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公开(公告)号：CN113736746B
公开(公告)日：2023-07-14
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号：CN115704819A
公开(公告)日：2023-02-17
申请号：CN202110904538.5
申请日：2021-08-06
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
IPC: G01N33/569 , G01N33/68 , G01N33/543 , G01N33/58 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明公开了p34蛋白作为诊断抗原在检测非洲猪瘟病毒中的用途。本发明首先对p34蛋白的抗原性进行了分析，发现原核及真核表达的p34蛋白均能同ASFV阳性血清发生反应，其中原核表达的p34蛋白产量和纯度高，其抗体可有效抑制ASFV复制，表明其可作为ASFV的候选保护性抗原。本发明以p34蛋白为诊断抗原建立了检测非洲猪瘟病毒间接ELISA方法，其敏感性为1:800，且同其他常见猪源病毒血清无交叉反应。批间及批内的变异系数在2.13％‑8.83％之间，与法国ID.VET ASFV抗体检测试剂盒符合率为96.83％，该间接ELISA检测方法敏感性、特异性以及稳定性良好，可应用于ASFV感染血清的检测。
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公开(公告)号：CN113736746A
公开(公告)日：2021-12-03
申请号：CN202110788781.5
申请日：2021-07-13
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了在传代细胞系中良好复制的非洲猪瘟病毒(ASFV)适应毒株及其应用。本发明通过不同传代细胞系的感染实验发现ASFV野毒株(ASFV‑WT)可在HEK293T细胞中低水平复制。将ASFV‑WT在HEK293T细胞中连续传代适应获得了可在HEK293T细胞高效增殖的ASFV适应毒株ASFV‑P61，其病毒滴度最高可以达到107.5TCID50/mL，该适应毒株的微生物保藏编号是CCTCC NO：V202153。此外，该适应毒株基因组5’端的多基因家族缺失基因(包含多个毒力相关基因)序列达20kb左右，表明其毒力可能已经致弱，具有研制成为非洲猪瘟疫苗候选株的潜能。
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公开(公告)号：CN119162129A
公开(公告)日：2024-12-20
申请号：CN202411276972.3
申请日：2024-09-12
Applicant: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所(中国动物卫生与流行病学中心哈尔滨分中心)
Abstract: 本发明公开了共表达高斯荧光素酶与绿色荧光蛋白的重组非洲猪瘟病毒株及其应用。本发明构建了由p72启动子启动的Gluc与EGFP报告基因转移载体；利用同源重组，插入到ASFV MGF300‑4L基因的终止密码子之后，得到共表达Gluc与EGFP的重组非洲猪瘟病毒株；作为首个未缺失任何病毒基因的表达荧光蛋白和荧光素酶的重组ASFV，其插入的报告基因EGFP与Gluc能稳定表达，并且该报告病毒的生物学特性与亲本毒株无显著差异；与缺失病毒基因的现有重组ASFV病毒株相比，本发明构建的重组非洲猪瘟病毒株在代替亲本毒株研究病毒的感染、致病机制或用于抗病毒药物筛选时更具代表性。
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