公开(公告)号：CN115786282A

公开(公告)日：2023-03-14

申请号：CN202211600743.3

申请日：2022-12-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 郭艺文 ,  邵红霞 ,  林昀 ,  叶建强 ,  谢泉 ,  张雯苑 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N15/34 ,  C12N15/861 ,  C12N15/65 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒的构建，构建方法包括以下步骤：设计针对血清4型禽腺病毒Fiber‑2基因的sgRNA；通过PCR和同源重组的方法构建携带鸭3型腺病毒Fiber‑2基因和RFP表达盒的供体质粒，其中的RFP表达盒两端分别带有LoxP位点；将生长良好的LMH细胞经胰酶消化后接种六孔板培养，第二天转染sgRNA和供体质粒各3μg，转染6h后换成细胞生长液；转染48h后感染血清4型禽腺病毒，感染2h后换成细胞维持液；感染血清4型禽腺病毒后观察RFP红色荧光，进行红色荧光重组病毒的纯化，获得带有RFP表达盒的表达鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的重组血清4型禽腺病毒。通过本发明，为构建鸭3型腺病毒和血清4型禽腺病毒的二价疫苗提供了技术支撑。

公开(公告)号：CN116359496A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202211601049.3

申请日：2022-12-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  林昀 ,  张雯苑 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  李拓凡 ,  谢泉 ,  钱琨 ,  金文杰

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/535 ,  G01N33/58 ,  C12N15/70 ,  C12N15/34 ,  C07K16/08 ,  C12N5/20

Abstract: 一种基于Fiber‑2蛋白检测鸭3型腺病毒的双抗体夹心ELISA，包括:1)包被抗体：鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的单克隆抗体，即捕获抗原的抗体；2)酶标二抗：酶标的鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的单克隆抗体，即检测抗体；其中，包被抗体与酶标二抗是针对鸭3型腺病毒Fiber‑2蛋白的同一株单克隆抗体，由杂交瘤细胞株DAdV‑3‑Fiber‑2‑3D9分泌获得。通过本发明，建立的鸭3型腺病毒夹心ELISA检测方法快速、稳定、特异性高，使用本发明只需采集泄殖腔分泌物或其它含有鸭3型腺病毒的样品，即可快速准确地检测样品中是否含有鸭3型腺病毒。本发明适合应用于鸭群是否感染鸭3型腺病毒的大批量检测。

公开(公告)号：CN114703147A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210405848.7

申请日：2022-04-18

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  阚秋琪 ,  李拓凡 ,  秦爱建 ,  万志敏 ,  邵红霞 ,  谢泉 ,  张雯苑

IPC: C12N5/20 ,  C07K16/10 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577 ,  A61K39/42 ,  A61P31/14

Abstract: 本发明提供了一种抗SARS‑CoV‑2广谱中和性单克隆抗体及其杂交瘤细胞株、检测试剂盒和应用，属于病毒检测技术领域。本发明筛选得到一株杂交瘤细胞株CoV2‑S2‑G5，分泌具有抗SARS‑CoV‑2广谱中和特性的单克隆抗体G5。所述单克隆抗体G5能有效中和SARS‑CoV‑2野生株以及多种突变毒株(包括奥密克戎突变株、德尔塔突变株和南非突变株)，为预防或治疗由新冠病毒感染引起的疾病的药物制剂、诊断新冠肺炎以及新冠病毒疫苗筛选提供了有效工具，具有极大的应用前景。