公开(公告)号：CN102732502B

公开(公告)日：2014-07-09

申请号：CN201210180721.6

申请日：2012-06-04

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  崔红玉 ,  葛俊伟

IPC: C12N15/09 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种无选择标记残留的乳酸菌基因组修饰操作系统及其应用，属于生物技术领域。具体地，本发明提供的载体系统包括：1个温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型辅助质粒；1个用于构建温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型基因打靶主质粒的中间质粒；1个经过以上二者所构建的用于任意位点基因修饰操作的基础乳酸菌菌株。本发明所提供的无选择标记残留的快速双质粒基因打靶载体系统可以获取任意位点基因缺失或插入的转基因重组乳酸菌，所产生的转基因乳酸菌或重组基因工程乳酸菌在益生菌开发和基因工程益生菌制剂的研究和应用中具有广泛的应用前景。

公开(公告)号：CN102732502A

公开(公告)日：2012-10-17

申请号：CN201210180721.6

申请日：2012-06-04

Applicant: 东北农业大学

Inventor： 李一经 ,  崔红玉 ,  葛俊伟

IPC: C12N15/09 ,  C12N15/63 ,  C12N1/21 ,  C12R1/225

Abstract: 本发明公开了一种无选择标记残留的乳酸菌基因组修饰操作系统及其应用，属于生物技术领域。具体地，本发明提供的载体系统包括：一个温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型辅助质粒；一个用于构建温度敏感型、大肠杆菌-革兰氏阳性细菌宽宿主范围穿梭型基因打靶主质粒的中间质粒；一个经过以上二者所构建的用于任意位点基因修饰操作的基础乳酸菌菌株。本发明所提供的无选择标记残留的快速双质粒基因打靶载体系统可以获取任意位点基因缺失或插入的转基因重组乳酸菌，所产生的转基因乳酸菌或重组基因工程乳酸菌在益生菌开发和基因工程益生菌制剂的研究和应用中具有广泛的应用前景。