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公开(公告)号：CN113512559B
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202110467490.6
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域。本发明提供了牛支原体Mbov_0701突变基因及其突变株和应用。所述基因突变株在Mbov_0701基因的701核苷酸位点后出现插入突变，在与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型，在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。Mbov_0701基因编码蛋白是一种核酸外切酶MbovP701，本申请的基因突变株可应用于牛支原体代谢生理、致病和防治药物制备等领域。
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公开(公告)号：CN109750054B
公开(公告)日：2021-07-02
申请号：CN201910129071.4
申请日：2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防制技术领域，具体涉及牛支原体蛋白基因MbovGdpP及其应用。Mbov_0276根据牛支原体HB0801基因组序列人工合成获得。针对大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0276基因进行了修饰：将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，得到大肠杆菌重组蛋白rMbovGdpP。Mbov_0276基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:2所示。突变株T6.290出现生长缺陷表型，在PPLO培养基上呈小菌落形态，对EBL细胞黏附减少，对盐离子的敏感性升高。该突变株可望在牛支原体致病机理和制备免疫防制药物中应用。
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公开(公告)号：CN108660144A
公开(公告)日：2018-10-16
申请号：CN201710200623.7
申请日：2017-03-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种牛支原体多功能蛋白基因CDNPase，蛋白基因Mbov_0328是从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，申请人对Mbov_0328基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，最终获得由大肠杆菌表达的重组蛋白rCDNPase。本发明克隆的蛋白的编码基因的核苷酸序列是SEQ ID NO:11中1-969位碱基所示的序列，其蛋白质的序列如SEQ ID NO:12所示。本发明的重组蛋白具有磷酸二酯酶和超小片段核酸酶的活性。
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公开(公告)号：CN111635880B
公开(公告)日：2021-12-07
申请号：CN202010372788.4
申请日：2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株，命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20191038，所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白，生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降，有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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公开(公告)号：CN111705026B
公开(公告)日：2021-11-26
申请号：CN202010491009.2
申请日：2020-06-02
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体Mbov_0280基因突变株，属于动物传染病防治技术领域，所述突变株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.297，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 2020085，所述Mbov_0280基因的核苷酸序列为SEQ ID NO:1所示。该菌株相比野生菌株HB0801诱导宿主巨噬细胞凋亡的能力减弱，鉴于牛巨噬细胞作为宿主抵抗病原感染的重要免疫细胞，该突变株具有更低的毒力，同时有助于机体抵抗牛支原体感染，从而可望在牛支原体免疫防治领域发挥重要作用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN113512559A
公开(公告)日：2021-10-19
申请号：CN202110467490.6
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域。本发明提供了牛支原体Mbov_0701突变基因及其突变株和应用。所述基因突变株在Mbov_0701基因的701核苷酸位点后出现插入突变，在与牛胚胎肺细胞共培养时，表现出显著生长缺陷表型，在PPLO固体培养基上表现为小菌落形态。Mbov_0701基因编码蛋白是一种核酸外切酶MbovP701，本申请的基因突变株可应用于牛支原体代谢生理、致病和防治药物制备等领域。
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公开(公告)号：CN109837226B
公开(公告)日：2021-03-05
申请号：CN201910128376.3
申请日：2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及黏附能力降低的牛支原体基因及黏附蛋白。所述的蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，获得重组蛋白Mbov0503。本发明的蛋白基因核苷酸序列如SEQ ID NO:13所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:14所示。所述的黏附蛋白可在牛支原体致病和防控中应用。
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公开(公告)号：CN111235082A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010077232.2
申请日：2019-02-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治领域，涉及黏附能力降低的牛支原体基因缺失的突变株。蛋白基因Mbov_0503从牛支原体HB0801基因组中克隆获得。根据大肠杆菌对密码子的偏爱性，对Mbov_0503基因进行了修饰，将牛支原体色氨酸密码子UGA突变成大肠杆菌中编码色氨酸的密码子UGG，获得重组蛋白Mbov0503。本发明克隆的蛋白基因的序列如SEQ ID NO:13所示，编码的蛋白质序列如SEQ ID NO:14所示。本发明的突变株从突变体库筛选的黏附缺陷株。该突变株对宿主EBL细胞的黏附能力，对MDBK细胞的跨膜传播能力及对细胞间紧密连接的破坏能力较野生株显著下降。可在牛支原体致病和防控中应用。
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公开(公告)号：CN113185588A
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN202110466319.3
申请日：2021-04-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及动物传染病防治技术领域，尤其涉及一种牛支原体MbovP701蛋白及其制备方法与应用。本发明的MbovP701蛋白的氨基酸序列如SEQIDNO：1所示，编码该蛋白的核苷酸如SEQIDNO：2所示。本发明的MbovP701蛋白在Mg2+存在条件下具有降解外源双链DNA的核酸外切酶功能，且为非经典的分泌蛋白，可以分泌至胞体外发挥核酸外切酶的作用，为牛支原体生长提供必需的营养物质。因此该蛋白可作为分子靶标，应用于制备牛支原体防治药物。
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公开(公告)号：CN111635880A
公开(公告)日：2020-09-08
申请号：CN202010372788.4
申请日：2020-05-06
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体VspX基因突变株，命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T8.101，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO:M 20191038，所述VspX基因具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列。本发明还公开了该突变株的构建方法及其在牛支原体致病机制和免疫防控领域中的应用。该突变株不表达突变基因编码的蛋白，生长曲线、菌落形态和大小与野生菌株无明显差异。但对牛肺上皮细胞系和纤连蛋白的结合能力却显著下降，有作为毒力致弱菌株在牛支原体致病机制研究和防制药物研发领域应用的潜力。
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