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公开(公告)号：CN105861407A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610321082.9
申请日：2016-05-16
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C07K14/315 , A61K39/092 , A61K2039/522 , A61K2039/54
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌2型溶血素溶血活性基因突变株及其疫苗制备和应用。该突变株命名为streptococcus suis type 2mSly(P353L)?SC?19，其保藏编号为：CCTCC M 2016077。所述突变株中溶血素基因碱基序列上1056bp至1059bp的基因序列为TTA。该突变株结合了基因缺失疫苗和毒力因子免疫保护研究的优点，使菌株既缺失猪链球菌II型溶血素的毒性，又具有溶血素蛋白的免疫源性。该菌株特点仍然表达完整的溶血素蛋白，但是不具有溶血活性，该菌株对细胞的毒性大大降低；菌株的溶血素溶血活性突变后，仍然能激活机体产生溶血素蛋白的抗体，具有很好的保护效应。
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公开(公告)号：CN106978399A
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201710083814.X
申请日：2017-02-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867
CPC classification number: C12N5/0645 , C12N15/102 , C12N15/86 , C12N2510/00 , C12N2740/15043
Abstract: 本发明公开了一种nlrp3基因敲除的细胞系及构建方法，该方法利用CRISPR技术将染色体基因组上NLRP3的基因一个插入A而另外一个缺失AG而使得细胞完全丧失该蛋白的表达。而且该缺失细胞系形态生长速度等方面均与对照细胞无明显的差异。使用内毒素LPS能激活TNF‑α的表达，激活缺失细胞系的免疫反应，与正常细胞无显著性差异；而使用NLRP3的激活剂，其炎性小体激活的能力丧失，基本无IL‑1β的分泌。证实本发明中细胞系NLRP3功能缺失，而其它功能未受影响。综上，本发明中NLRP3缺失细胞系Nlrp3‑/‑RAW可作为研究NLRP3蛋白质功能、NLRP3炎性小体、药物负筛选的良好细胞模型。
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公开(公告)号：CN108410784B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN201810076108.7
申请日：2018-01-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19工程菌及在疫苗中应用，该菌株以猪链球菌2型强毒分离株SC19为出发菌株，通过同源重组的方式，敲除了毒力基因cps和ssna，并将溶血素基因的353氨基酸由P突变成L，构建成功△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19。菌株△CPS/SsnA‑mSly(P353L)‑SC19的致病力显著降低，作为灭活疫苗和弱毒疫苗菌株时，具有很好的安全性，免疫动物后可提供针对猪链球菌2型、7型等血清型菌株感染的保护效力。而且该疫苗免疫后不会产生针对SsnA的抗体，该菌株可作为区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的基因标记疫苗的菌株，从而有利于该病的根除和净化。
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公开(公告)号：CN108410784A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810076108.7
申请日：2018-01-26
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪链球菌△CPS/SsnA-mSly(P353L)-SC19工程菌及在疫苗中应用，该菌株以猪链球菌2型强毒分离株SC19为出发菌株，通过同源重组的方式，敲除了毒力基因cps和ssna，并将溶血素基因的353氨基酸由P突变成L，构建成功△CPS/SsnA-mSly(P353L)-SC19。菌株△CPS/SsnA-mSly(P353L)-SC19的致病力显著降低，作为灭活疫苗和弱毒疫苗菌株时，具有很好的安全性，免疫动物后可提供针对猪链球菌2型、7型等血清型菌株感染的保护效力。而且该疫苗免疫后不会产生针对SsnA的抗体，该菌株可作为区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的基因标记疫苗的菌株，从而有利于该病的根除和净化。
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