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公开(公告)号:CN117264791A
公开(公告)日:2023-12-22
申请号:CN202310264215.3
申请日:2023-03-19
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/81 , C12N9/88 , C07K14/08 , C07K14/01 , C12N9/18 , C07K14/47 , C07K14/805 , C12N9/34 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体为一种高效重组表达外源蛋白的马克斯克鲁维酵母工程菌株及其应用。本发明提供的马克斯克鲁维酵母工程菌株,是以马克斯克鲁维酵母FIM1作为出发菌株,在FIM1的染色体上添加16个loxPsym位点,通过Cre重组酶处理,然后在46℃高温压力下进行筛选获得突变菌株,记为FDHY23;该突变菌株至少携带腺苷酸环化酶基因的突变。该突变菌株FDHY23可重组表达不同外源蛋白,表达水平提高了1.6~5.5倍,在高温下依然具有表达外源蛋白的能力。
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公开(公告)号:CN114058524A
公开(公告)日:2022-02-18
申请号:CN202111261154.2
申请日:2021-10-28
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N7/04 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域,具体为一种法氏囊亚病毒颗粒疫苗及其制备方法。本发明针对鸡传染性法氏囊病毒变异株,采用马克斯克鲁维酵母重组表达法氏囊亚病毒样颗粒的工程菌株,制备得到有效的法氏囊亚病毒样颗粒疫苗。本发明首先提供重组表达病毒亚病毒样颗粒的马克斯克鲁维酵母工程菌株;该重组菌株是将重组表达法氏囊病毒衣壳蛋白载体转化马克斯克鲁维酵母KM‑YDQ1所获得;法氏囊病毒亚病毒样颗粒疫苗以马克斯克鲁维酵母重组工程菌株经培养发酵、分离纯化获得的法氏囊亚病毒样颗粒作为活性成分。雏鸡免疫法氏囊亚病毒颗粒疫苗,对法氏囊病毒变异株FJ‑18株及经典强毒株BC6/85的保护效力均达到100%。
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公开(公告)号:CN112251311A
公开(公告)日:2021-01-22
申请号:CN202010979266.0
申请日:2020-09-17
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于酿酒技术领域,具体为一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法。本发明采用马克斯克鲁维酵母Fim‑1作为发酵菌种;具体步骤包括:取果汁,调节果汁糖度为13‑16°Bx;加入20‑100ppm的焦亚硫酸钾,搅拌溶解;接入马克斯克鲁维酵母Fim‑1菌种,进行果汁的液态发酵;发酵液过滤澄清,然后充二氧化碳,罐装;巴氏杀菌,得到果西打酒产品。所述水果包括苹果、梨、桃子、李子、木瓜、西瓜等。本发明方法发酵时间较短,绿色天然,无添加剂;产品色泽透亮,澄清度高,口感清爽,经发酵后果汁中果酸和柠檬酸被转化为更柔和的乳酸,氨基酸的含量更高,高级醇的含量更低;是一种营养丰富、果香味浓、入口绵软的水果西打。
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公开(公告)号:CN111592990A
公开(公告)日:2020-08-28
申请号:CN202010212115.2
申请日:2020-03-24
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一株可用于制备阿魏酸酯酶AnfaeA的马克斯克鲁维酵母重组菌株,其通过将序列优化后的黑曲霉阿魏酸酯酶AnfaeA基因克隆到表达载体上并转化马克斯克鲁维酵母宿主菌株构建所得,该重组菌株经高密度发酵阿魏酸酯酶的产量达12,0000U/ml。本发明还提供了一种利用阿魏酸酯酶水解玉米芯粉制备阿魏酸的方法,利用前述重组菌株制得的阿魏酸酯酶AnfaeA和木聚糖酶的协同作用,可高效水解玉米芯粉获得阿魏酸。本发明提供的阿魏酸酯酶可应用农业副产物玉米芯、米糠和玉米皮等生物降解制备阿魏酸、p-香豆酸等酚类物质,因此在食品、造纸、饲料、医药等领域都具有广泛的应用价值,同时,制备方法工艺简单、产量高,十分适合于大规模生产。
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公开(公告)号:CN105112313B
公开(公告)日:2019-04-05
申请号:CN201510540029.3
申请日:2015-08-28
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明提供了一种基因改造的马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株以及用于菌株改造的无痕基因改造方法,所述马克思克鲁维酵母营养缺陷型菌株是马克思克鲁维酵母菌株CGMCC No.10621敲除全部或部分营养基因之后的菌株;所述无痕基因改造方法包括:敲除马克思克鲁维酵母菌CGMCC No.10621至少部分营养缺陷型基因,使其形成营养缺陷型菌株。CGMCC No.10621具有高的分泌蛋白的能力和高的生物量、以及发酵时间短等特征;本发明方法所构建的营养缺陷型马克思克鲁维酵母菌株,可以用于马克思克鲁维酵母表达系统的宿主菌,用于重组制备外源蛋白(酶)。另外,本发明提供的优选的第二基因敲除方法,标签基因序列能够回收利用。
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公开(公告)号:CN104946555A
