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公开(公告)号:CN101157907B
公开(公告)日:2010-05-19
申请号:CN200710053386.2
申请日:2007-09-27
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物细菌基因工程领域,涉及一种不含抗性标记的表达猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌株的构建、疫苗制备及应用。得到一株不含抗性标记的表达猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片段的重组猪霍乱沙门氏菌C501(pYA-F1P2(保藏号为CCTCC NO:M207138)。该菌株缺失了猪霍乱沙门氏菌的asd基因,含有能在该菌株中表达asd、猪源支气管败血波氏杆菌fhaB和prn基因片段的质粒pYA-F1P2。公开了该重组株及疫苗的制备以及在制备猪霍乱沙门氏菌和猪源支气管败血波氏杆菌疫苗中的应用。本发明的基因工程疫苗可以刺激猪产生抵抗猪霍乱沙门氏菌和猪源支气管败血波氏杆菌野毒株的保护性免疫反应,能有效防止猪霍乱沙门氏菌和猪源支气管败血波氏杆菌的感染。
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公开(公告)号:CN1704474A
公开(公告)日:2005-12-07
申请号:CN200410009157.7
申请日:2004-05-31
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物病毒学技术领域。公开了一种禽流感病毒的非结构蛋白基因NS1的cDNA序列,用该基因构建原核表达载体;将表达载体转化至大肠杆菌中得到重组菌株(Escherichia coli BL21/pET-28a-NS1);利用该菌株表达禽流感病毒非结构蛋白NS1;利用所述的表达蛋白建立酶联免疫吸附试验鉴别诊断方法,用于区分禽流感灭活疫苗免疫鸡与野毒感染鸡。本发明还涉及制备方法、鉴别诊断试剂盒及其应用。
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公开(公告)号:CN119082090A
公开(公告)日:2024-12-06
申请号:CN202411327049.8
申请日:2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N9/48 , C12N15/57 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了羧肽酶6(CPA6)基因在调控宿主抗牛肠道病毒(Bovine enterovirus,BEV)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建了CPA6基因敲除的牛肾细胞系和抗BEV病毒感染的细胞模型,病毒学检测结果表明,BEV在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞,而回补CPA6基因则导致细胞的抗病毒作用消失,表明CPA6基因在调控宿主抗BEV感染中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了CPA6基因的功能,首次发现该基因可以作为基因编辑动物设计的潜在靶点应用于BEV感染的抗病育种、预防与治疗,对减少药物滥用,避免疫情发生具有重大意义。
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公开(公告)号:CN118006811A
公开(公告)日:2024-05-10
申请号:CN202410141218.2
申请日:2024-01-31
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/04 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种牛溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica,M.h)快速可视化检测试剂盒,该试剂盒中包括:(1)根据核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的基因片段设计的引物,用于扩增牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段;(2)根据牛溶血性曼氏杆菌lptB基因目的片段设计的sgRNA,用于引导Cas12a蛋白识别靶标分子;(3)用于切割单链DNA的Cas12a蛋白;(4)含有标记物和淬灭剂的ssDNA报告分子。本发明还公开了一种牛溶血性曼氏杆菌非诊断目的快速可视化检测方法,该方法灵敏度高、特异性强,为高效、简便、快速检测牛M.h提供了有力工具。
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公开(公告)号:CN116947981B
公开(公告)日:2024-04-23
申请号:CN202310837378.6
申请日:2023-07-07
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/39 , C12N5/20 , C07K16/08 , C12N15/70 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/535 , C12R1/19
Abstract: 本发明公开了一种LSDV和GTPV的通用型诊断抗原及其单克隆抗体,该抗原编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,本发明还公开了一种利用该抗原和单克隆抗体建立的牛结节性皮肤病诊断试剂盒,属于免疫学领域。本发明的抗原是经蛋白免疫印迹试验结合质谱测序从LSDV基因组中筛选到的一种通用型诊断靶标,具有免疫原性,利用其制备的单克隆抗体可实现对山羊痘病毒属的LSDV和GTPV感染或免疫血清抗体检测,具有灵敏性和特异性高,检测快速便捷等优点。本发明为LSDV的血清学检测和疫苗免疫评价提供了高价值工具。
