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公开(公告)号：CN119587548A
公开(公告)日：2025-03-11
申请号：CN202411817374.2
申请日：2024-12-11
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心) , 华中科技大学
IPC: A61K31/498 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了吩嗪‑1‑羧酸或其可药用盐在制备抑制非洲猪瘟病毒药物中的用途。本发明使用共表达绿色荧光蛋白和高斯荧光素酶的双报告病毒rASFV‑Gluc/EGFP，从246种天然小分子化合物中筛选发现吩嗪‑1‑羧酸对ASFV的复制具有显著的抑制效果；进一步评估其抑制作用发现，PCA对其靶细胞原代猪肺泡巨噬细胞的半数最大细胞毒性浓度为470.5μM，在PAMs中对ASFV的半数最大抑制浓度为1.59μM。根据剂量依赖性抑制实验结果，当PCA浓度为25μM时，对ASFV的抑制效果可达100倍以上。本发明在制备抗ASFV的药物或制剂等方面具有应用前景。
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公开(公告)号：CN115806943A
公开(公告)日：2023-03-17
申请号：CN202210763914.8
申请日：2022-06-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了双荧光标记的重组伪狂犬病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用PRV TJ株Fosmid文库在病毒基因组US9和US2基因之间非编码区插入ANCHOR3系统的完整序列，同时在UL10基因的终止密码子前插入了mCherry基因序列，获得了基因组和囊膜蛋白分别标记绿色荧光和红色荧光的重组伪狂犬病病毒株。经体内外评估，外源基因的插入不影响重组病毒的生长特征、病毒形态、遗传稳定性和安全性。采用该重组病毒成功示踪了完整的PRV复制周期并评价了抗病毒药物抑制PRV复制的效果，建立了PRV体外温控可视化潜伏感染模型，可用于PRV潜伏感染模型及抗病毒药物筛选、神经回路示踪、病毒和宿主蛋白功能研究等。
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公开(公告)号：CN113122655A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389185.9
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/63 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明选择目前中国流行的ASFV重要毒力相关因子EP402R基因(CD2v)基因为靶标，构建了阳性质粒标准品并设计了检测非洲猪瘟病毒EP402R基因的实时荧光定量PCR引物和探针，在此基础上，本发明进一步建立了非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法。本发明所建立的非洲猪瘟病毒EP402R基因TaqMan荧光定量PCR检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，在ASFV疫苗毒与野毒的检测上也有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN113736746B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号：CN116355863A
公开(公告)日：2023-06-30
申请号：CN202310278967.5
申请日：2023-03-21
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12N7/00 , G01N33/569 , A61K39/12 , A61P31/14 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了适应传代细胞培养的猪非典型瘟病毒分离株及其用途。本发明从确定为APPV感染的死亡仔猪中分离到一株适应传代细胞培养的APPV分离株，其微生物保藏编号是：CGMCC No.45417。该分离株可以在PK‑15细胞中连续稳定传代和增殖，且传代过程中病毒滴度逐渐增高。病毒中和试验(VNT)表明基于该分离株进行的VNT能够有效区分APPV抗体阳性血清和阴性血清。本发明提供的APPV分离株为APPV的生物学和致病性研究以及疫苗和诊断试剂的开发提供关键材料，对APPV引起的疾病诊断、感染监测体系的完善和所致疾病流行的控制等具有重要应用前景，同时还可用于制备诊断或防治APPV感染的检测试剂或疫苗。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112877231B
公开(公告)日：2023-06-23
申请号：CN201911206844.0
申请日：2019-11-29
