一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN112301103B

    公开(公告)日:2023-04-11

    申请号:CN201910712493.4

    申请日:2019-08-02

    Abstract: 本发明涉及一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法,包括以下步骤:(1)将天然短片段核酸进行末端修复,获得末端修复的核酸;(2)将所述末端修复的核酸连接双链接头,获得连接产物,其中所述双链接头的每条链仅包含三种碱基;(3)使用具有脱氧尿嘧啶标记的PCR引物对所述连接产物进行PCR扩增,获得PCR产物,其中所述PCR引物与双链接头的一条链完全或部分互补并且仅包含三种碱基;(4)对所述PCR产物先使用具有脱氧尿嘧啶切割功能的酶进行酶切,再在脱氧核苷酸溶液存在下使用同时具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的酶进行酶切,获得天然短片段核酸的非特异性扩增产物,所述脱氧核苷酸溶液仅包含引物所缺乏碱基的互补碱基。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。

    一种构建全基因组高通量测序的文库的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN112301432B

    公开(公告)日:2021-04-06

    申请号:CN202011584655.X

    申请日:2020-12-29

    Inventor: 张建光 陈迪 商玲

    Abstract: 本发明公开了一种构建全基因组高通量测序文库的方法,包括以下步骤:1)提取样本gDNA;2)将所述样本gDNA酶切片段化、末端补平、加A,获得加A后的gDNA;3)将所述加A后的gDNA与接头组合连接,获得连接产物,所述接头组合包含两个部分:Y型反向接头和高GC夹板接头;4)纯化所述连接产物,获得纯化产物;和5)对所述纯化产物进行片段筛选,获得测序文库。本发明还公开了一种构建全基因组高通量测序文库的试剂盒。

    一种构建全基因组高通量测序的文库的方法和试剂盒

    公开(公告)号:CN112301432A

    公开(公告)日:2021-02-02

    申请号:CN202011584655.X

    申请日:2020-12-29

    Inventor: 张建光 陈迪 商玲

    Abstract: 本发明公开了一种构建全基因组高通量测序文库的方法,包括以下步骤:1)提取样本gDNA;2)将所述样本gDNA酶切片段化、末端补平、加A,获得加A后的gDNA;3)将所述加A后的gDNA与接头组合连接,获得连接产物,所述接头组合包含两个部分:Y型反向接头和高GC夹板接头;4)纯化所述连接产物,获得纯化产物;和5)对所述纯化产物进行片段筛选,获得测序文库。本发明还公开了一种构建全基因组高通量测序文库的试剂盒。

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