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公开(公告)号:CN117866052A
公开(公告)日:2024-04-12
申请号:CN202311814707.1
申请日:2023-12-26
Abstract: 本发明公开了一种抗菌肽,其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。该抗菌肽具有分子质量小,稳定系数高,易于在大肠杆菌中表达、抑菌活性高等优点,对牛无绿藻的体外抑制MIC达3.875μg/mL;当用于体内时,该抗菌肽可降低乳腺组织菌载量,减少炎性因子释放并减轻炎性反应,保护动物乳腺组织免受病原侵害。本发明在牛无绿藻所致疾病的治疗和预防中具有极大应用前景。
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公开(公告)号:CN115960184B
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202211187275.1
申请日:2022-09-28
Applicant: 华中农业大学 , 天康生物制药有限公司
IPC: C07K14/285 , C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/40 , A61P31/04 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体,它是由保藏编号为CCTCC NO:C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应,而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒,还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药(56)对比文件F A Lainson.“Characterization ofepitopes involved in the neutralizationof Pasteurella haemolytica serotype A1leukotoxin”《.Microbiology (Reading)》.1996,第142卷(第Pt9期),第2499-2507页.Carolina Guzmán-Brambila 等.“LKTA andPlpE small fragments fusion proteinprotect against Mannheimia haemolyticachallenge”《.Research in VeterinaryScience》.2012,第93卷(第3期),第1293-1300页.陆奕彤 等.“溶血性曼氏杆菌重要抗原的免疫原性分析”《.江苏农业学报》.2022,第38卷(第2期),第446-452 页.李奕欣 等.“牛溶血性曼氏杆菌白细胞毒素、脂蛋白E和外膜蛋白A的免疫原性研究”《.中国预防兽医学报》.2021,第43卷(第7期),第753-758页.
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公开(公告)号:CN114574611B
公开(公告)日:2023-09-15
申请号:CN202210086609.X
申请日:2022-01-25
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种根据牛无绿藻cob基因设计的PCR检测引物,其核苷酸序列如下:cob‑5‑F:CTAGTTATTCAAGTCCTCG;cob‑5‑R:AATTACTGTAGCACCCC,所述牛无绿藻cob基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,本发明还公开了所述的PCR检测引物在牛无绿藻非诊断目的检测中的应用。本发明通过对牛无绿藻cob基因的PCR引物进行筛选,得到一对灵敏度高且特异性强的引物,将该引物结合荧光定量PCR技术,能够直接对牛奶样品中的牛无绿藻进行定性以及定量测定,在早期快速诊断牛无绿藻性乳腺炎方面具有明显的优势。
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公开(公告)号:CN114774340B
公开(公告)日:2023-07-25
申请号:CN202210415743.X
申请日:2022-04-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一株牛支原体基因突变株,属于动物传染病防治技术领域,该菌株命名为牛支原体(Mycoplasma bovis)T9.210,保藏在中国典型培养物保藏中心保藏,保藏编号为CCTCC NO:M 2022260,发生突变的基因是核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的Mbov_0703基因。该突变株黏附牛肺上皮细胞的能力和诱导牛肺巨噬细胞炎性反应的能力降低,而且生物膜形成能力降低,从而毒力致弱和抗逆性能下降,在牛支原体致病和免疫防制领域具有应用前景。
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公开(公告)号:CN115420890A
公开(公告)日:2022-12-02
申请号:CN202210990020.2
申请日:2022-08-16
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/533 , G01N33/543 , G01N33/58
Abstract: 本发明属于荧光微球编码技术领域,具体涉及一种功能化的荧光蛋白多色编码微球的制备方法。以荧光蛋白代替有机荧光染料和纳米材料,通过化学偶联将荧光蛋白组装到微球表面,以蛋白质类型、浓度及微球粒径为编码元素,获得超大编码容量的单色和多色荧光微球;荧光微球表面通过生物素修饰将链霉亲和素固定到微球表面,结合生物素标记捕获探针实现多靶标分子高通量的快速分析。本发明制备工艺简洁,编码容量大,性能稳定,且通用性强,对环境友好。本发明的微球可应用于疾病诊断、食品安全、环保、蛋白质组学、基因组学和药物筛选等方面。
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