公开(公告)号：CN109722447A

公开(公告)日：2019-05-07

申请号：CN201910177732.0

申请日：2019-03-10

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 王鹏蔚 ,  宫金礼 ,  田真 ,  程运江

IPC: C12N15/82

Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体涉及一种农杆菌介导的柑橘果实瞬时转化的方法，包括以下步骤：S1.将含有目的基因的表达载体转化农杆菌，并制备农杆菌菌液；S2.农杆菌侵染：将制备的农杆菌菌液注入柑橘果实中；S3.将注入农杆菌菌液的柑橘果实放置一段时间后检测目的基因的表达。操作简单易控，周期短，转化效率高，表达强度好，成本低，可以用于进行蛋白的亚细胞定位。

公开(公告)号：CN108728396B

公开(公告)日：2020-06-30

申请号：CN201810603594.3

申请日：2018-06-12

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 程运江 ,  李欣 ,  柴应芳 ,  许让伟 ,  王鹏蔚 ,  田真 ,  曾云流 ,  邓秀新

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提供了一种柑橘果肉的线粒体分离纯化方法，涉及植物生物化学技术领域。本发明所述方法以Percoll为梯度介质应用差速离心结合密度梯度离心分离和纯化柑橘果肉线粒体，包括以下步骤：1)将柑橘果肉与缓冲液A混合后榨汁，过滤得过滤液；2)将得到的过滤液进行差速离心，得到的沉淀用缓冲液B进行悬浮，得到样品I；3)将得到的样品I进行密度梯度离心，得到样品II；4)将得到的样品II与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得样品III；5)将得到的样品III与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得柑橘果肉线粒体。本发明得到的线粒体呈典型的椭球状，双层膜结构完整，嵴清晰可见，且线粒体提纯方法纯度高，提纯效果好。

公开(公告)号：CN108728396A

公开(公告)日：2018-11-02

申请号：CN201810603594.3

申请日：2018-06-12

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 程运江 ,  李欣 ,  柴应芳 ,  许让伟 ,  王鹏蔚 ,  田真 ,  曾云流 ,  邓秀新

IPC: C12N5/04

Abstract: 本发明提供了一种柑橘类果肉线粒体的分离纯化方法，涉及植物生物化学技术领域。本发明所述方法以Percoll为梯度介质应用差速离心结合密度梯度离心分离和纯化柑橘果肉线粒体，包括以下步骤：1)将柑橘果肉与缓冲液A混合后榨汁，过滤得过滤液；2)将得到的过滤液进行差速离心，得到的沉淀用缓冲液B进行悬浮，得到样品I；3)将得到的样品I进行密度梯度离心，得到样品II；4)将得到的样品II与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得样品III；5)将得到的样品III与缓冲液B混合，离心收集沉淀，得柑橘果肉线粒体。本发明得到的线粒体呈典型的椭球状，双层膜结构完整，嵴清晰可见，且线粒体提纯方法纯度高，提纯效果好。