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公开(公告)号：CN110669863B
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911042998.0
申请日：2019-10-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一组柑橘线粒体InDel分子标记及其应用，属于植物分子标记辅助种质资源鉴定技术领域。本发明的5对柑橘线粒体InDel分子标记引物序列如SEQ ID NO.1‑10所示，使用本发明的分子标记引物能够可快速、准确鉴定橘属、枳属和山金柑种质，能够鉴定柑橘原生质体融合后代线粒体来源，能够分析亲本未知柑橘品种母本来源。本发明在保护和利用野生柑橘资源上具重要意义。
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公开(公告)号：CN110699416A
公开(公告)日：2020-01-17
申请号：CN201911042777.3
申请日：2019-10-30
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于柑橘原生质体高效检测蛋白质亚细胞定位方法，包括以下步骤：(1)将细胞器荧光蛋白标记载体转化农杆菌，得到重组农杆菌；(2)重组农杆菌侵染柑橘外植体，获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘材料；(3)将待测基因克隆到荧光不同于步骤(1)的荧光标记表达载体，获得待测基因荧光标记载体；(4)酶解步骤(2)得到的柑橘材料，分离纯化并获得表达细胞器荧光蛋白标记的柑橘原生质体；(5)通过PEG介导，将待测基因荧光标记载体转化步骤(4)获得的柑橘原生质体，培养24-48h后，激光共聚焦显微镜下观察，两种荧光蛋白标记重合则表明待测基因表达蛋白定位于该细胞器。本发明方法简单、便捷、高效、成本低，成功率大幅提高。
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公开(公告)号：CN117044617B
公开(公告)日：2024-09-10
申请号：CN202310899599.6
申请日：2023-07-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种降低柑橘多胚程度进而提高杂交育种效率的方法，属于柑橘生物育种技术领域。本发明方法包括如下步骤：于多胚母本柑橘品种胚囊发育阶段，使用二苯基氯化碘盐或五氮胞苷处理柑橘花苞；经处理的多胚母本柑橘品种通过自交或自然授粉或人工授粉；在母本柑橘珠心胚起始的关键时期，继续使用二苯基氯化碘盐或五氮胞苷处理柑橘花苞；果实成熟后，授粉果实种子的杂种率得到提高。本发明可降低柑橘多胚品种的多胚程度，增强有性胚胎发育的竞争优势，进而提高以多胚柑橘品种为母本有性杂交的育种效率。本发明处理简单，操作方便，无特殊设备要求，适应性广，可节约时间和人力成本高效获得柑橘有性杂交后代。
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公开(公告)号：CN115720848A
公开(公告)日：2023-03-03
申请号：CN202211292040.9
申请日：2022-10-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H1/04
Abstract: 本发明公开了一种高效快速鉴定柑橘多胚品种有性胚的方法，属于柑橘生物育种技术领域。本发明的方法包括如下步骤：1)成熟种子准备：从柑橘多胚品种成熟果实中剥取出种子，并剥去除种子的内外种皮；2)有性胚的鉴定：观察种胚颜色，若既有白色又有绿色，则统计每粒种子白胚和绿胚数量。若白胚仅1个、绿胚有多个(1白+多绿)，则白胚为有性胚；反之，若绿胚仅1个、白胚有多个(1绿+多白)，则绿胚为有性胚。本发明依据种胚颜色鉴定柑橘多胚品种的有性胚，方法简便易操作，准确率高，节约了时间和劳力的投入，可提高以多胚柑橘品种为母本有性杂交的育种效率。
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公开(公告)号：CN119876455A
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202510049940.8
申请日：2025-01-13
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与柑橘种胚颜色紧密连锁的KASP分子标记及其应用，属于生物技术领域。本发明通过BSA‑seq定位到一个与柑橘种胚白/绿色性状紧密连锁的SNP位点，其位于甜橙二代参考基因组第5号染色体第8739586位，该位点碱基类型为T或G，TT或TG基因型、GG基因型对应的柑橘种胚颜色为白色、绿色。本发明利用该SNP位点开发了KASP分子标记，通过检测该SNP位点可以直接用于种胚颜色和相对应的基因型鉴定，该标记开发与实施不仅可以有效鉴定柑橘种胚颜色，还能准确预测无核品种的种胚颜色，用于辅助柑橘杂交育种亲本选配；利用该标记还可快速鉴定多胚品种的有性胚，提高以多胚品种为母本的有性杂交育种效率。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117044617A
