利用根特异启动子与抗病基因培育烟草抗青枯病品系方法

    公开(公告)号:CN101880673B

    公开(公告)日:2012-07-25

    申请号:CN201010227467.1

    申请日:2010-07-15

    Abstract: 本发明提供了一种利用根特异启动子与抗病RIP基因培育烟草抗青枯病品系的方法,包括根特异启动子的克隆,抗病基因RIP的克隆,抗烟草青枯病表达载体的构建,培育抗青枯病转基因烟草,以及接种转基因烟草青枯菌进行材料的筛选鉴定。将烟草根特异启动子运用于烟草分子育种上,提高了转基因安全性,由根特异启动子携带光谱抗病基因在烟草根和茎部表达,对烟草青枯病有较强的抵抗能力甚至达到免疫功能。通过对转基因烟草进行RT-PCR鉴定,表明了RIP基因不在烟草叶片表达,通过对转基因烟草进行接种青枯菌进行抗性鉴定,得到了高抗烟草青枯病的转基因新材料,为培养高抗烟草青枯病的转基因植株奠定了有利的基础。

    一种烟草抗青枯病基因NtRRS4及其在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN119242644A

    公开(公告)日:2025-01-03

    申请号:CN202311770729.2

    申请日:2023-12-20

    Abstract: 本发明公开了一种烟草抗青枯病基因NtRRS4及其在烟草抗青枯病中的应用,本方案基于前期烟草基因芯片数据筛选出的受青枯菌诱导上调表达的NBS‑LRR类抗病基因NtRRS4,经过PCR克隆获得编码该蛋白的cDNA序列,通过基于Gateway系统的BP和LR反应构建CaMV 35S启动子驱动NtRRS4基因植物表达载体p35S::NtRRS4‑TAP,将其转化GV3101农杆菌,通过叶盘法将其导入感病烟草品种红花大金元上,对转基因烟草进行分子鉴定和青枯菌接种抗性鉴定,结果证明NtRRS4可以正向调控烟草对青枯菌的抗性。本发明为利用基因工程手段培育抗青枯病烟草新品种提供了基因资源,具有重要的应用价值。

    一种花生青枯菌效应蛋白RipTAL及其在植物抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN117757812A

    公开(公告)日:2024-03-26

    申请号:CN202311763214.X

    申请日:2023-12-20

    Abstract: 本发明公开了一种花生青枯菌RS‑P.362200中的效应蛋白RipTAL及其编码基因和应用,属于植物病理学与分子生物学研究领域。所述青枯菌效应蛋白RipTAL核苷酸序列如SEQ ID No.1所示,编码的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。利用同源重组法分别在野生型青枯菌RS‑P.362200中敲除RipTAL及其转录激活区AD,构建了青枯菌RipTAL缺失突变体ΔRipTAL及AD缺失突变体ΔRipTAL‑AD,将ΔRipTAL与ΔRipTAL‑AD接种花生表现致病力减弱,表明RipTAL是一个毒力因子,在花生与青枯菌互作中发挥重要作用,且AD区对RipTAL的致病力起着十分关键的作用。通过转基因本氏烟草株系与野生型植株分别接种青枯菌比较分析发现,RipTAL在本氏烟草中超量表达可显著提高烟草对青枯菌的抗性。本发明对于解析RipTAL介导的青枯菌‑花生互作机理及指导抗青枯病花生分子育种具有重要意义。

    一种花生C2结构域蛋白编码基因AhSRC2及其应用

    公开(公告)号:CN115029355A

    公开(公告)日:2022-09-09

    申请号:CN202210675137.1

    申请日:2022-06-15

    Abstract: 本发明公开了一种C2结构域蛋白编码基因AhSRC2及其应用。所述AhSRC2基因含有如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列。构建原核表达载体pET32a‑AhSRC2,诱导表达纯化获得融合表达蛋白,通过Gateway系统构建GFP融合表达载体并对AhSRC2基因的表达进行亚细胞定位,同时基于Gateway系统构建CaMV 35S启动子驱动的植物表达载体农杆菌介导转化感青枯病品种红花大金元,通过对转基因植株进行分子检测和青枯菌接种鉴定,AhSRC2在烟草中过表达可显著提高转基因烟草对青枯病的抗性,表明AhSRC2可能参与了植物对青枯病的抗性反应,这对植物的抗青枯病基因工程育种应用有重要意义。

    NtRLK2基因在烟草抗青枯病中的应用

    公开(公告)号:CN106867979B

    公开(公告)日:2020-04-17

    申请号:CN201710029165.5

    申请日:2017-01-16

    Abstract: 本发明涉及烟草青枯病抗性相关LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2的序列和功能上的应用,属于分子生物学技术领域,本发明通过基因芯片分析,获得了一个受青枯菌诱导表达上调2倍的LRR类受体蛋白激酶类基因NtRLK2部分片段,经RACE技术获得其全长cDNA序列,从烟草高抗青枯病品种系3中克隆了该基因并用于构建超表达和RNAi表达载体,转入烟草中感青枯病品种翠碧一号,接种鉴定表明该基因的RNAi干扰明显增强烟草植株对青枯菌的抗病性,初步预测该基因可能是内源抗病基因的互作基因,抑制了抗病基因的表达。这将为烟草青枯病抗病遗传育种奠定了基础。

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