公开(公告)号：CN120005960A

公开(公告)日：2025-05-16

申请号：CN202510120519.1

申请日：2025-01-25

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  周峻岗 ,  周诗昊 ,  莫文娟

IPC: C12P21/00 ,  C07K16/28 ,  C12N9/18 ,  C12N1/19 ,  C12N15/60 ,  C12N15/54 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体一种利用马克斯克鲁维酵母制备含类似哺乳动物细胞N‑聚糖修饰结构的糖蛋白的方法。本发明以马克斯克鲁维酵母FIM1作为出发菌株，利用基因组编辑技术删除马克斯克鲁维酵母FIM1基因组上的基因URA3后作为宿主菌株，重组表达N‑聚糖糖蛋白；并进一步在基因MNN1的上游5’‑UTR上插入AT序列，以弱化MNN1的表达，提高类似哺乳动物细胞N‑聚糖糖链结构的合成。所制备的糖蛋白的N‑聚糖的糖链具有类似哺乳动物细胞N‑聚糖的糖链结构，存在杂合型、复合型的糖链，在糖链上可同时存在唾液酸、岩藻糖。本发明可以广泛制备与哺乳动物细胞类似的N‑聚糖的糖蛋白。

公开(公告)号：CN116515656A

公开(公告)日：2023-08-01

申请号：CN202310199634.3

申请日：2023-03-04

Applicant: 复旦大学

Inventor： 吕红 ,  周峻岗 ,  周诗昊

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/31 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于生物技术领域，具体为一种高效表达生物酶的马克斯克鲁维酵母菌株及其应用。本发明的马克斯克鲁维酵母菌株，是以敲除了尿嘧啶合成途径关键基因URA3的马克斯克鲁维酵母FIM‑1作为出发菌株，利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，敲除马克斯克鲁维酵母基因组中蛋白质合成代谢途径、分泌转运途径、细胞骨架合成或细胞间信息传递途径中的基因而获得的基因缺失突变菌株；并筛选获得FIM‑1ura3Δmnn11Δ，可提高α‑半乳糖苷酶分泌表达水平3倍以上。本发明提供的马克斯克鲁维酵母菌株可应用于α‑半乳糖苷酶、阿魏酸酯酶、壳聚糖酶、糖化酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶、纤维素酶和β‑淀粉酶等生物酶的高效制备，具有较高的工业应用价值。