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公开(公告)号:CN112964868B
公开(公告)日:2022-06-28
申请号:CN202110158962.X
申请日:2021-02-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,该方法将生化反应与可视化微球计数、机器视觉与深度学习相结合,以高分子微球作为信号探针,将与待测目标物对应的生物识别分子分别偶联在纳米磁颗粒和信号探针表面,进行免疫反应或者DNA分子杂交反应,磁分离后直接对反应复合物中的信号探针进行光学显微成像计数,并使用不同粒径或颜色的信号探针用于区分不同的检测对象,最终实现了多种目标物的同时检测。
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公开(公告)号:CN113758886A
公开(公告)日:2021-12-07
申请号:CN202110898312.9
申请日:2021-08-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N21/33 , G01N33/546 , G01N33/543 , G01N33/53 , G01N33/569
Abstract: 本发明属于生化分析技术领域。具体涉及一种基于乳胶微球浓度变化的多目标物同时检测方法。以纳米磁颗粒为磁分离载体,其表面偶联不同目标物的捕获抗体;以不同粒径的乳胶微球为信号探针,其表面偶联不同目标物的检测抗体或完全抗原,每一种粒径对应一种目标物;磁分离载体、信号探针与待测目标物进行免疫反应;磁分离后收集分离液中未参与反应的信号探针溶液;同时测定不同粒径信号探针的紫外吸收峰所对应的最大吸光度,依据吸光度的变化计算出对应的目标物含量。本发明可多目标物同时检测,大大缩短了检测时间,且紫外分光光度计操作简便,灵敏度高、稳定性好、成本低。
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公开(公告)号:CN112540095B
公开(公告)日:2022-03-22
申请号:CN201910893003.5
申请日:2019-09-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N24/08 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种酶促低场核磁共振免疫传感器检测食源性致病菌的方法,主要内容是将Mn(VII)/Mn(II)作为信号读出系统,结合免疫分析技术,构建了基于抗体‑抗原识别的磁免疫传感器,在该方法中,将碱性磷酸酶(ALP)作为免疫标记酶应用到该传感器中,将抗坏血酸磷酸酯作为ALP的底物,ALP可以将抗坏血酸磷酸酯去磷酸化,进而转化为具有还原性的抗坏血酸,而抗坏血酸可以将Mn(VII)转变为Mn(II),进而引起磁信号(横向弛豫时间,T2)从无到有的改变,T2的改变量和待测样品中食源性致病菌呈正相关。本发明拓宽了基于超顺纳米磁颗粒磁弛豫时间传感器检测范围的限制,极大地提高了分析性能,进而为食品安全的前期防控提供一种有力的工具。
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公开(公告)号:CN112595759B
公开(公告)日:2021-12-10
申请号:CN202011239627.4
申请日:2020-11-09
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N27/12 , G01N27/416 , G01N33/53 , G01N33/543 , G01N33/553 , B01L3/00
Abstract: 本发明公开了一种基于绝缘微球状态变化导致微通道电阻改变的均相分析方法,将生物识别分子分别修饰在绝缘微球的表面,然后加入待测目标物进行生物反应,在微通道两端施加恒定的电压或电流,形成闭环电路,混合液在电渗流驱动下流经微通道,绝缘微球在通过微通道时导致闭环电路的电阻上升,并且上升幅度与绝缘微球的聚集状态相关,通过检测闭环电路的电流或电压的变化值从而可间接得到待测目标物含量。本发明无需任何洗涤、分离步骤,仅涉及一步生化反应,从而在保证准确度的前提下,极大地缩短了分析时间,具有准确、快速、成本低等优点,在食品安全、体外诊断、环境监测等需要现场快速检测的领域具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN110470688B
公开(公告)日:2021-07-13
申请号:CN201910690169.7
申请日:2019-07-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N24/08 , G01N33/53 , G01N33/569 , G01N33/94 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种纳米螯合筛介导的低场核磁共振免疫传感器及其应用,属于食品安全分析和检测领域。该免疫传感器包括完全抗原或捕获抗体‑聚苯乙烯微球‑多聚谷氨酸、磁珠‑抗体、聚苯乙烯微球‑叠氮、磁颗粒‑炔。本发明传感器基于螯合化学反应,制成纳米螯合筛,特异性吸附铜离子,进而控制铜离子催化点击化学反应的程度,实现低场核磁共振免疫传感器的信号读出和放大,具有灵敏度高、特异性强等特点,可以实现对多种小分子目标物包括农药、抗生素以及生物大分子的检测。
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公开(公告)号:CN110726841B
