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公开(公告)号：CN119020260A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202411130700.2
申请日：2024-08-16
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N5/071 , C12N5/10 , C12N15/40 , C07K19/00 , C12N15/867 , A61K39/187 , A61P31/14 , A61K39/385 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了表达猪瘟病毒E2蛋白的悬浮CHO细胞系及其在制备猪瘟疫苗中的应用。本发明提供了一株稳定表达猪瘟病毒E2蛋白的悬浮CHO细胞系，其微生物保藏编号是CGMCC No.45825。本发明进一步提供了Fe‑E2NPs纳米颗粒疫苗，包括：由ST‑E2蛋白和铁蛋白偶联得到，所述铁蛋白是将△N‑SpyCatcher蛋白融合到铁蛋白的N‑末端。本发明提供的纳米颗粒疫苗在兔体内诱导比C株疫苗更好的免疫保护，不仅可以诱导IFN‑γ以提供对猪瘟的早期保护，而且更快地诱导有效的体液免疫，兼顾了减毒活疫苗和亚单位疫苗的优点，提供DIVA特性，可为猪瘟的有效替代疫苗、在控制和根除CSF方面发挥重要作用。
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公开(公告)号：CN113736746A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119162129A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411276972.3
申请日：2024-09-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了共表达高斯荧光素酶与绿色荧光蛋白的重组非洲猪瘟病毒株及其应用。本发明构建了由p72启动子启动的Gluc与EGFP报告基因转移载体；利用同源重组，插入到ASFV MGF300‑4L基因的终止密码子之后，得到共表达Gluc与EGFP的重组非洲猪瘟病毒株；作为首个未缺失任何病毒基因的表达荧光蛋白和荧光素酶的重组ASFV，其插入的报告基因EGFP与Gluc能稳定表达，并且该报告病毒的生物学特性与亲本毒株无显著差异；与缺失病毒基因的现有重组ASFV病毒株相比，本发明构建的重组非洲猪瘟病毒株在代替亲本毒株研究病毒的感染、致病机制或用于抗病毒药物筛选时更具代表性。
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公开(公告)号：CN113736746B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号：CN113122654A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389079.0
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒的检测靶标以及荧光定量PCR检测引物。本发明以ASFV中国流行毒株为对象，选择多基因家族中相对保守又具研究和应用前景的MGF360‑13L基因为靶标，建立了ASFV MGF360‑13L TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。本发明方法可实现对最低15.6拷贝/μL ASFV核酸的检测，与多种病原不存在交叉反应，相比常规PCR检测方法，本发明检测方法在敏感性上高出3个数量级。本发明所建立的检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，能够对可疑样品进行二次确认，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，也能鉴别ASFV MGF基因趋势疫苗毒与野毒感染。
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公开(公告)号：CN119587548A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411817374.2
申请日：2024-12-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 华中科技大学
IPC: A61K31/498 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了吩嗪‑1‑羧酸或其可药用盐在制备抑制非洲猪瘟病毒药物中的用途。本发明使用共表达绿色荧光蛋白和高斯荧光素酶的双报告病毒rASFV‑Gluc/EGFP，从246种天然小分子化合物中筛选发现吩嗪‑1‑羧酸对ASFV的复制具有显著的抑制效果；进一步评估其抑制作用发现，PCA对其靶细胞原代猪肺泡巨噬细胞的半数最大细胞毒性浓度为470.5μM，在PAMs中对ASFV的半数最大抑制浓度为1.59μM。根据剂量依赖性抑制实验结果，当PCA浓度为25μM时，对ASFV的抑制效果可达100倍以上。本发明在制备抗ASFV的药物或制剂等方面具有应用前景。
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公开(公告)号：CN113122655A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389185.9
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明选择目前中国流行的ASFV重要毒力相关因子EP402R基因(CD2v)基因为靶标，构建了阳性质粒标准品并设计了检测非洲猪瘟病毒EP402R基因的实时荧光定量PCR引物和探针，在此基础上，本发明进一步建立了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明所建立的非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，在ASFV疫苗毒与野毒的检测上也有重要的应用前景。
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