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公开(公告)号：CN110699416B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201911042777.3
申请日：2019-10-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于柑橘原生质体高效检测蛋白质亚细胞定位方法，包括以下步骤：(1)将细胞器荧光蛋白标记载体转化农杆菌，得到重组农杆菌；(2)重组农杆菌侵染柑橘外植体，获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘材料；(3)将待测基因克隆到荧光不同于步骤(1)的荧光标记表达载体，获得待测基因荧光标记载体；(4)酶解步骤(2)得到的柑橘材料，分离纯化并获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘原生质体；(5)通过PEG介导，将待测基因荧光标记载体转化步骤(4)获得的柑橘原生质体，培养24‑48h后，激光共聚焦显微镜下观察，两种荧光蛋白标记重合则表明待测基因表达蛋白定位于该细胞器。本发明方法简单、便捷、高效、成本低，成功率大幅提高。
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公开(公告)号：CN108728396B
公开(公告)日：2020-06-30
申请号：CN201810603594.3
申请日：2018-06-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明提供了一种柑橘果肉的线粒体分离纯化方法，涉及植物生物化学技术领域。本发明所述方法以Percoll为梯度介质应用差速离心结合密度梯度离心分离和纯化柑橘果肉线粒体，包括以下步骤：1)将柑橘果肉与缓冲液A混合后榨汁，过滤得过滤液；2)将得到的过滤液进行差速离心，得到的沉淀用缓冲液B进行悬浮，得到样品I；3)将得到的样品I进行密度梯度离心，得到样品II；4)将得到的样品II与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得样品III；5)将得到的样品III与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得柑橘果肉线粒体。本发明得到的线粒体呈典型的椭球状，双层膜结构完整，嵴清晰可见，且线粒体提纯方法纯度高，提纯效果好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108728396A
公开(公告)日：2018-11-02
申请号：CN201810603594.3
申请日：2018-06-12
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/04
Abstract: 本发明提供了一种柑橘类果肉线粒体的分离纯化方法，涉及植物生物化学技术领域。本发明所述方法以Percoll为梯度介质应用差速离心结合密度梯度离心分离和纯化柑橘果肉线粒体，包括以下步骤：1)将柑橘果肉与缓冲液A混合后榨汁，过滤得过滤液；2)将得到的过滤液进行差速离心，得到的沉淀用缓冲液B进行悬浮，得到样品I；3)将得到的样品I进行密度梯度离心，得到样品II；4)将得到的样品II与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得样品III；5)将得到的样品III与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得柑橘果肉线粒体。本发明得到的线粒体呈典型的椭球状，双层膜结构完整，嵴清晰可见，且线粒体提纯方法纯度高，提纯效果好。
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公开(公告)号：CN115772046A
公开(公告)日：2023-03-10
申请号：CN202211700182.4
申请日：2022-12-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明提供了一种枳壮根培养液和水培方法，属于植物无土栽培技术领域。本发明每升枳壮根培养液包括如下组分：四水硝酸钙284.5～296.1mg、硝酸钾198.2～206.2mg、磷酸氢二钠19.5～20.3mg、二水磷酸二氢钠48.9～50.9mg、七水硫酸镁120.7～125.7mg、硼酸0.61～0.63mg、四水氯化锰0.86～0.90mg、七水硫酸锌0.225～0.234mg、五水硫酸铜0.0392～0.0408mg、二水钼酸钠0.0427～0.0444mg、乙二胺四乙酸铁钠19.11～19.89mg、亚硒酸钠864.69～2594.07μg。本发明枳壮根培养液及水培方法，通过添加硒元素可以有效促进枳的根部的生长发育，改变其根系形态，对提供优质砧木有一定理论和实践价值。
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公开(公告)号：CN114831175A
公开(公告)日：2022-08-02
申请号：CN202210535953.2
申请日：2022-05-17
Applicant: 华中农业大学
IPC: A23B7/16
Abstract: 本发明涉及柑橘贮藏保鲜技术领域，公开了一种柑橘保鲜用添加剂为22‑30双碳长的多碳链醛。本发明人工合成24醛和26醛制作柑橘保鲜乳化剂，处理云南高原蜜桔具有显著降低失重率的效果，且浓度越高保水效果越好。1％24醛与1％26醛涂膜剂处理温州蜜柑果实后能显著降低果实采后失重，延缓果皮硬度与色差值的变化，降低呼吸强度，维持果实内部TSS、TA含量，保持果实内部异味物质含量低于人类感知阈值。
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公开(公告)号：CN117751840A
公开(公告)日：2024-03-26
申请号：CN202410113662.3
申请日：2024-01-26
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种克服十字花科植物自交不亲和反应的方法，涉及植物生物技术领域。本方法是使用自噬过程抑制剂渥曼青霉素处理自交不亲和的拟南芥及大白菜的柱头组织，再对处理过的柱头组织进行自花授粉，最后获得自交不亲和植株的自交种。本发明具有以下优点和积极效果：①本方法首次使用自噬过程抑制剂渥曼青霉素处理自交不亲和拟南芥及大白菜柱头，能有效克服其自交不亲和性，获得自交种。②本方法采用单一药剂处理，操作简便，效果稳定，不需要借助特殊工具设备。③利用本方法克服自交不亲和反应，在十字花科不同物种中具有稳定效果，为扩大自交不亲和系在杂种优势利用中的应用范围提供了理论和实践基础。
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公开(公告)号：CN110699416A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911042777.3
申请日：2019-10-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于柑橘原生质体高效检测蛋白质亚细胞定位方法，包括以下步骤：(1)将细胞器荧光蛋白标记载体转化农杆菌，得到重组农杆菌；(2)重组农杆菌侵染柑橘外植体，获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘材料；(3)将待测基因克隆到荧光不同于步骤(1)的荧光标记表达载体，获得待测基因荧光标记载体；(4)酶解步骤(2)得到的柑橘材料，分离纯化并获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘原生质体；(5)通过PEG介导，将待测基因荧光标记载体转化步骤(4)获得的柑橘原生质体，培养24-48h后，激光共聚焦显微镜下观察，两种荧光蛋白标记重合则表明待测基因表达蛋白定位于该细胞器。本发明方法简单、便捷、高效、成本低，成功率大幅提高。
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