内表面的蛋白球会导致微通道内表面的电荷密度发生变化，通过检测闭环电路的电流或电压的变化值从而可间接得到待测目标物含量。本发明利用定向偶联技术并结合点击化学反应的组装方案，能够有效解决长时间贮存过程中生物识别分子的生化活性衰退问题，同时避免了复杂的酶促反应，更进一步提高了方法的稳定性。
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公开(公告)号：CN117947143B
公开(公告)日：2024-06-18
申请号：CN202410037308.7
申请日：2024-01-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/6806 , C12Q1/10 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/11 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于微生物检测技术领域，具体涉及一种免提取、免扩增、高灵敏度的活菌定量检测方法及其应用，用于无需核酸提取和扩增即可高灵敏定量检测活菌。所述免提取是指不需要蛋白酶处理，利用噬菌体直接将靶标菌株核酸从活细胞中释放出来，其中涉及的活菌检测提高了检测准确性，涉及的免提取简化了试验操作并降低了成本；本发明采用DNA和ATP协同触发PfAgo酶切割荧光探针实现信号增强，无需对靶标菌株核酸进行扩增即可实现高灵敏检测，避免了交叉污染的风险；本发明中PfAgo酶引导链的设计和目标序列选择不受PAM限制，降低了引物设计复杂性；本发明方法线性范围为102‑107 CFU/mL，检出限为20 CFU/mL，检测灵敏度高，检测结果准确，适用于食源性病原菌的活菌定量检测。
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公开(公告)号：CN114720515B
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202210225513.7
申请日：2022-03-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N27/06 , G01N27/327 , G01N33/543 , G01N33/558
Abstract: 本发明涉及一种线性范围可调、聚多巴胺介导的免修饰便携式电导率免疫传感器的构建方法及应用，在纳米酶催化过氧化氢过程中，盐酸多巴胺会迅速聚合生成聚多巴胺，聚多巴胺表面丰富的官能团对金属离子（如Fe3+、Cu2+等）具有良好的络合作用，因此引起金属离子浓度的改变，而金属离子本身具有很强的电导率信号，从而建立纳米酶与电导率信号改变值的相关性。结合免疫反应，目标物的含量能够控制结合在免疫磁珠上纳米酶的含量，进而调控金属离子的电导率信号，通过便携式电导率仪对电信号读出实现目标物的定量分析。本发明不需要对电极进行修饰，解决了传统的电化学免疫传感器需要修饰电极导致稳定性较差、操作较复杂等问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114836045B
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202210543026.5
申请日：2022-05-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种Mg/Zn‑MOF‑74@Fe3O4磁性复合材料及在富集黄曲霉毒素的应用。本发明采用水热法成功制备了粒径均匀、磁响应性较强的Fe3O4磁性纳米颗粒。随后利用离子交换法合成了混合Mg/Zn两种金属的空心结构有机骨架材料Mg/Zn‑MOF‑74，通过逐层组装法将Fe3O4表面的氨基与金属框架材料的Mg/Zn金属复合，在微波辅助的作用下快速合成Mg/Zn‑MOF‑74@Fe3O4。由于该材料中的Zn2+可以与黄曲霉毒素B1结构中的β‑二羰基产生稳定的化学键合作用，因此将此材料应用于磁性固相萃取中可以实现食品中黄曲霉毒素B1的高效吸附，最大吸附量可达8.921 mg/g。本发明制备的Mg/Zn‑MOF‑74@Fe3O4相较于传统前处理方法，不仅分离速度快，萃取效率高，其还具有绿色环保，价格低廉等优势。
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公开(公告)号：CN111007252B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201911389247.6
申请日：2019-12-30
IPC: G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种基于生物正交反应改变纳米磁颗粒数量及状态，进而检测农药残留的生物传感方法，该方法基于二苯基环辛炔与叠氮的级联生物正交反应同时改变纳米磁颗粒的数量和聚集状态，实现了磁纳米颗粒数量和状态的可控调节，二者有机结合进行磁信号级联放大，从而提高农药残留检测的准确性和灵敏度。
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公开(公告)号：CN114460291A
公开(公告)日：2022-05-10
申请号：CN202210075937.X
申请日：2022-01-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/553 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种基于空心聚合物套管结合Zr‑MOF的不同信号放大能力的移液器免疫传感平台，直接在空心聚合物套管内壁通过静电作用、氢键作用或者疏水相互作用包被生物识别分子，并成功实现了各种大分子、小分子目标物的检测。本发明可根据不同待测物对灵敏度要求不同使用相应信号读出探针并结合图片颜色识别软件或者CCD拍照系统进行定量分析，满足不同待测物对灵敏度的不同要求。较于传统ELISA检测方法，在空心聚合物套管上进行实验，操作简便，不需要额外的洗板技术，节约枪头，成本低；传感原理高效、准确性好：本发明在传统的金标准ELISA基础进行改进，因而依旧保留ELISA的固有结果准确、稳定优势；检测灵敏度高、进行大批量样本的快速以及现场分析，检测效率极高。
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公开(公告)号：CN114384240A
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202111511613.8
申请日：2021-12-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N21/33
Abstract: 本发明公开了基于乳胶微球紫外吸收光谱峰面积积分的多目标物同时检测方法，纳米磁颗粒为磁分离载体，表面偶联不同目标物分别对应的生物识别分子A作为免疫磁颗粒；以乳胶微球为信号探针，在其表面偶联相对应的生物识别分子B；免疫磁颗粒、信号探针与待测目标物进行充分的免疫反应得到混合溶液；磁分离，对未参与反应的信号探针溶液进行全波长扫描，选取对应波长范围进行峰面积积分。本发明不仅显著提高了灵敏度和准确性，而且只需要对特定范围内的紫外吸收光谱进行峰面积积分，就能实现对每个信号探针的准确分析定量。对于分析灵敏度要求更高的物质，我们采用多种click反应进一步放大光学信号，优化点击试剂用量达到多种目标物信号同时放大的目的。
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公开(公告)号：CN112540095B
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN201910893003.5
申请日：2019-09-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N24/08 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种酶促低场核磁共振免疫传感器检测食源性致病菌的方法，主要内容是将Mn(VII)/Mn(II)作为信号读出系统，结合免疫分析技术，构建了基于抗体‑抗原识别的磁免疫传感器，在该方法中，将碱性磷酸酶(ALP)作为免疫标记酶应用到该传感器中，将抗坏血酸磷酸酯作为ALP的底物，ALP可以将抗坏血酸磷酸酯去磷酸化，进而转化为具有还原性的抗坏血酸，而抗坏血酸可以将Mn(VII)转变为Mn(II)，进而引起磁信号(横向弛豫时间，T2)从无到有的改变，T2的改变量和待测样品中食源性致病菌呈正相关。本发明拓宽了基于超顺纳米磁颗粒磁弛豫时间传感器检测范围的限制，极大地提高了分析性能，进而为食品安全的前期防控提供一种有力的工具。
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