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公开(公告)号：CN101475915A
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200910045394.1
申请日：2009-01-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将碱性甘露聚糖酶基因的突变体MAN330克隆到分泌表达载体pUKDS上，并转化鹰嘴豆胞克鲁维酵母Y179U，形成分泌表达碱性甘露聚糖酶的鹰嘴豆胞克鲁维酵母基因工程菌株。该酵母基因工程菌株在80世代内保持稳定。发酵时，取上述酵母基因工程菌株在常温常压下发酵，然后去除菌体即可。用本发明提供的方法制备获得的碱性甘露聚糖酶，活性可达1000U/ml以上，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至工业化生产。
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公开(公告)号：CN101392266A
公开(公告)日：2009-03-25
申请号：CN200810200060.2
申请日：2008-09-18
Applicant: 复旦大学 , 武汉新华扬生物有限责任公司
Abstract: 本发明提供了一种编码高温强碱下具有高活性的木聚糖酶的改良基因、其重组质粒、含有该基因的重组酵母基因工程菌株及其制备方法。改良后的木聚糖酶和原始木聚糖酶相比，由原始木聚糖酶氨基酸序列的201位的甘氨酸突变为半胱氨酸。改良木聚糖酶较原始木聚糖酶具有更高的热稳定性，在75℃处理10分钟后，改良木聚糖酶的残余活性达到了80％，而原始木聚糖酶只有15％。改良木聚糖酶在高温强碱的环境下的活性是原木聚糖酶活性的1.5－2倍，并能在高温下长时间分解木聚糖。本发明还提供了含有该改良基因的重组毕赤氏酵母基因工程菌株。本发明的改良木聚糖酶可以广泛应用于造纸，饲料以及食品工业。
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公开(公告)号：CN119799526A
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202411775887.1
申请日：2024-12-05
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体为一种同步糖化发酵淀粉合成肌醇的马克斯克鲁维酵母工程菌及其应用。本发明的马克斯克鲁维酵母工程菌，是通过依次敲除马克斯克鲁维酵母FIM1Δura3菌株的葡萄糖‑6‑磷酸异构酶PGI基因、葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶ZWF1基因、肌醇加氧酶MIOX5基因以及肌醇转运蛋白ITR2基因，然后转入同时表达布氏锥虫肌醇磷酸合酶TbIPS基因、大肠杆菌肌醇单磷酸酶EcIMP基因和腺嘌呤酵母的糖化酶BadGLA的载体pUKDN115‑Ptef‑TbIPS‑Ttef‑Pgap‑EcIMP‑Tgap‑Pinu‑αBadGLA‑Tinu所获得。以该马克斯克鲁维酵母工程菌株为发酵菌株，以淀粉为原料，经同步糖化发酵产生肌醇，上清中肌醇产量可达到45.5g/L。
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公开(公告)号：CN116515656A
公开(公告)日：2023-08-01
申请号：CN202310199634.3
申请日：2023-03-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种高效表达生物酶的马克斯克鲁维酵母菌株及其应用。本发明的马克斯克鲁维酵母菌株，是以敲除了尿嘧啶合成途径关键基因URA3的马克斯克鲁维酵母FIM‑1作为出发菌株，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，敲除马克斯克鲁维酵母基因组中蛋白质合成代谢途径、分泌转运途径、细胞骨架合成或细胞间信息传递途径中的基因而获得的基因缺失突变菌株；并筛选获得FIM‑1ura3Δmnn11Δ，可提高α‑半乳糖苷酶分泌表达水平3倍以上。本发明提供的马克斯克鲁维酵母菌株可应用于α‑半乳糖苷酶、阿魏酸酯酶、壳聚糖酶、糖化酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶和β‑淀粉酶等生物酶的高效制备，具有较高的工业应用价值。
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公开(公告)号：CN111592990B
公开(公告)日：2021-05-11
申请号：CN202010212115.2
申请日：2020-03-24
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一株可用于制备阿魏酸酯酶AnfaeA的马克斯克鲁维酵母重组菌株，其通过将序列优化后的黑曲霉阿魏酸酯酶AnfaeA基因克隆到表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建所得，该重组菌株经高密度发酵阿魏酸酯酶的产量达12,0000U/ml。本发明还提供了一种利用阿魏酸酯酶水解玉米芯粉制备阿魏酸的方法，利用前述重组菌株制得的阿魏酸酯酶AnfaeA和木聚糖酶的协同作用，可高效水解玉米芯粉获得阿魏酸。本发明提供的阿魏酸酯酶可应用农业副产物玉米芯、米糠和玉米皮等生物降解制备阿魏酸、p‑香豆酸等酚类物质，因此在食品、造纸、饲料、医药等领域都具有广泛的应用价值，同时，制备方法工艺简单、产量高，十分适合于大规模生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111587964A