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了具有抑菌和抗氧化活性的乳酸菌及其应用。为了获得安全、具有良好益生特性的菌株，本发明从中国大兴安岭地区的野猪粪便中分离乳酸菌，经16S rDNA鉴定和耐酸、耐胆盐试验初步筛选出了4株候选菌株；本发明进一步通过自凝集和共凝集试验、体外黏附试验、抑菌试验、清除自由基试验和安全性评价，分别检测了4株分离菌株的益生特性和安全性。检测结果表明，GKM5‑30菌株相比于其他的乳酸菌表现出更为优异的黏附能力、凝集能力、抑菌活性及抗氧化能力，具有良好的益生特性和安全性，具备进一步开发益生菌制剂的潜力。
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公开(公告)号：CN113122654A
公开(公告)日：2021-07-16
申请号：CN201911389079.0
申请日：2019-12-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了非洲猪瘟病毒的检测靶标以及荧光定量PCR检测引物。本发明以ASFV中国流行毒株为对象，选择多基因家族中相对保守又具研究和应用前景的MGF360‑13L基因为靶标，建立了ASFV MGF360‑13L TaqMan实时荧光定量PCR检测方法。本发明方法可实现对最低15.6拷贝/μL ASFV核酸的检测，与多种病原不存在交叉反应，相比常规PCR检测方法，本发明检测方法在敏感性上高出3个数量级。本发明所建立的检测方法特异性强、灵敏度高、重复性好，与已有的经典检测方法符合率高，能够对可疑样品进行二次确认，不仅丰富了ASFV现有检测靶标，也能鉴别ASFV MGF基因趋势疫苗毒与野毒感染。
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公开(公告)号：CN115806943B
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202210763914.8
申请日：2022-06-30
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了双荧光标记的重组伪狂犬病病毒株及其构建方法和应用。本发明利用PRV TJ株Fosmid文库在病毒基因组US9和US2基因之间非编码区插入ANCHOR3系统的完整序列，同时在UL10基因的终止密码子前插入了mCherry基因序列，获得了基因组和囊膜蛋白分别标记绿色荧光和红色荧光的重组伪狂犬病病毒株。经体内外评估，外源基因的插入不影响重组病毒的生长特征、病毒形态、遗传稳定性和安全性。采用该重组病毒成功示踪了完整的PRV复制周期并评价了抗病毒药物抑制PRV复制的效果，建立了PRV体外温控可视化潜伏感染模型，可用于PRV潜伏感染模型及抗病毒药物筛选、神经回路示踪、病毒和宿主蛋白功能研究等。
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公开(公告)号：CN108754616B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN201810374527.9
申请日：2018-04-24
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了伪狂犬病病毒(PRV)基因组Fosmid文库、构建方法及其在构建PRV突变体中的应用。本发明构建了PRVTJ株基因组Fosmid文库，从中选取了10组能覆盖完整PRV基因组且相互有重叠区域的5粘粒系统，从中筛选出5组可拯救出完整PRV的粘粒并鉴定出最佳粘粒组合，应用该粘粒组合构建了与VP26融合表达EGFP的重组PRV，该报告病毒与亲本病毒在滴度与生长特性上无差异。本发明将庞大的PRV基因组分成几个小片段构建Fosmid文库，提高了文库的稳定性，同时使PRV基因的改造和修饰更加简单、方便，缩短了构建文库的周期。本发明为对PRV基因组进行快速、准确修饰及构建重组疫苗等奠定了基础。
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公开(公告)号：CN119162129A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411276972.3
申请日：2024-09-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了共表达高斯荧光素酶与绿色荧光蛋白的重组非洲猪瘟病毒株及其应用。本发明构建了由p72启动子启动的Gluc与EGFP报告基因转移载体；利用同源重组，插入到ASFV MGF300‑4L基因的终止密码子之后，得到共表达Gluc与EGFP的重组非洲猪瘟病毒株；作为首个未缺失任何病毒基因的表达荧光蛋白和荧光素酶的重组ASFV，其插入的报告基因EGFP与Gluc能稳定表达，并且该报告病毒的生物学特性与亲本毒株无显著差异；与缺失病毒基因的现有重组ASFV病毒株相比，本发明构建的重组非洲猪瘟病毒株在代替亲本毒株研究病毒的感染、致病机制或用于抗病毒药物筛选时更具代表性。
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