公开(公告)日:2015-09-30
申请号:CN201510220300.5
申请日:2015-05-04
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于微生物技术领域,具体为一种完全降解赤霉烯酮的微杆菌及其应用。本发明发现一株微杆菌可以降解赤霉烯酮,命名为Microbacteriumsp. FY1538。该微杆菌属于微杆菌属(Microbacterium sp.),分离自青藏高原青海湖边的草皮(N36.34.243E100.32.285)。Microbacteriumsp. FY1538在LB培养基中培养,添加终浓度10ul/ml的甲醇,培养基pH7.4,培养温度30℃,摇瓶震荡培养48h,转速220rpm,发酵上清液具有完全降解赤霉烯酮的能力。本发明提供的微杆菌可应用于玉米等发霉农作物的脱毒。
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公开(公告)号:CN102041252A
公开(公告)日:2011-05-04
申请号:CN200910197704.1
申请日:2009-10-26
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N9/46 , C12N15/56 , C12N15/63 , C12P19/16 , C12R1/645 , C12R1/01 , C12R1/685 , C12R1/125 , C12R1/84 , C12R1/865 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于生物工程领域,涉及一种新型内切葡聚糖酶RuCelB、其编码基因、制备方法与应用。RuCelB含有SEQ ID NO.2的第25-336位的氨基酸残基序列。通过对牦牛瘤胃微生物宏基因组cosmid文库的活性筛选,获得能够水解羧甲基纤维素钠的阳性克隆,进一步通过构建亚克隆、测序、同源比对的方法获得RuCelB的全长cds序列;重组表达获得RuCelB。RuCelB以羧甲基纤维素钠为底物的比活高达158.8U/mg,对滤纸、纤维三糖等底物也具有降解能力。本发明的RuCelB可广泛应用于纤维素的降解,包括纤维素生物转化、化工、纺织、食品、生物能源、饲料添加、医药工业方面应用等领域。
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公开(公告)号:CN120005960A
公开(公告)日:2025-05-16
申请号:CN202510120519.1
申请日:2025-01-25
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于生物技术领域,具体一种利用马克斯克鲁维酵母制备含类似哺乳动物细胞N‑聚糖修饰结构的糖蛋白的方法。本发明以马克斯克鲁维酵母FIM1作为出发菌株,利用基因组编辑技术删除马克斯克鲁维酵母FIM1基因组上的基因URA3后作为宿主菌株,重组表达N‑聚糖糖蛋白;并进一步在基因MNN1的上游5’‑UTR上插入AT序列,以弱化MNN1的表达,提高类似哺乳动物细胞N‑聚糖糖链结构的合成。所制备的糖蛋白的N‑聚糖的糖链具有类似哺乳动物细胞N‑聚糖的糖链结构,存在杂合型、复合型的糖链,在糖链上可同时存在唾液酸、岩藻糖。本发明可以广泛制备与哺乳动物细胞类似的N‑聚糖的糖蛋白。
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公开(公告)号:CN117025425A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310670474.6
申请日:2023-06-07
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/16 , C12N1/02 , C12P7/06 , C12G3/024 , C12G1/022 , A23C9/127 , A23L2/38 , A23L2/84 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域,具体为一种马克斯克鲁维酵母菌株及其在发酵食品中的应用。该菌株是从西藏那曲地区自然发酵酸奶样本中,用乳糖为唯一碳源的培养基所分离获得。18S rDNA鉴定为马克斯克鲁维酵母,命名Kluyveromyces marxianus Fim‑3,保藏编号为CGMCC No.26703。本发明的马克斯克鲁维酵母菌株Fim‑3,具有高表达乳糖酶和高乙醇发酵能力,可用于制备发酵食品,包括发酵乳制品、果蔬汁、水果酒;发酵乳制品可分解代谢99.6%以上的乳糖,或与乳酸菌共发酵,可完全分解代谢乳糖产生乙醇和乳酸;制作的奶酒奶酪味浓郁,酒香酯香丰富。
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公开(公告)号:CN112251311B
公开(公告)日:2021-09-17
申请号:CN202010979266.0
申请日:2020-09-17
Applicant: 复旦大学
Abstract: 本发明属于酿酒技术领域,具体为一种利用马克斯克鲁维酵母酿造水果西打的方法。本发明采用马克斯克鲁维酵母Fim‑1作为发酵菌种;具体步骤包括:取果汁,调节果汁糖度为13‑16°Bx;加入20‑100ppm的焦亚硫酸钾,搅拌溶解;接入马克斯克鲁维酵母Fim‑1菌种,进行果汁的液态发酵;发酵液过滤澄清,然后充二氧化碳,罐装;巴氏杀菌,得到果西打酒产品。所述水果包括苹果、梨、桃子、李子、木瓜、西瓜等。本发明方法发酵时间较短,绿色天然,无添加剂;产品色泽透亮,澄清度高,口感清爽,经发酵后果汁中果酸和柠檬酸被转化为更柔和的乳酸,氨基酸的含量更高,高级醇的含量更低;是一种营养丰富、果香味浓、入口绵软的水果西打。
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