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公开(公告)号：CN118126171A
公开(公告)日：2024-06-04
申请号：CN202410301514.4
申请日：2024-03-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N15/85 , G01N33/569
Abstract: 本发明介绍了一项关于制备和应用抗FaeG蛋白的鼠单克隆抗体的技术方法。该研究针对产肠毒素大肠杆菌（ETEC）中的F4型菌毛蛋白，特别是F4ac亚型的FaeG蛋白，通过小鼠以甲醛灭活ETEC为免疫原免疫、抗原特异的记忆B细胞的分选和抗体的表达、纯化及评估等步骤，最终制备出具有高亲和力和阻遏ETEC粘附能力的抗FaeG鼠单克隆抗体。采用流式细胞仪在分选抗原特异的记忆B细胞过程中发挥了关键作用，同时结合间接ELISA检测方法和间接免疫荧光验证方法对抗体的特异性和效价进行了评估。最终，通过测序和结构分析确认了所得单克隆抗体的可变区序列结构。本发明有望为治疗和控制E.coli相关疾病提供新的研究思路和药物候选物。
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公开(公告)号：CN106434734B
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201610436290.3
申请日：2016-06-17
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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公开(公告)号：CN103421876A
公开(公告)日：2013-12-04
申请号：CN201310232455.1
申请日：2013-06-09
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于兽医微生物学和兽药学技术领域。具体涉及一种抗菌化合物高通量筛选方法及应用。以对6种抗生素有抗性的胸膜肺炎放线杆菌分离株HB0503作为靶标菌，以四环素为阳性对照，利用不透明的96孔板为筛选载体，用化学发光法测定活细菌数，鉴定化合物的抗菌效果。根据高通量筛选方法质量判定标准，分别计算了细菌比浊法、化学发光法，确定化学发光法为优选方案，鉴定出八种化合物对胸膜肺炎放线杆菌耐药菌株具有抑制活性，其中四种化合物对副猪嗜血杆菌、大肠杆菌、猪链球菌2型和金黄色葡萄球菌也具有较好的抑菌活性。
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公开(公告)号：CN110464715A
公开(公告)日：2019-11-19
申请号：CN201910529745.X
申请日：2019-06-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K31/122 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于动物病毒防制技术领域，具体涉及一种小分子化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用。本发明包括一种抗寨卡病毒的药物靶标的筛选，该药物靶标是一种小分子化合物，该小分子化合物可在制备抗寨卡病毒的药物中应用。其中的应用包括在制备抗寨卡病毒蛋白酶抑制剂中的应用。本发明提供的小分子化合物，可抑制寨卡病毒编码的NS3蛋白酶的活性，对病毒的增殖具有很好的抑制作用，且该化合物对攻寨卡病毒小鼠有一定的保护率，能够显著改善攻毒小鼠组织的病理症状，可应用于制备动物抗寨卡病毒药物的开发。
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公开(公告)号：CN106434734A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610436290.3
申请日：2016-06-17
Applicant: 华中农业大学
CPC classification number: C12N15/81 , C12N15/66 , C12N2800/102
Abstract: 本发明公开了一种用于酵母双杂交的相关重组载体及其利用高通量测序技术大规模筛选互作蛋白的酵母双杂交的方法，该方法依赖于一种整合酶Integrase phiC31(En)的特有整合功能，通过对传统酵母双杂交载体的改造，使其与高通量测序技术有机结合，实现成百上千的Bait蛋白同时对Prey蛋白文库的筛选工作。将整合酶及其特异识别的核苷酸序列插入Matchmaker GAL4系统的载体中，通过酵母双杂交的方法使重组载体进入同一个酵母细胞，整合酶发生作用，将其特异识别的核苷酸序列及其紧邻的核苷酸序列进行特异性定向重排，从而使得两个重组载体融合成一个融合载体，此时猎物和诱饵蛋白序列被定向连接成融合载体上的一段新的序列，通过扩增、高通量测序，从而经济高效地筛选相互作用蛋白质并构建全面的蛋白互作网络图谱。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN100354414C
公开(公告)日：2007-12-12
申请号：CN200510019513.8
申请日：2005-09-29
