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公开(公告)号：CN119285738A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411327055.3
申请日：2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了SELENON基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了SELENON基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型，发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性，BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补SELENON基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明，SELENON基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了SELENON基因的抗病毒调节功能，首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号：CN119019530A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411327052.X
申请日：2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了SLC16A13基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了SLC16A13基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型，发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性，BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补SLC16A13基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明，SLC16A13基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了SLC16A13基因的抗病毒调节功能，首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号：CN118325970A
公开(公告)日：2024-07-12
申请号：CN202410388007.9
申请日：2024-04-01
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了过氧化物酶体生物发生因子14(PEX14)基因在调控抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus，BEV)感染中的应用以及一种PEX14基因敲除牛肾细胞。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了靶向MDBK细胞PEX14基因的打靶载体，经载体转染与细胞筛选，建立了PEX14基因敲除的抗病毒感染细胞模型。病毒学检测结果表明，PEX14基因敲除细胞对BEV感染表现出显著抗性，BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞。以上结果表明在细胞水平上，PEX14基因敲除有效地抑制了该病毒的感染与增殖，该策略可应用于PEX14基因修饰的抗BEV牛的制备。
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公开(公告)号：CN114874991A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210438460.7
申请日：2022-04-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor，IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系，是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑，并经过单克隆挑选而得到。经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后，病毒滴度均可显著提高，从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率。
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公开(公告)号：CN119019529A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411327051.5
申请日：2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了WNT5A基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了WNT5A基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型，发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性，BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补WNT5A基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明，WNT5A基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了WNT5A基因的抗病毒调节功能，首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118272445A
公开(公告)日：2024-07-02
申请号：CN202410388005.X
申请日：2024-04-01
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了LOC617539基因在调控抗BVDV和BEV感染中的应用以及一种LOC617539基因敲除牛肾细胞。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了靶向MDBK细胞LOC617539基因的打靶载体，经载体转染与细胞筛选，建立了LOC617539基因敲除的抗BVDV和BEV感染的细胞模型，病毒学检测结果表明，LOC617539基因敲除细胞对以上两种病毒感染表现出显著抗性，病毒在基因敲除细胞上的增殖速度显著慢于野生型细胞，表明在细胞水平上，LOC617539是BVDV和BEV的易感基因，该基因敲除能有效地抑制以上两种病毒的感染与增殖，该策略可应用于LOC617539基因修饰的抗BVDV和BEV感染细胞和抗感染牛的制备。
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公开(公告)号：CN113308577B
公开(公告)日：2022-10-18
申请号：CN202110650339.6
申请日：2021-06-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的可视化快速核酸检测方法，该方法针对牛结节性皮肤病病毒的orf068基因设计RPA引物并进行扩增，然后向扩增产物中加入Cas12a蛋白并进行酶切反应，反应体系包括Cas12a蛋白、sgRNA和核酸探针，即可对核酸探针发出的信号进行检测。本发明检测orf068质粒的灵敏度是5copies/μL,检测LSDV和山羊痘病毒(GTPV)的灵敏度均为0.1TCID50/μL，检测临床样本的诊断敏感性为96.3％(95％CI：81.0％，99.9％)，且特异性高，眼观颜色变化判断结果，具有简便、快速和适合现场检测等优点。
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公开(公告)号：CN114874991B
公开(公告)日：2024-03-19
申请号：CN202210438460.7
申请日：2022-04-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N15/113 , C12N15/12 , C12N7/00
Abstract: 本发明公开了一种I型干扰素受体(type I interferon alpha receptor，IFNAR1)基因敲除牛肾细胞系，是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对牛肾细胞进行基因编辑，并经过单克隆挑选而得到。经表型验证表明IFNAR1敲除的牛肾细胞系不表达IFNAR1且感染牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)和3型牛副流感病毒(BPIV‑3)后，病毒滴度均可显著提高，从而可用于牛源病毒临床株的分离鉴定并提高病毒的增殖效率。
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公开(公告)号：CN113308577A
公开(公告)日：2021-08-27
申请号：CN202110650339.6
申请日：2021-06-10
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛结节性皮肤病病毒(LSDV)的可视化快速核酸检测方法，该方法针对牛结节性皮肤病病毒的orf068基因设计RPA引物并进行扩增，然后向扩增产物中加入Cas12a蛋白并进行酶切反应，反应体系包括Cas12a蛋白、sgRNA和核酸探针，即可对核酸探针发出的信号进行检测。本发明检测orf068质粒的灵敏度是5copies/μL,检测LSDV和山羊痘病毒(GTPV)的灵敏度均为0.1TCID50/μL，检测临床样本的诊断敏感性为96.3％(95％CI：81.0％，99.9％)，且特异性高，眼观颜色变化判断结果，具有简便、快速和适合现场检测等优点。
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公开(公告)号：CN119082090A
公开(公告)日：2024-12-06
申请号：CN202411327049.8
申请日：2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/48 , C12N15/57 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了羧肽酶6(CPA6)基因在调控宿主抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus，BEV)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了CPA6基因敲除的牛肾细胞系和抗BEV病毒感染的细胞模型，病毒学检测结果表明，BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补CPA6基因则导致细胞的抗病毒作用消失，表明CPA6基因在调控宿主抗BEV感染中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了CPA6基因的功能，首次发现该基因可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点应用于BEV感染的抗病育种、预防与治疗，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。
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