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公开(公告)号：CN102994611A
公开(公告)日：2013-03-27
申请号：CN201210497118.0
申请日：2012-11-28
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种高通量乙型脑炎病毒解旋酶抑制剂的药物筛选模型的建立方法，步骤：1、解旋酶蛋白的表达与纯化：人工合成乙型脑炎病毒NS3基因，用NcoI和XhoI分别酶切解旋酶片段与大肠杆菌原核表达载体过夜连接，得一种解旋酶蛋白，其序列为SEQIDNO.1所示，收集表达蛋白的上清，用Ni2+亲和层析法纯化解旋酶蛋白，用BCA法测定蛋白浓度；2、解旋酶DNA底物的设计；3、在黑色96孔中加入解旋酶蛋白3uM、待筛化合物以及反应缓冲液，混合孵育，在荧光检测仪中检测体系中的荧光强度，不加入底物的对照组；4、计算化合物抑制率。方法简单易行，灵敏度高，成本低，样品少，对解旋酶反应的过程进行监测，对今后的乙型脑炎病毒药物的开发具有极大意义。
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公开(公告)号：CN102732473A
公开(公告)日：2012-10-17
申请号：CN201110087938.8
申请日：2011-04-08
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前动物生物制品有限责任公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/74 , C12N15/31 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/02 , A61P31/04 , C12R1/42 , C12R1/35
Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程技术领域，具体涉及一种不含抗性标记表达猪肺炎支原体主要免疫原性膜蛋白的重组猪霍乱沙门氏菌的构建、疫苗制备及应用。本发明得到一株不含抗性标记表达猪肺炎支原体p46蛋白的猪霍乱沙门氏菌C500(pYA-46)，其保藏号为CCTCC NO：M2011106，该重组株缺失了猪霍乱沙门氏菌生长所必需的asd基因，含有能在该重组株中表达asd基因和猪肺炎支原体p46蛋白的质粒。本发明还公开了该重组株制备猪霍乱沙门氏菌和猪支原体肺炎疫苗的方法及其应用。本发明制备的二价疫苗可刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪肺炎支原体的免疫反应，有效防止猪霍乱沙门氏菌和猪肺炎支原体的感染。
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公开(公告)号：CN102649948A
公开(公告)日：2012-08-29
申请号：CN201110043444.X
申请日：2011-02-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/01 , A61K39/265 , A61P31/20 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物传染病基因工程技术领域。具体涉及一种牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗及制备方法。该毒株保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏号为CCTCCNO：V201104。所述的重组牛传染性鼻气管炎病毒毒株缺失了TK和gE基因，插入了EGFP表达盒。制备的牛传染性鼻气管炎ΔTK/ΔgE基因缺失标志活疫苗毒力大大降低，潜伏的病毒也不易被激活，具有很高的安全性。此外，除了被缺失的TK和gE基因，该缺失毒株仍能表达其他所有毒力基因，具有很好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN101818130B
公开(公告)日：2012-07-25
申请号：CN200910273357.6
申请日：2009-12-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N7/00 , A61K39/265 , A61P31/20 , C12N7/01 , C12R1/93
Abstract: 本发明属于动物病毒学和动物基因工程技术领域，具体涉及一种gG和TK基因缺失的重组牛传染性鼻气管炎病毒、基因工程疫苗及应用。本发明制备的重组牛传染性鼻气管炎病毒毒株IBRVΔgG/ΔTK保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：V200915，该毒株缺失了gG、TK基因，不含外源基因。本发明的中间毒株即重组牛传染性鼻气管炎病毒GAZH-2009-01，保藏在中国典型培养物保藏中心，其保藏编号为CCTCC NO：V200910，该毒株缺失了gG、TK基因并含有报告基因EGFP。本发明还公开了重组牛传染性鼻气管炎病毒IBRVΔgG/ΔTK在牛传染性鼻气管炎的基因工程疫苗的制备上应用和防治牛传染性鼻气管炎病毒病上的应用。
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公开(公告)号：CN102559531A
公开(公告)日：2012-07-11
申请号：CN201010596059.3
申请日：2010-12-15
Applicant: 武汉科前动物生物制品有限责任公司 , 华中农业大学
Abstract: 本发明属于农业微生物技术领域，具体涉及一种适用于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵培养基，其包括下列组分：按照重量/体积计，谷氨酸钠1～10g/L，酵母粉5～50g/L，氯化钠1～10g/L，无水磷酸二氢钾0.063～2.502g/L，三水磷酸氢二钾0.351～14.044g/L；按体积比计牛血清5～40％，烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)1～10‰，余量是水。本发明有利于副猪嗜血杆菌5型的高密度发酵，菌体生长速度快，能获得较高菌量，培养后的副猪嗜血杆菌5型活菌数可达到50亿。本发明的培养基材料来源广泛，成本低廉，可有效扩增副猪嗜血杆菌5型，能满足大规模疫苗生产的需要。
