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公开(公告)号：CN118406623A
公开(公告)日：2024-07-30
申请号：CN202410563562.0
申请日：2024-05-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了Mce4D基因作为关键毒力因子在调控牛分枝杆菌毒力中的应用，所述Mce4D基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。通过牛分枝杆菌卡介苗随机插入突变体库筛选并获得到了一株突变株，通过鉴定，证实发生突变的基因为Mce4D基因，对该突变株的毒力表型进行鉴定，发现突变株的侵袭能力、胞内存活能力和耐环境压力能力相比野生株显著降低，由此推断Mce4D基因在调控牛分枝杆菌毒力方面发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN117777268A
公开(公告)日：2024-03-29
申请号：CN202311682845.9
申请日：2023-12-08
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N5/10 , A61K48/00 , A61K38/46 , A61P31/04 , A61P31/06
Abstract: 本发明公布了一种基于CRISPR‑Cas9基因编辑技术的牛rbmx2基因敲除细胞系的构建方法，本发明采用CRISPR‑Cas9技术敲除EBL细胞中的rbmx2基因序列，建立rbmx2基因敲除的EBL细胞系，证实rbmx2基因是牛分枝杆菌感染依赖因子，确定rbmx2基因敲除的EBL细胞系能抵抗牛分枝杆菌感染，可用于在人畜抵抗牛分枝杆菌感染中的功能验证。
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公开(公告)号：CN114752594B
公开(公告)日：2024-03-15
申请号：CN202210549786.7
申请日：2022-05-20
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/11 , C12Q1/689 , C12Q1/6893 , C12Q1/6851 , C12R1/42 , C12R1/90
Abstract: 本发明公开一种多重实时荧光定量PCR引物和探针组合，它由两组分别针对沙门氏菌InvA基因、隐孢子虫18SrRNA基因设计的引物和探针组成，本发明还公开了含有该引物和探针组合的试剂盒以及检测方法。本发明实现了沙门氏菌和隐孢子虫的双重实时荧光定量PCR检测，此方法快速、准确、特异性和灵敏性高，可以同时实现对沙门氏菌和隐孢子虫的定性和准确定量检测。
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公开(公告)号：CN117683142A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311665648.6
申请日：2023-12-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K19/00 , C12N15/62 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，公开了融合蛋白LSDV090‑133及其在检测牛结节性皮肤病病毒（LSDV）感染抗体和鉴别疫苗免疫抗体中的应用。本发明利用噬菌体展示文库筛选针对牛结节性皮肤病病毒感染血清和山羊痘弱毒疫苗免疫血清的特异性多肽，经生物信息学分析，选取牛结节性皮肤病病毒感染血清特有的3条多肽，通过柔性肽串联至pET28a载体，送公司进行基因合成，原核表达得到LSDV090‑133融合蛋白，分子量约为20 kDa。经验证，该蛋白与LSDV感染牛阳性血清有很强的反应原性，其灰度值明显强于与山羊痘弱毒疫苗免疫60dpi后的免疫血清，是一种潜在的鉴别诊断新靶标，能用于鉴别诊断LSDV感染和山羊痘弱毒疫苗免疫的抗体反应，为牛结节性皮肤病的血清学诊断和防控提供参考工具。
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公开(公告)号：CN114657273B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202210484565.6
申请日：2022-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测多种牛乳腺炎病原的引物对和探针组合，所述引物对和探针分别针对金黄色葡萄球菌rpoB基因、链球菌tuf基因、牛支原体oppD/F基因、产色葡萄球菌sodA基因、大肠杆菌79号基因，序列如SEQ ID NO:1‑15所示。本发明公开的引物对和探针组合能够对临床奶样或其它样本中的金黄色葡萄球菌、链球菌(无乳链球菌、停乳链球菌、乳房链球菌)、牛支原体、产色葡萄球菌、大肠杆菌同时进行检测，不仅能提高检测效率，而且还具有较高的灵敏度和特异性。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116947981A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310837378.6
申请日：2023-07-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/39 , C12N5/20 , C07K16/08 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体，该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒，属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标，具有免疫原性，利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测，具有灵敏性和特异性高，检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。
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公开(公告)号：CN114874991A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210438460.7
申请日：2022-04-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor，IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系，是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑，并经过单克隆挑选而得到。经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后，病毒滴度均可显著提高，从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率。
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公开(公告)号：CN111850002B
公开(公告)日：2022-04-19
申请号：CN202010571850.2
申请日：2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP570在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用，属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，试验证明，所述牛支原体分泌蛋白MbovP570具有抗原性，可以与牛支原体阳性血清反应而不与牛支原体阴性血清反应，而且该蛋白可以诱导牛巨噬细胞高表达IL‑8、IL‑12，而IL‑8可以激活中性粒细胞，IL‑12可以激活NK细胞和T细胞。因此认为MbovP570可以激活宿主免疫系统，在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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公开(公告)号：CN113185588A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110466319.3
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域，尤其涉及一种牛支原体MbovP701蛋白及其制备方法与应用。本发明的MbovP701蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，编码该蛋白的核苷酸如SEQIDNO：2所示。本发明的MbovP701蛋白在Mg2+存在条件下具有降解外源双链DNA的核酸外切酶功能，且为非经典的分泌蛋白，可以分泌至胞体外发挥核酸外切酶的作用，为牛支原体生长提供必需的营养物质。因此该蛋白可作为分子靶标，应用于制备牛支原体防治药物。
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公开(公告)号：CN111856006B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202010572083.7
申请日：2020-06-22
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/30 , C12N15/31 , G01N33/569 , A61K39/02 , A61P31/04
Abstract: 本发明公开了牛支原体分泌蛋白MbovP274在制备牛支原体诊断试剂、药物或疫苗中的应用，属于动物传染病防治技术领域。所述牛支原体分泌蛋白MbovP274具有如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列，基因注释信息显示其为功能未知蛋白，通过实验发现MbovP274蛋白具有抗原性，可以与牛支原体阳性血清反应而不与牛支原体阴性血清反应；并且通过western blot鉴定出其为分泌蛋白，进一步验证出该蛋白可以诱导牛巨噬细胞高表达IL‑8、IFN‑γ，而IL‑8是重要的中性粒细胞激活因子，IFN‑γ是广泛的免疫调节因子。综合上述研究，认为MbovP274是牛支原体的重要致病因子且可以激活宿主免疫，在研发新药和疫苗方面具有重要潜力。
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