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公开(公告)号：CN101781670A
公开(公告)日：2010-07-21
申请号：CN200910045395.6
申请日：2009-01-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域，是利用含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆孢克鲁维酵母基因工程菌高效制备外源蛋白的发酵工艺。发酵时，取上述基因工程菌株发酵2-6天，然后去除菌体，即得；发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6，在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1％；在发酵过程的12h-18h连续补加12％酵母粉，补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5％(质量体积比)；发酵过程中调节发酵液pH值为5.0-5.5。用本发明方法可以大规模制备外源蛋白，蛋白活性高，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN101475915A
公开(公告)日：2009-07-08
申请号：CN200910045394.1
申请日：2009-01-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将碱性甘露聚糖酶基因的突变体MAN330克隆到分泌表达载体pUKDS上，并转化鹰嘴豆胞克鲁维酵母Y179U，形成分泌表达碱性甘露聚糖酶的鹰嘴豆胞克鲁维酵母基因工程菌株。该酵母基因工程菌株在80世代内保持稳定。发酵时，取上述酵母基因工程菌株在常温常压下发酵，然后去除菌体即可。用本发明提供的方法制备获得的碱性甘露聚糖酶，活性可达1000U/ml以上，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至工业化生产。
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公开(公告)号：CN101781670B
公开(公告)日：2012-09-05
申请号：CN200910045395.6
申请日：2009-01-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域，是利用含有外源蛋白编码序列的鹰嘴豆孢克鲁维酵母基因工程菌高效制备外源蛋白的发酵工艺。发酵时，取上述基因工程菌株发酵2-6天，然后去除菌体，即得；发酵液初始菌浓度OD值为0.4-0.6，在发酵过程中维持葡萄糖浓度为0.5-1％；在发酵过程的12h-18h连续补加12％酵母粉，补加酵母粉的总量为发酵体积的3-5％(质量体积比)；发酵过程中调节发酵液pH值为5.0-5.5。用本发明方法可以大规模制备外源蛋白，蛋白活性高，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN101475915B
公开(公告)日：2011-06-08
申请号：CN200910045394.1
申请日：2009-01-15
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于遗传工程和发酵工程领域。本发明将碱性甘露聚糖酶基因的突变体MAN330克隆到分泌表达载体pUKDS上，并转化鹰嘴豆胞克鲁维酵母Y179U，形成分泌表达碱性甘露聚糖酶的鹰嘴豆胞克鲁维酵母基因工程菌株。该酵母基因工程菌株在80世代内保持稳定。发酵时，取上述酵母基因工程菌株在常温常压下发酵，然后去除菌体即可。用本发明提供的方法制备获得的碱性甘露聚糖酶，活性可达1000U/ml以上，发酵产量高，发酵周期短，发酵成本低，适用于推广至工业化生产。
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