公开(公告)日:2020-07-31
申请号:CN201911000958.X
申请日:2019-10-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供一种基于酶促点击反应信号放大磁弛豫时间免疫传感器检测兽药残留的方法,包括以下步骤:1)用待检兽药完全抗原包被酶标板并进行封闭;2)加入待测样品和待检兽药单克隆抗体,进行竞争免疫反应;3)加入碱性磷酸酶标记的二抗;4)加入磷酸化抗坏血酸酯,反应后生成抗坏血酸;5)向反应液中加入Cu2+、叠氮‑MNP偶联物和炔基‑MNP偶联物,抗坏血酸将Cu2+还原为Cu+并催化叠氮和炔基发生点击反应,导致磁颗粒聚集或者磁颗粒数量发生变化,进而有两种灵敏度不同的磁信号读出方式,通过测定横向弛豫时间并计算出待测样品中的目标物含量。本发明极大地提高了传统磁免疫传感器的灵敏度,为兽药残留的检测提供了高效、准确、快速的方法。
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公开(公告)号:CN112964868A
公开(公告)日:2021-06-15
申请号:CN202110158962.X
申请日:2021-02-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/543 , G01N33/58 , G01N33/533
Abstract: 本发明公开了一种基于磁分离同时检测多种目标物的生化分析方法,该方法将生化反应与可视化微球计数、机器视觉与深度学习相结合,以高分子微球作为信号探针,将与待测目标物对应的生物识别分子分别偶联在纳米磁颗粒和信号探针表面,进行免疫反应或者DNA分子杂交反应,磁分离后直接对反应复合物中的信号探针进行光学显微成像计数,并使用不同粒径或颜色的信号探针用于区分不同的检测对象,最终实现了多种目标物的同时检测。
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公开(公告)号:CN111413264B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN202010253855.0
申请日:2020-04-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N15/12 , G01N33/543 , G01N33/569
Abstract: 本发明公开了一种用于检测微米颗粒的多通道颗粒检测装置及检测方法,涉及食品安全、体外诊断、环境监测领域,该装置包括箱体和升降机构,箱体的底部设置有若干小孔试管,箱体下方设置有若干与小孔试管相对应的样品池,小孔试管上开有颗粒入口,小孔试管的内部设置有第一电极,外部设置有第二电极,通过多个小孔试管,可以实现多个样品的同时检测;样品池内设置有电解液和待识别颗粒,每个待识别颗粒均包括绝缘微球,绝缘微球表面修饰有特异性识别分子,特异性识别分子用于与相应的待测物特异性结合;待测物包括生物标志物、药物残留物和/或细菌。本发明能够提高检测效率,降低检测成本。
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公开(公告)号:CN112538519A
公开(公告)日:2021-03-23
申请号:CN201910892437.3
申请日:2019-09-20
Applicant: 华中农业大学 , 中国检验检疫科学研究院
IPC: C12Q1/6816 , C12Q1/06 , G01N24/08
Abstract: 本发明公开了一种酶促低场核磁共振DNA传感器检测食源性致病菌的方法,主要内容是将Mn(VII)/Mn(II)作为信号读出系统,结合DNA杂交技术,构建以DNA杂交为基础的磁传感器,该方法首先根据致病菌的基因序列设计并合成与该基因互补的正向探针和反向探针,将正向探针偶联在纳米磁颗粒表面,用于特异性地富集待测致病菌DNA片段,然后加入生物素标记的反向探针,形成DNA互补链,再加入链霉亲和素标记的碱性磷酸酶(ALP),形成“磁纳米颗粒‑DNA杂交双链‑ALP”的夹心结构,该夹心结构的含量与待测致病菌中的DNA含量成正相关。该方法不需要DNA扩增,提高了DNA分子检测的效率,拓宽了基于超顺纳米磁颗粒的低场核磁共振传感器的应用范围,进而为食源性致病菌的检测提供一种有力的工具。
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公开(公告)号:CN111398137A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010253865.4
申请日:2020-04-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N15/12 , G01N33/543 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开了一种基于电阻微米孔颗粒计数器的检测方法及其应用,涉及食品安全、临床诊断和环境监测领域,该方法包括以下步骤:根据待测物的种类N,N大于等于1,选取N份粒径不同的绝缘微球并与待测物一一对应;根据待测物,在相应的绝缘微球表面修饰特异性识别分子,与待测物作用后磁分离,使用颗粒计数器对未反应的绝缘微球数量进行测定;待测物包括生物标志物、药物残留物、抗生素和/或细菌。本发明通过免疫反应、DNA分子杂交等方法建立待测物与微球个数之间的定量关系,再通过电阻微米孔颗粒计数器对绝缘微球的个数进行测定,间接得到待测物的浓度,本发明不仅能够实现多指标同时检测,且成本较低,稳定性好,准确度较高。
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