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种重组的伪狂犬病毒Pseudorabies virus，PrV)基因工程株WKQ-001，保藏号为CCTCC-V200511的构建以及利用该毒株制备的伪狂犬病毒基因缺失标志灭活疫苗。本发明的毒株缺失了PrV的糖蛋白基因gI、gE，因而可以作为标志基因，用于鉴别和诊断人工免疫猪及自然感染猪。本发明还涉及重组伪狂犬病毒株和基因缺失灭活疫苗的应用。与国外同类疫苗相比，其针对性更强，更加适合我国伪狂犬病的流行猪群；本发明的毒株来源于感染的猪，其灭活疫苗的安全性和保护性更适合于猪伪狂犬病的预防。同时本发明的基因工程株不含任何外源基因，因而具有更高的生物安全性。
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公开(公告)号：CN117838847A
公开(公告)日：2024-04-09
申请号：CN202311572290.2
申请日：2023-11-23
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种预防寨卡病毒感染的方法。具体地，该方法主要涉及一种与寨卡病毒同种属的乙型脑炎疫苗株SA14‑14‑2。本发明已经成功证实了已获批使用的乙型脑炎减毒活疫苗株SA14‑14‑2能对寨卡病毒产生同源干扰，乙型脑炎病毒和寨卡病毒同时感染及先感染乙型脑炎病毒后感染寨卡病毒的情况下，乙型脑炎病毒均能显著抑制寨卡病毒复制增殖。提前免疫乙型脑炎疫苗SA14‑14‑2对寨卡病毒攻毒小鼠起到一定的保护作用。表达该乙型脑炎疫苗所编码的NS2B蛋白，尤其是其发挥蛋白酶辅因子作用的膜外亲水区第46‑60位氨基酸位对寨卡病毒增殖具有良好的抑制作用。通过免疫乙型脑炎疫苗SA14‑14‑2及其NS2B蛋白来预防寨卡病毒感染具有优良的应用前景。
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公开(公告)号：CN117363695A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311385550.5
申请日：2023-10-25
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/6818 , G01N21/64 , C12Q1/34
Abstract: 本发明是一种口蹄疫病毒2C解旋酶抑制剂的荧光偏振高通量筛选方法。该方法通过体外检测荧光能量共振转移(FRET)信号变化来筛选抑制剂分子，以含有荧光基团HEX和猝灭基团BHQ1的ssDNA退火产物作2C的底物，通过调节金属离子种类及蛋白、底物、ATP、Mg2+和捕获链浓度，利用多功能酶标仪检测发光荧光值，建立最优2C解旋dsDNA试验方案，通过加入小分子化合物检测2C对dsDNA解旋荧光值差异，计算化合物库对2C解旋酶的抑制率，筛选出抑制率较高的化合物。本发明检测快、易操作、灵敏高且具有高通量效果，将有效筛选口蹄疫病毒药物的先导化合物提供方法。
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公开(公告)号：CN110464715B
公开(公告)日：2021-09-21
申请号：CN201910529745.X
申请日：2019-06-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: A61K31/122 , A61P31/14
Abstract: 本发明属于动物病毒防制技术领域，具体涉及一种小分子化合物在制备抗寨卡病毒药物中的应用。本发明包括一种抗寨卡病毒的药物靶标的筛选，该药物靶标是一种小分子化合物，该小分子化合物可在制备抗寨卡病毒的药物中应用。其中的应用包括在制备抗寨卡病毒蛋白酶抑制剂中的应用。本发明提供的小分子化合物，可抑制寨卡病毒编码的NS3蛋白酶的活性，对病毒的增殖具有很好的抑制作用，且该化合物对攻寨卡病毒小鼠有一定的保护率，能够显著改善攻毒小鼠组织的病理症状，可应用于制备动物抗寨卡病毒药物的开发。
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公开(公告)号：CN106939046B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201710011901.4
申请日：2017-01-08
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物传染病防治技术领域，具体涉及一种乙型脑炎病毒的保护性单克隆抗体及其抗原位点的应用。制备得到一种由保藏编号为CCTCC NO：C201699的JEV NS1杂交瘤细胞株2B8分泌的对乙型脑炎病毒NS1蛋白的保护性单克隆抗体。所述的单克隆抗体能识别NS1蛋白中的225位WPETHTLWGD234位的氨基酸片段，该片段的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示。本发明还公开了一种对乙型脑炎病毒NS1蛋白具有保护作用的多肽，该多肽的氨基酸序列为WPETHTLWGD。生物功能验证表明本发明的单克隆抗体可在制备治疗和预防乙型脑炎病毒疫苗中的应用。
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