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公开(公告)号：CN114058524A
公开(公告)日：2022-02-18
申请号：CN202111261154.2
申请日：2021-10-28
Applicant: 复旦大学
IPC: C12N1/19 , C12N15/40 , C12N15/81 , C12N7/04 , A61K39/12 , A61K39/39 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/645
Abstract: 本发明属于生物医药技术领域，具体为一种法氏囊亚病毒颗粒疫苗及其制备方法。本发明针对鸡传染性法氏囊病毒变异株，采用马克斯克鲁维酵母重组表达法氏囊亚病毒样颗粒的工程菌株，制备得到有效的法氏囊亚病毒样颗粒疫苗。本发明首先提供重组表达病毒亚病毒样颗粒的马克斯克鲁维酵母工程菌株；该重组菌株是将重组表达法氏囊病毒衣壳蛋白载体转化马克斯克鲁维酵母KM‑YDQ1所获得；法氏囊病毒亚病毒样颗粒疫苗以马克斯克鲁维酵母重组工程菌株经培养发酵、分离纯化获得的法氏囊亚病毒样颗粒作为活性成分。雏鸡免疫法氏囊亚病毒颗粒疫苗，对法氏囊病毒变异株FJ‑18株及经典强毒株BC6/85的保护效力均达到100%。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108611327B
公开(公告)日：2022-03-18
申请号：CN201810712312.3
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题，本发明提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，包括如下步骤：步骤S1，收集重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对细胞裂解液进行澄清获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对病毒样颗粒初提液进行离子交换层析获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。
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公开(公告)号：CN109187774A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201810713760.5
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明的目的在于提供一种操作简单、灵敏度高、重复性和适用性高的PCV2病毒样颗粒检测方法，该方法包括如下步骤：步骤S1，稀释待测样品并进行过滤澄清或离心澄清；步骤S2，取蛋白含量已被确定的猪圆环病毒2型病毒样颗粒标准品进行系列稀释，并对稀释后的系列标准品进行HPLC检测，建立以浓度为横坐标、峰高为纵坐标的回归方程；步骤S3，对稀释后的待测样品进行HPLC检测得到对应的样品峰高；步骤S4，根据回归方程及样品峰高计算得到待测样品中的猪圆环病毒2型病毒样颗粒浓度，其中，步骤S2及步骤S3中的HPLC所采用的色谱柱为凝胶色谱柱，采用的检测器为紫外检测器，其检测波长为280nm。
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公开(公告)号：CN108611327A
公开(公告)日：2018-10-02
申请号：CN201810712312.3
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
Abstract: 为解决猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化中的步骤复杂、工艺繁琐、生产成本高、纯化效率低等问题，本发明提供了一种猪圆环病毒2型病毒样颗粒的分离纯化方法，包括如下步骤：步骤S1，收集重组酵母细胞并进行破碎，获得含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的细胞裂解液；步骤S2，对细胞裂解液进行澄清获得病毒样颗粒初提液；步骤S3，对病毒样颗粒初提液进行离子交换层析获得病毒样颗粒粗纯液；步骤S4，对病毒样颗粒粗纯液进行超滤浓缩获得病毒样颗粒浓缩液；步骤S5，对病毒样颗粒浓缩液进行凝胶过滤层析纯化，获得纯化后的病毒样颗粒，其中，步骤S3的离子交换层析中，吸附过程及洗脱过程中所采用的缓冲液均含有预定浓度的表面活性剂。
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公开(公告)号：CN109187774B
公开(公告)日：2021-09-28
申请号：CN201810713760.5
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
IPC: G01N30/02
Abstract: 本发明的目的在于提供一种操作简单、灵敏度高、重复性和适用性高的PCV2病毒样颗粒检测方法，该方法包括如下步骤：步骤S1，稀释待测样品并进行过滤澄清或离心澄清；步骤S2，取蛋白含量已被确定的猪圆环病毒2型病毒样颗粒标准品进行系列稀释，并对稀释后的系列标准品进行HPLC检测，建立以浓度为横坐标、峰高为纵坐标的回归方程；步骤S3，对稀释后的待测样品进行HPLC检测得到对应的样品峰高；步骤S4，根据回归方程及样品峰高计算得到待测样品中的猪圆环病毒2型病毒样颗粒浓度，其中，步骤S2及步骤S3中的HPLC所采用的色谱柱为凝胶色谱柱，采用的检测器为紫外检测器，其检测波长为280nm。
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公开(公告)号：CN108864259A
公开(公告)日：2018-11-23
申请号：CN201810713720.0
申请日：2018-07-03
Applicant: 复旦大学
IPC: C07K14/01
Abstract: 本发明的目的在于提供一种操作简单、回收率高的猪圆环病毒2型病毒样颗粒的溶出方法，具体包括如下步骤：步骤S1，将表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒的酵母细胞培养液离心，得到表达猪圆环病毒2型病毒样颗粒酵母菌的菌泥；步骤S2，加入破菌缓冲液重悬菌体，得到菌体悬液；步骤S3，菌体悬液经低温高压均质机破碎，得到含猪圆环病毒2型病毒样颗粒的破菌液；步骤S4，将破菌液离心，得到含猪圆环病毒2型病毒样颗粒蛋白的溶出液，其中，步骤S2中的破菌缓冲液为含有预定浓度的NaCl以及亲水性表面活性剂的磷酸盐缓冲液。
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