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公开(公告)号：CN101979501B
公开(公告)日：2012-05-23
申请号：CN201010286731.9
申请日：2010-09-17
Applicant: 华中农业大学 , 武汉科前动物生物制品有限责任公司
IPC: C12N1/21 , C12N15/31 , C12N15/74 , A61K39/116 , A61K39/112 , A61K39/09 , A61P31/04 , C12R1/42
Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域，具体涉及一种不含抗性标记的表达猪链球菌2型表面抗原sao基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌株的构建、疫苗制备及应用。获得一株无抗性标记的表达猪链球菌2型sao基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌asd-C500/Pya-saoA，其保藏号为CCTCC NO：M2010156。该重组菌缺失了猪霍乱沙门氏菌的asd基因，含有能在该菌株中表达asd和猪链球菌2型sao基因片段的质粒pYA-saoA。本发明还公开了该重组菌株与疫苗的制备方法以及在制备猪霍乱沙门氏菌-猪链球菌2型疫苗中的应用。
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公开(公告)号：CN101624580B
公开(公告)日：2011-11-23
申请号：CN200910063217.6
申请日：2009-07-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明涉及病毒学领域。具体涉及一种人工修饰合成的含有甲型H1N1流感病毒主要免疫原性基因HA-NA-M1的重组杆状病毒，该毒株QP-Ac-HNM1属于杆状病毒(Baculovirus)，保藏在中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，保藏号为CCTCC-V200912。该重组病毒可以同时表达甲型H1N1流感病毒HA、NA和M1蛋白，形成病毒样颗粒。该病毒样颗粒可以用来研制成疫苗，预防人和猪感染甲型H1N1流感病毒。
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公开(公告)号：CN102212622A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110122089.5
申请日：2011-05-12
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 一种用于快速诊断牛副流感病毒3型的RT-PCR检测方法及其试剂盒，本发明属于生物医学检测领域，本发明的具体技术方案，包括样品的采集，病毒RNA的提取，特异性引物的设计优化，RT-PCR扩增，琼脂糖凝胶电泳和结果判定；所述特异性引物是针对牛副流感病毒3型核蛋白基因(NP)的特异性区段设计的，其上下游序列分别为：P1：5’-GGATGTTTGGGAGTGATCTTGAGTA-3’；P2：5’-TGTGTTGAAAAATGAAGCAAGACCT-3’；所述的检测牛副流感病毒3型的RT-PCR快速诊断试剂盒包括：样品病毒RNA提取试剂，反转录试剂，PCR试剂，阳性对照品和阴性对照品；证实该方法灵敏、特异，具有应用前景。
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公开(公告)号：CN101265457B
公开(公告)日：2011-01-26
申请号：CN200710052792.7
申请日：2007-07-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域，具体涉及一种区分疫苗免疫和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型双基因缺失突变株的构建、疫苗及应用。本发明得到一株区分疫苗免疫动物和野毒感染动物的猪胸膜肺炎放线杆菌血清7型基因缺失突变株APP-7-mut01(保藏号为CCTCC NO：M207004)。该株缺失APP血清7型两个主要的毒力因子apxIIC和apxIVAN基因。突变株对猪安全，且具良好免疫原性的毒素ApxIIA和ApxIVAC蛋白，保证了疫苗的免疫效力。用突变株的疫苗免疫动物，动物体内不再产生针对Apx IVAN蛋白抗体，而野毒猪感染的产生针对ApxIVAN蛋白抗体。本发明还公开了利用该双基因缺失突变株构建，疫苗制备及应用。
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公开(公告)号：CN101025420B
公开(公告)日：2010-11-17
申请号：CN200510019512.3
申请日：2005-09-29
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/569 , G01N33/544
Abstract: 本发明公开了一种用于快速检测禽流感病毒的乳胶凝集试剂盒。利用水溶性碳化二亚胺将兔抗禽流感病毒核蛋白IgG偶联到羧化聚苯乙烯胶乳颗粒的表面，建立了禽流感病毒乳胶凝集检测方法，再辅以其它配套试剂制备了禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒。禽流感病毒乳胶凝集检测试剂盒由盒体和设在盒体内的乳胶诊断试剂、样本处理液A，样本处理液B，阳性对照样品和阴性对照样品组成。所述的试剂盒能够直接对禽流感病毒进行检测，具有特异性强、灵敏度高、操作简便和诊断快速的显著优点。
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