公开(公告)号：CN112301103B

公开(公告)日：2023-04-11

申请号：CN201910712493.4

申请日：2019-08-02

Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司

Inventor： 田婕 ,  吴娜拉胡 ,  杨雪艳 ,  张扬 ,  张建光

IPC: C12Q1/6844

Abstract: 本发明涉及一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法，包括以下步骤：(1)将天然短片段核酸进行末端修复，获得末端修复的核酸；(2)将所述末端修复的核酸连接双链接头，获得连接产物，其中所述双链接头的每条链仅包含三种碱基；(3)使用具有脱氧尿嘧啶标记的PCR引物对所述连接产物进行PCR扩增，获得PCR产物，其中所述PCR引物与双链接头的一条链完全或部分互补并且仅包含三种碱基；(4)对所述PCR产物先使用具有脱氧尿嘧啶切割功能的酶进行酶切，再在脱氧核苷酸溶液存在下使用同时具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的酶进行酶切，获得天然短片段核酸的非特异性扩增产物，所述脱氧核苷酸溶液仅包含引物所缺乏碱基的互补碱基。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。

公开(公告)号：CN112301103A

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN201910712493.4

申请日：2019-08-02

Applicant: 北京贝瑞和康生物技术有限公司

Inventor： 田婕 ,  吴娜拉胡 ,  杨雪艳 ,  张扬 ,  张建光

IPC: C12Q1/6844

Abstract: 本发明涉及一种非特异性扩增天然短片段核酸的方法，包括以下步骤：(1)将天然短片段核酸进行末端修复，获得末端修复的核酸；(2)将所述末端修复的核酸连接双链接头，获得连接产物，其中所述双链接头的每条链仅包含三种碱基；(3)使用具有脱氧尿嘧啶标记的PCR引物对所述连接产物进行PCR扩增，获得PCR产物，其中所述PCR引物与双链接头的一条链完全或部分互补并且仅包含三种碱基；(4)对所述PCR产物先使用具有脱氧尿嘧啶切割功能的酶进行酶切，再在脱氧核苷酸溶液存在下使用同时具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的酶进行酶切，获得天然短片段核酸的非特异性扩增产物，所述脱氧核苷酸溶液仅包含引物所缺乏碱基的互补碱基。本发明还涉及用于实施上述方法的试剂盒。