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202310899599.6
申请日：2023-07-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明公开了一种降低柑橘多胚程度进而提高杂交育种效率的方法，属于柑橘生物育种技术领域。本发明方法包括如下步骤：于多胚母本柑橘品种胚囊发育阶段，使用二苯基氯化碘盐或五氮胞苷处理柑橘花苞；经处理的多胚母本柑橘品种通过自交或自然授粉或人工授粉；在母本柑橘珠心胚起始的关键时期，继续使用二苯基氯化碘盐或五氮胞苷处理柑橘花苞；果实成熟后，授粉果实种子的杂种率得到提高。本发明可降低柑橘多胚品种的多胚程度，增强有性胚胎发育的竞争优势，进而提高以多胚柑橘品种为母本有性杂交的育种效率。本发明处理简单，操作方便，无特殊设备要求，适应性广，可节约时间和人力成本高效获得柑橘有性杂交后代。
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公开(公告)号：CN115720848B
公开(公告)日：2023-08-25
申请号：CN202211292040.9
申请日：2022-10-21
Applicant: 华中农业大学
IPC: A01H1/04
Abstract: 本发明公开了一种高效快速鉴定柑橘多胚品种有性胚的方法，属于柑橘生物育种技术领域。本发明的方法包括如下步骤：1)成熟种子准备：从柑橘多胚品种成熟果实中剥取出种子，并剥去除种子的内外种皮；2)有性胚的鉴定：观察种胚颜色，若既有白色又有绿色，则统计每粒种子白胚和绿胚数量。若白胚仅1个、绿胚有多个(1白+多绿)，则白胚为有性胚；反之，若绿胚仅1个、白胚有多个(1绿+多白)，则绿胚为有性胚。本发明依据种胚颜色鉴定柑橘多胚品种的有性胚，方法简便易操作，准确率高，节约了时间和劳力的投入，可提高以多胚柑橘品种为母本有性杂交的育种效率。
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公开(公告)号：CN110432140A
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201910767573.X
申请日：2019-08-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种快速发掘柑橘四倍体的方法，属于植物多倍体育种技术领域。本发明方法根据柑橘根系、叶片和油胞的形态特征筛选疑似四倍体，与二倍体相比，四倍体的根系短粗、侧根少，四倍体的叶片厚、宽、颜色深，四倍体的油胞大、密度低；筛选疑似四倍体再用流式细胞仪进行倍性鉴定。本发明结合对根、叶和油胞的形态特征进行初选，获得四倍体的准确率可达85％以上，且用时短、操作简单；通过本发明方法获得的四倍体植株倍性稳定，不存在嵌合体。
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公开(公告)号：CN119955806A
公开(公告)日：2025-05-09
申请号：CN202510129329.6
申请日：2025-02-05
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种柑橘CsMYB62基因及其在柑橘枝刺软化中应用，属于柑橘育种领域。本发明发现柑橘CsMYB62基因是柑橘枝刺尖端硬化调控关键基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：1所示或者在SEQ ID NO：1所示核苷酸序列经取代、缺失或添加一个或几个核苷酸且具有编码同等活性蛋白的核苷酸序列。本发明发现利用基因编辑敲除柑橘CsMYB62基因能够让柑橘枝刺变得短而软，因此该基因可以作为培育枝刺弱化柑橘品种的重要候选基因。本发明可为柑橘枝刺性状遗传改良提供了重要的理论基础和基因资源。
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公开(公告)号：CN119162197A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411439001.6
申请日：2024-10-15
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种减数分裂相关基因CrMER3及其在柑橘无核育种中的应用，属于柑橘生物技术以及遗传育种领域。所述CrMER3基因存在CrMER3A、CrMER3a、CrMER3A‑103bp 3种基因型，其完整的核苷酸序列以及编码区核苷酸序列分别如SEQ ID NO:1‑6所示。CrMER3a在现有柑橘品种中多有存在，可广泛应用于柑橘无核育种。用于鉴别柑橘品种是否携带柑橘无核基因CrMER3a的KASP分子标记，对应CrMER3基因的第2295个碱基，在携带/不携带CrMER3a基因的柑橘品种中该碱基为C/T，该分子标记或其扩增引物能够用于柑橘无核分子标记辅助选择育种。
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