公开(公告)号：CN115820638B

公开(公告)日：2023-07-18

申请号：CN202211207679.2

申请日：2022-09-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  钱金涵 ,  朱亭帆 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  羊扬 ,  闫彩虹 ,  叶建强 ,  钱琨 ,  王倩倩 ,  邓建中 ,  王建 ,  郑建高 ,  金松 ,  洪枫 ,  王培永 ,  张文成 ,  卞红春

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/85 ,  A61K31/713 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA及其应用，涉及基因工程技术领域。本发明提供了一种抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制的外源性人工miRNA，是针对水禽源ARV的L2基因保守序列设计得到。经试验证实可知，所述外源性人工miRNA不仅能够抑制水禽源禽呼肠孤病毒复制及增殖，而且能够作为一种新的基因治疗手段，应用于抗水禽源禽呼肠孤病毒新型药物的研制，同时也可以用于水禽源禽呼肠孤病毒致病机制的研究以及转基因动物的制备，从而减少水禽源禽呼肠孤病毒对养禽业造成的经济损失。

公开(公告)号：CN116426489A

公开(公告)日：2023-07-14

申请号：CN202310320468.8

申请日：2023-03-27

Applicant: 扬州大学

Inventor： 蒋蕙如 ,  叶建强 ,  任丹 ,  曹旭东 ,  郭艺文 ,  李涵 ,  殷楠 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  钱琨 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/861 ,  C12N15/40 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种基于CRISPR‑Cas9技术的表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，所述新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端，其序列如SEQ ID NO.1所示。重组血清4型禽腺病毒，其中使用新型鹅星状病毒GD毒株ORF2蛋白C端替换FAdV‑4的Fiber‑2基因的253位核苷酸到1440位核苷酸，FAdV‑4的Fiber‑2基因序列如SEQ ID NO.2所示。通过本发明，利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端，成功获得表达新型鹅星状病毒ORF2蛋白C端的重组血清4型禽腺病毒，为同时免疫防控血清4型禽腺病毒和新型鹅星状病毒提供了技术支撑与二联弱毒疫苗候选。

公开(公告)号：CN116286989A

公开(公告)日：2023-06-23

申请号：CN202310132143.7

申请日：2023-02-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 邵红霞 ,  唐浩洋 ,  吉李飞 ,  秦爱建 ,  金文杰 ,  钱琨 ,  叶建强

IPC: C12N15/866 ,  C12N15/64 ,  C12N15/35

Abstract: 本发明涉及一种表达鹅细小病毒VP3蛋白的重组杆状病毒的构建方法，属于生物技术领域；包括以下步骤：（1）构建GPV‑VP3基因重组杆状病毒表达载体。（2）表达重组GPV蛋白的杆状病毒包装和传代。（3）将带有GPV‑VP3基因的重组杆状病毒质粒转染sf9，28℃培养5‑7天，待70%细胞出现病变时收集细胞裂解上清，作为第一代重组杆状病毒种毒并保存，之后进行病毒传代，传至第三代时扩大培养。本发明所述的鹅细小病毒VP3蛋白利用杆状病毒载体表达，表达量高且带有易于纯化的His标签，可以制备成GPV亚单位疫苗，也可以建立基于VP3蛋白的鹅细小病毒间接免疫荧光方法。

公开(公告)号：CN115786282A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211600743.3

申请日：2022-12-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 郭艺文 ,  邵红霞 ,  林昀 ,  叶建强 ,  谢泉 ,  张雯苑 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒的构建，构建方法包括以下步骤：设计针对血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的sgRNA；通过PCR和同源重组的方法构建携带鸭3型腺病毒Fiber‑2基因和RFP表达盒的供体质粒，其中的RFP表达盒两端分别带有LoxP位点；将生长良好的LMH细胞经胰酶消化后接种六孔板培养，第二天转染sgRNA和供体质粒各3μg，转染6h后换成细胞生长液；转染48h后感染血清4型禽腺病毒，感染2h后换成细胞维持液；感染血清4型禽腺病毒后观察RFP红色荧光，进行红色荧光重组病毒的纯化，获得带有RFP表达盒的表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒。通过本发明，为构建鸭3型腺病毒和血清4型禽腺病毒的二价疫苗提供了技术支撑。

公开(公告)号：CN110607402B

公开(公告)日：2023-01-03

申请号：CN201910961479.8

申请日：2019-10-11

Applicant: 扬州大学

Inventor： 金文杰 ,  王艳春 ,  汪怿旸 ,  宁晨 ,  钟蕾 ,  秦爱建 ,  刘金彪

IPC: C12Q1/70 ,  C12Q1/686 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及一种猪传染性胃肠炎病毒PLA检测试剂盒。所述试剂盒包括(1)两株生物素标记的抗体：抗TGEV抗体1A2、抗TGEV抗体2B1；(2)探针；(3)连接液；(4)PCR mix：Universal PCR Assay、2×Fast Master Mix。将两株生物素标记的针对猪传染性胃肠炎病毒SA蛋白的特异性单克隆抗体稀释到工作浓度、与探针孵育进行连接，最后采用实时定量PCR扩增目的单链DNA，成功检测到猪传染性胃肠炎病毒。本发明解决了现有技术时间长、工作量大、灵敏度低、非特异性、操作复杂等缺陷；具有不涉及放射性物质，试剂与样品消耗量小，灵敏度高，无需特殊设备，操作简单的优点。