公开(公告)日：2020-08-28
申请号：CN202010211929.4
申请日：2020-03-24
Applicant: 复旦大学 , 武汉新华扬生物股份有限公司
IPC: A23K50/75 , A23K20/163 , A23K20/189 , A23K10/30
Abstract: 本发明提供了一种阿魏酸酯酶制剂，该酶制剂是以阿魏酸酯酶马克斯克鲁维酵母重组菌株，通过高密度发酵获得液体酶，然后加入玉米淀粉、玉米芯粉或麦芽糊精载体进行喷雾干燥制得。本发明提供的阿魏酸酯酶复合酶制剂能够显著提高饲料的利用率，提高蛋白、淀粉以及非淀粉多糖(NSP)的消化率。本发明还提供了一种含阿魏酸酯酶的蛋鸡复合饲料，该复合饲料可以提高蛋鸡的产蛋率，降低蛋鸡的料蛋比。
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公开(公告)号：CN106399138B
公开(公告)日：2019-11-12
申请号：CN201610807435.6
申请日：2016-09-07
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供一种马克斯克鲁维酵母重组工程菌及其在生产口服猪圆环病毒II型病毒样颗粒疫苗中的应用，该重组工程菌是通过马克斯克鲁维酵母表达载体表达猪圆环病毒II型衣壳蛋白，制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗。本发明提供的马克斯克鲁维酵母重组表达载体的调控元件均来源于食品安全级的克鲁维酵母，具有无抗生素抗性基因和大肠杆菌序列特征。本发明还提供一种制备猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗的方法，利用本发明提供的猪圆环病毒II型病毒样颗粒口服疫苗，能够减少和预防感染PCV2所引起相关性临床症状，具有免疫效果好、安全性高、培养操作简单，产量高、生产成本低以及可大规模放大生产等优点。
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公开(公告)号：CN109187774A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201810713760.5
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明的目的在于提供一种操作简单、灵敏度高、重复性和适用性高的PCV2病毒样颗粒检测方法，该方法包括如下步骤：步骤S1，稀释待测样品并进行过滤澄清或离心澄清；步骤S2，取蛋白含量已被确定的猪圆环病毒2型病毒样颗粒标准品进行系列稀释，并对稀释后的系列标准品进行HPLC检测，建立以浓度为横坐标、峰高为纵坐标的回归方程；步骤S3，对稀释后的待测样品进行HPLC检测得到对应的样品峰高；步骤S4，根据回归方程及样品峰高计算得到待测样品中的猪圆环病毒2型病毒样颗粒浓度，其中，步骤S2及步骤S3中的HPLC所采用的色谱柱为凝胶色谱柱，采用的检测器为紫外检测器，其检测波长为280nm。
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公开(公告)号：CN108611327A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810712312.3
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题，本发明提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，包括如下步骤：步骤S1，收集重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对细胞裂解液进行澄清获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对病毒样颗粒初提液进行离子交换层析获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。
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公开(公告)号：CN108118006A
公开(公告)日：2018-06-05
申请号：CN201611071966.X
申请日：2016-11-29
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属生物工程领域，涉及一种重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株及其应用。本发明中将耐温木聚糖酶基因克隆到分泌表达载体上，并转化马克斯克鲁维酵母菌，构建获得重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株；利用该菌株进一步制备耐温木聚糖酶，发酵罐发酵72小时，木聚糖酶酶活达到15万U/ml；本发明提供的重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌用于制备耐温木聚糖酶，具有产酶量高、发酵周期短、成本低和安全性高的特点，耐温木聚糖酶可应用于食品、饲料添加、化工、纺织等领域。
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