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公开(公告)号:CN112301103B
公开(公告)日:2023-04-11
申请号:CN201910712493.4
申请日:2019-08-02
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明涉及一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法,包括以下步骤:(1)将天然短片段核酸进行末端修复,获得末端修复的核酸;(2)将所述末端修复的核酸连接双链接头,获得连接产物,其中所述双链接头的每条链仅包含三种碱基;(3)使用具有脱氧尿嘧啶标记的PCR引物对所述连接产物进行PCR扩增,获得PCR产物,其中所述PCR引物与双链接头的一条链完全或部分互补并且仅包含三种碱基;(4)对所述PCR产物先使用具有脱氧尿嘧啶切割功能的酶进行酶切,再在脱氧核苷酸溶液存在下使用同时具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的酶进行酶切,获得天然短片段核酸的非特异性扩增产物,所述脱氧核苷酸溶液仅包含引物所缺乏碱基的互补碱基。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。
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公开(公告)号:CN110409001B
公开(公告)日:2022-11-15
申请号:CN201910678822.8
申请日:2019-07-25
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种构建捕获文库的方法,包括以下步骤:(1)获得片段化的DNA;(2)将片段化的DNA与Y型接头连接,获得预文库;(3)在不存在封闭序列的情况下将预文库与杂交探针进行杂交,获得杂交产物;和(4)将杂交产物进行PCR扩增,获得捕获文库。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。
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公开(公告)号:CN112301432B
公开(公告)日:2021-04-06
申请号:CN202011584655.X
申请日:2020-12-29
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种构建全基因组高通量测序文库的方法,包括以下步骤:1)提取样本gDNA;2)将所述样本gDNA酶切片段化、末端补平、加A,获得加A后的gDNA;3)将所述加A后的gDNA与接头组合连接,获得连接产物,所述接头组合包含两个部分:Y型反向接头和高GC夹板接头;4)纯化所述连接产物,获得纯化产物;和5)对所述纯化产物进行片段筛选,获得测序文库。本发明还公开了一种构建全基因组高通量测序文库的试剂盒。
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公开(公告)号:CN112301432A
公开(公告)日:2021-02-02
申请号:CN202011584655.X
申请日:2020-12-29
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
Abstract: 本发明公开了一种构建全基因组高通量测序文库的方法,包括以下步骤:1)提取样本gDNA;2)将所述样本gDNA酶切片段化、末端补平、加A,获得加A后的gDNA;3)将所述加A后的gDNA与接头组合连接,获得连接产物,所述接头组合包含两个部分:Y型反向接头和高GC夹板接头;4)纯化所述连接产物,获得纯化产物;和5)对所述纯化产物进行片段筛选,获得测序文库。本发明还公开了一种构建全基因组高通量测序文库的试剂盒。
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公开(公告)号:CN111378647A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN201811619579.4
申请日:2018-12-27
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
IPC: C12N15/10
Abstract: 本发明涉及一种快速制备单分子光学图谱标记文库的方法,包括以下步骤:(1)提取长片段基因组DNA;(2)标记提取的基因组DNA;(3)纯化标记的基因组DNA,和(4)将基因组DNA的骨架染色,获得单分子光学图谱标记文库。本发明还涉及用于制备单分子光学图谱标记文库的试剂盒。
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公开(公告)号:CN111378646A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN201811619310.6
申请日:2018-12-27
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
IPC: C12N15/10 , C12Q1/6806
Abstract: 本发明涉及一种快速单反应管提取长片段基因组DNA的方法,包括以下步骤:a)向样品中加入裂解液和蛋白酶K,使细胞裂解并释放基因组DNA;b)向步骤a)的反应体系中加入沉淀剂,获得基因组DNA的沉淀;c)用清洗液洗涤所得的基因组DNA的沉淀;d)用溶解液溶解基因组DNA。本发明还涉及适用于上述方法的试剂盒。
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公开(公告)号:CN110409001A
公开(公告)日:2019-11-05
申请号:CN201910678822.8
申请日:2019-07-25
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
Abstract: 本发明涉及一种构建捕获文库的方法,包括以下步骤:(1)获得片段化的DNA;(2)将片段化的DNA与Y型接头连接,获得预文库;(3)在不存在封闭序列的情况下将预文库与杂交探针进行杂交,获得杂交产物;和(4)将杂交产物进行PCR扩增,获得捕获文库。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。
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公开(公告)号:CN109750092A
公开(公告)日:2019-05-14
申请号:CN201711070776.0
申请日:2017-11-03
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
IPC: C12Q1/6869 , C40B50/06
CPC classification number: C12Q1/6806 , C12Q2537/159 , C12Q2565/519
Abstract: 本发明涉及一种基于目标序列捕获和多重置换扩增的靶向富集高GC含量目标DNA的方法以及适于该方法的试剂盒。本发明还涉及基于该富集方法构建高GC含量DNA测序文库的方法。
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公开(公告)号:CN105087756A
公开(公告)日:2015-11-25
申请号:CN201410174277.6
申请日:2014-04-23
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
CPC classification number: C12Q1/6883 , C12Q1/6827 , C12Q2600/156 , C12Q2600/158 , C12Q2600/16 , C12Q2525/191 , C12Q2525/307 , C12Q2535/122 , C12Q2565/514
Abstract: 本发明提供了一种无创检测胎儿耳聋致病基因突变的方法、引物和试剂盒。本发明的方法包括:a)针对耳聋致病基因预定突变位点设计引物;b)提取孕妇的血浆DNA;c)将所述提取的血浆DNA与预扩增接头连接,获得连接产物;d)对所述连接产物进行PCR预扩增,获得预扩增产物;e)对所述预扩增产物进行环化,获得环化DNA分子;f)利用所述引物对所述环化DNA分子进行PCR扩增,获得扩增产物;和g)对所述扩增产物进行高通量测序并分析耳聋致病基因的突变。本发明可以有效地确定耳聋致病基因的预定位点是否发生了突变,以及所发生突变的类型。
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公开(公告)号:CN104745679A
公开(公告)日:2015-07-01
申请号:CN201310756037.2
申请日:2013-12-31
Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司
IPC: C12Q1/68
CPC classification number: C12Q1/6886 , C12Q1/6853 , C12Q2600/156 , C12Q2600/16 , C12Q2535/122 , C12Q2537/159 , C12Q2539/105 , C12Q1/6869 , C12Q2525/191
Abstract: 本发明涉及一种无创检测受试者中EGFR基因突变的方法,其特征在于,包括以下步骤:针对EGFR基因外显子设计引物;抽提受试者血浆DNA;将上述抽提的血浆DNA与标签接头连接;将上述与标签接头连接的血浆DNA进行PCR预扩增;将所述扩增后的DNA进行环化,得到环化DNA;利用所述引物对所述环化DNA进行PCR扩增;以及对所述PCR扩增的产物进行高通量测序并分析EGFR基因的突变。本发明还涉及有关的试剂盒。
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