公开(公告)号：CN115184604A

公开(公告)日：2022-10-14

申请号：CN202210858142.6

申请日：2022-07-20

Applicant: 扬州大学

Inventor： 王赪胤 ,  张亚文 ,  崇辉 ,  石凤 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  王天奕

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及检测技术领域内一种自驱动自传感悬臂梁传感器检测禽流感病毒H9的方法，本发明包括带有氨基官能团的纳米材料修饰的微悬臂传感器、电信号放大器、模数转化器，带有氨基官能团的纳米材料为UiO‑66‑NH2的金属有机框架，UiO‑66‑NH2的金属有机框架为UiO‑66‑NH2/AuNPs纳米材料，其制备方法为：将微悬臂传感器用UiO‑66‑NH2/AuNPs纳米材料修饰；将修饰过的微悬臂传感器与自制电路板、模数转换器、开发板连接，构成检测装置。并将装置与电脑进行连接进行信号处理；在悬臂传感器检测端滴加H9标准溶液，通过收集电信号进行分析结果，本发明快速检测、操作方便。

公开(公告)号：CN111825761B

公开(公告)日：2022-09-23

申请号：CN202010521152.1

申请日：2020-06-09

Applicant: 扬州大学

Inventor： 秦爱建 ,  刘明珠 ,  钱琨 ,  邵红霞 ,  叶建强

IPC: C07K16/08 ,  C12N5/20 ,  G01N33/535 ,  G01N33/543 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开的抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体针对的抗原表位位于猪瘟病毒E2蛋白的第1~50位氨基酸和/或第51~100位氨基酸。本发明还公开了抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体的制备方法及其应用。本发明还公开猪瘟病毒定性或定量检测试剂盒。本发明通过定向克隆猪瘟病毒兔化弱毒疫苗株的E2蛋白第1~50位氨基酸或第51‑100位氨基酸对应的基因片段，表达得到的蛋白进行免疫动物得到能分泌2株抗猪瘟病毒E2蛋白的单克隆抗体的杂交细胞瘤。本发明可以很好地检测出样本中的E2蛋白，并进一步定量，从而控制疫苗的质量。

公开(公告)号：CN111944032B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202010745120.X

申请日：2020-07-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  沈逵 ,  何倩 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C07K14/465 ,  C07K16/18 ,  A61K39/00 ,  A61P37/04 ,  G01N33/68 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种能诱导抗鸡STING蛋白抗体的多肽，其氨基酸序列为MPQDPSTRSSPARL，如SEQ ID NO.1所示。本发明制备的抗体能够与转染STING的293T细胞反应，还可以与天然家禽细胞中的STING蛋白发生特异性反应，该抗体不仅可以用于间接免疫荧光检测STING蛋白，还可以用于免疫蛋白印迹实验中STING蛋白的检测。该发明经济快速，方便，适用于相关研究中快速制备抗体工具。

公开(公告)号：CN113354717A

公开(公告)日：2021-09-07

申请号：CN202110631147.0

申请日：2021-06-07

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李拓凡 ,  阚秋琪 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  邵红霞 ,  谢泉

IPC: C07K14/165 ,  C07K19/00 ,  C12N15/50 ,  C12N15/70 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原及其特异性中和抗体和应用，属于病毒免疫检测技术领域。一种新冠病毒SARS‑CoV‑2广谱多肽抗原，氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示，与SARS‑CoV‑2人阳性血清的反应，能够特异性与新冠病毒抗体结合。基于本发明的多肽序列，利用PCR、原核表达及蛋白纯化技术，制备了三重SARS‑CoV‑2广谱多肽串联融合蛋白，模拟SARS‑CoV‑2S蛋白自然状态下三聚体模式，以该融合蛋白作为抗原免疫小鼠，可以产生抗SARS‑CoV‑2特异性中和抗体，所述中和抗体在SARS‑CoV‑2抗感染治疗、疫苗研发和检测试剂盒研制中将具有良好的应用前景。

公开(公告)号：CN112877303A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110332462.3

申请日：2021-03-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  曹诗雅 ,  谢泉 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/861 ,  C12N15/113 ,  C12N15/12 ,  C12N15/62 ,  C12N15/90 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种EGFP与Fiber‑2融合表达的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，本发明的原理和最核心的关键技术是选择合适插入位点以及sgRNA。插入RFP后进行病毒的纯化，获得可以稳定扩增的重组禽腺病毒。利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体插入外源基因RFP，成功获得了表达RFP的重组FAdV‑4病毒，由此可见，RFP的插入位置可以作为插入其他病原的保护性抗原插入位点，为构建FAdV‑4重组多价苗提供了夯实的理论基础。