公开(公告)号：CN115109854A

公开(公告)日：2022-09-27

申请号：CN202110291503.9

申请日：2021-03-18

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  李明成 ,  孙丽媛 ,  艾金霞 ,  苑广信 ,  王雪松 ,  张志杰

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及中药分子鉴定领域，是一种乳鹿分子身份证快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括：乳鹿基因组DNA的提取、设计乳鹿mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、核酸试纸条鉴定乳鹿真伪图谱和结果判定。试剂盒包括：乳鹿基因组DNA提取试剂、乳鹿PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及核酸试纸条。本发明利用乳鹿独一无二的mtDNA Cytb基因序列，设计的特异性引物，利用PCR技术的特异性、灵敏性特点，利用核酸试纸条技术的简便、快速、低成本优势，所建立的鉴定方法能够特异、准确、快速地鉴定乳鹿与其易混品种；所研制的试剂盒能够使鉴定方法更标准化、更规范化。

公开(公告)号：CN114182040A

公开(公告)日：2022-03-15

申请号：CN202111568493.5

申请日：2021-12-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 兰春阳 ,  李佩瑶 ,  李翔 ,  刘晓蓉 ,  李明成 ,  李丹

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6851 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种茯苓荧光定量PCR检测试剂盒，其特征是由鉴定反应、阳性对照反应和阴性对照反应三部分体系组成。本发明方法包括使用特异性引物及SYBR Green染料法对茯苓的分子特征进行鉴定，荧光定量PCR鉴定方法所用上游引物序列为5′‑GCACCGTCTACAGCCATCTTCC‑3′，下游引物序列为5′‑CCTCCCCACGCCCCAATAAATG‑3′，该方法特征是，总体系为20μL，其中2×RealStar Green Power Mixture 10μL，上下游引物0.2μL，待检样本DNA 0.2μL，余为双蒸馏水。一种茯苓荧光定量PCR鉴定方法是设计合成一对茯苓特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤。判断标准：茯苓正品出现特异性“S型”扩增曲线且Ct值小于31。茯苓荧光定量PCR检测试剂盒及鉴定方法能够准确区别茯苓及其伪品。

公开(公告)号：CN111118176A

公开(公告)日：2020-05-08

申请号：CN202010074289.7

申请日：2020-01-22

Applicant: 北华大学

Inventor： 李明成 ,  段思琪

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及食品检测技术领域，是一种袋鼠肉、豚鼠肉与褐家鼠肉多重PCR检测试剂盒，其特点是，它包含：动物组织线粒体DNA提取体系和鉴定反应体系(同阳性对照反应体系、阴性对照液反应体系)。鉴定反应总体系为50μL，其中含有反应缓冲液5μL，dNTP 2-5μL，MgCl23μL，Taq DNA聚合酶1-5μL，袋鼠引物2.25μL、豚鼠引物3μL和褐家鼠引物2μL，待检样本DNA 2-6μL，余为双蒸馏水；袋鼠肉、豚鼠肉与褐家鼠肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤，能够同时区别三种鼠肉的特异性；具有快速、检测结果可靠等优点。

公开(公告)号：CN109988849A

公开(公告)日：2019-07-09

申请号：CN201910320851.7

申请日：2019-04-21

Applicant: 北华大学

Inventor： 段思琪 ,  李明成 ,  艾金霞 ,  徐岩 ,  崔琳 ,  王贺 ,  刘佳琳 ,  刘亚晗 ,  陈堃

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/686

Abstract: 本发明涉及食品检测技术领域，是一种鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR检测试剂盒，其特点是，它包含：动物组织线粒体DNA提取体系和三种多重PCR反应体系(阳性对照反应体系、阴性对照反应体系和鉴定反应体系)。PCR反应总体系为50μL，其中含有反应缓冲液5μL，dNTP 2‑5μL，MgCl23μL，Taq DNA聚合酶1‑5μL，每种引物0.5‑2μL，待检样本DNA 1‑3μL，余为双蒸馏水。鼠肉、山羊肉与绵羊肉多重PCR鉴定方法是利用细胞色素b具有的种属特异性设计三种特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤，能够同时区别鼠肉、山羊肉及绵羊肉的特异性；具有简便、快速、检测结果可靠等优点。

公开(公告)号：CN103122381A

公开(公告)日：2013-05-29

申请号：CN201210593407.0

申请日：2012-12-22

Applicant: 北华大学

Inventor： 苑广信 ,  李明成 ,  李洪宇 ,  王淼 ,  张丽华 ,  傅桂莲 ,  王冰梅

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及中药鉴定技术领域，具体为一种柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱及鉴定方法。柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱包括DNA的提取、PCR扩增、扩增产物的分析、柴胡毛细管电泳DNA指纹图谱的建立。柴胡DNA指纹鉴定方法包括柴胡DNA标准指纹图谱的建立、样品DNA指纹图谱的建立、利用相似度软件进行结果鉴定。该指纹图谱及鉴定方法可用于柴胡样品的鉴定。本发明能从遗传本质上对柴胡进行真伪鉴定，方法快速、准确、客观，可用于柴胡样品的鉴定。

公开(公告)号：CN101434990B

公开(公告)日：2011-03-23

申请号：CN200810051643.3

申请日：2008-12-15

Applicant: 北华大学

Inventor： 李明成 ,  张丽华 ,  王冰梅 ,  孙红霞

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及中药检测技术领域，是一种貂心DNA检测试剂盒，它包含：含有缓冲液，12.5mM dNTP，0.1mM引物1或引物2的一种，Taq DNA聚合酶，待检样本DNA，双蒸馏水的鉴定反应体系；含有缓冲液，12.5mM dNTP，0.1mM引物1和引物2的一种，Taq DNA聚合酶，貂心DNA，双蒸馏水的阳性对照反应体系；含有缓冲液，12.5mM dNTP，0.1mM引物1和引物2的一种，Taq DNA聚合酶，鸡心、鸭心、鹅心和兔心DNA按1∶1混合，双蒸馏水的阴性对照反应体系。貂心DNA鉴定方法是设计貂心线粒体DNA二对特异寡核苷酸引物、人工合成貂心线粒体DNA二对特异寡核苷酸引物、确定反应程序和结果判定等步骤，能够准确同时区别与貂心易混的多种动物心脏的特异性；鉴定方法具有简便、快速、检测结果可靠等优点。

公开(公告)号：CN117721167A

公开(公告)日：2024-03-19

申请号：CN202410128110.X

申请日：2024-01-30

Applicant: 北华大学

Inventor： 王大麟 ,  韩梅 ,  王哲 ,  刘思译 ,  吴震宇 ,  冷冰 ,  王海涛 ,  李明成 ,  蒋维海

IPC: C12P21/06 ,  C07K1/14 ,  C07K1/30 ,  C07K1/16 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/107

Abstract: 本发明提供一种促进键骨愈合的鹿骨活性多肽及其制备方法，所述制备方法包括：(1)将鹿骨粉末脱脂、脱钙后进行水提，所得提取液进行盐析、透析，得到鹿骨蛋白；(2)将所述鹿骨蛋白进行一次酶解、二次酶解，得到粗鹿骨多肽；(3)将所述粗鹿骨多肽进行高效液相色谱分离后，得到的鹿骨多肽，将所述鹿骨多肽进行烷基化反应、中和反应，将反应产物进行脱盐，得到所述鹿骨活性多肽。本发明制备得到的鹿骨活性多肽可以有效促进键骨愈合、促进细胞增殖。

公开(公告)号：CN116970732A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202311076998.9

申请日：2023-08-25

Applicant: 北华大学

Inventor： 周亭亭 ,  周磊 ,  高丽君 ,  孙丽媛 ,  张亚丽 ,  李嘉宜 ,  尹荣 ,  李明成

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/686 ,  C12N15/11 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了一种可鉴定松茸真伪的引物对及其应用，属于分子生物技术领域。所述引物对包括如SEQ ID NO.1所示的上游引物和如SEQ ID NO.2所示的下游引物。利用所述引物对对待测松茸样品进行PCR扩增反应，反应产物进行凝胶电泳，根据电泳图谱中DNA条带位置的不同，可区分松茸正品及其伪品。本发明对松茸真伪鉴定的操作步骤简单、操作快速，过程中不需要使用有毒有害试剂，且专属性更强、准确度和灵敏度更高，当DNA样品浓度为1ng·μL‑1时仍可获得清晰的电泳条带。

公开(公告)号：CN116356035A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202111623162.7

申请日：2021-12-28

Applicant: 北华大学

Inventor： 王艳双 ,  孙丽媛 ,  高丽君 ,  苑广信 ,  李明成 ,  王雪松

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6804 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及肉类食品的分子鉴定领域，是一种PCR‑免疫胶体金试纸条猪肉快速鉴定方法及检测试剂盒。鉴定方法包括：猪肉基因组DNA的提取、设计猪mtDNA Cyt b基因的特异性引物、建立PCR反应体系和反应条件、胶体金试纸条鉴定猪肉真伪图谱和结果判定。试剂盒包括：猪肉基因组DNA提取试剂、猪肉PCR鉴定试剂、阳性对照DNA克隆液、空白对照液及免疫胶体金试纸条。本发明结合PCR技术的特异性、灵敏性、快速特点，免疫胶体金试纸条技术的可视化、简便、快速、低成本优势，以及试剂盒的标准化、规范化特征，能够实地、特异、准确、快速地鉴定猪肉与其易混品种，具有一定的新颖性、创造性和实用性。

公开(公告)号：CN110129315A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910460240.2

申请日：2019-05-30

Applicant: 北华大学

Inventor： 孙丽媛 ,  陈思秀 ,  刘玟妍 ,  艾金霞 ,  李明成 ,  赵云冬 ,  王艳双 ,  高丽君 ,  王雪松 ,  段思琪 ,  李盈诺 ,  王天添

IPC: C12N15/10

Abstract: 本发明公开了一种从阿胶中快速提取DNA的优化方法。本方法使用DNA纯化柱代替酚、氯仿等有毒的有机溶剂，并经过数次优化，确定了提取阿胶中驴源性基因组DNA的最适条件，有效去除阿胶中的蛋白质成分，最高效率的从深加工的阿胶及阿胶制品中提取出严重降解的DNA。本方法所需试剂安全无毒害，操作简单、省时，可在90min内完成阿胶基因组DNA提取，经聚合酶链式反应、2％琼脂糖凝胶电泳后在78bp处出现特异性条带，克隆测序比对后，与GenBank中已登记的驴物种相似性为100％。本方法提取的DNA纯度高、浓度大，解决了阿胶及阿胶制品DNA难以提取的问题，为分子生物学鉴定提供了关键的技术支持。