一种多氢键供体低共熔溶剂预处理玉米秸秆及其循环利用方法

    公开(公告)号:CN106086106A

    公开(公告)日:2016-11-09

    申请号:CN201610411994.5

    申请日:2016-06-14

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12P19/02 C12P2201/00

    Abstract: 本发明涉及一种多氢键供体低共熔溶剂预处理玉米秸秆及其循环利用方法,属于化学工程领域。在氯化胆碱、天冬氨酸和谷氨酸组成的多氢键供体低共熔溶剂体系中,加入玉米秸秆,90~130℃预处理0.5~3h后,将混合物离心,收集上清液,沉淀用去离子水洗涤三次。向上清液加入一定量的玉米秸秆,一定温度下预处理一定时间,重复上述步骤。将预处理后的玉米秸秆与柠檬酸‑柠檬酸钠缓冲液按一定固液比混合,添加纤维素酶进行酶解,最终葡萄糖产率>76%,并且多氢键供体低共熔溶剂在循环利用4次后,葡萄糖产率>65%。本发明工艺简单,具有效率高、过程经济、三废少等优点,并且预处理后的玉米秸秆水解液可以用来发酵生产丁醇。

    一种醇脱氢酶的高通量筛选方法

    公开(公告)号:CN106047985A

    公开(公告)日:2016-10-26

    申请号:CN201610374447.4

    申请日:2016-05-31

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12Q1/32 C12Q1/02 C12Q2304/00 C12Q2326/00

    Abstract: 本发明涉及一种醇脱氢酶的高通量筛选方法。提供了一种利用脂肪族或芳基取代的酮与2,4‑二硝基苯肼在碱性条件下进行显色反应,并在96孔板中建立了针对脂肪族或芳基取代的酮醇脱氢酶的高通量筛选方法。本发明使用深孔板进行微型化细胞培养,不需要对细胞进行破壁处理,突破了传统通过检测额外添加的昂贵辅酶NAD(P)H吸光度变化的筛选方式,具有成本低廉,操作简便,反应灵敏,检测准确,对设备要求低,通用性强的特点,能够快速对检测整细胞样品中醇脱氢酶的活性和反应转化率进行测定。

    一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法

    公开(公告)号:CN104004724A

    公开(公告)日:2014-08-27

    申请号:CN201410271721.6

    申请日:2012-12-10

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种麦芽糊精底物特异性提高的环糊精糖基转移酶及其制备方法,属于遗传工程和酶工程领域。本发明通过对P.macerans strain JFB05-01(CCTCC NO:M208063)的CGTase的195位的酪氨酸(Tyr)替换为丝氨酸(Ser),260位的酪氨酸(Tyr)替换为精氨酸(Arg),265位的谷氨酰胺(Gln)替换为赖氨酸(Lys),使AA-2G产量分别提高了23%,44%和40%。对以上突变株组合突变,获得双突变体Y195S/Y260R,Y195S/Q265K和Y260R/Q265K以及三点突变体Y195S/Y260R/Q265K。它们利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G产量分别提高了57%,49%,55%和59%。这些突变株比野生型CGTase更利于利用麦芽糊精为糖基供体生产AA-2G。

    一种热稳定性提高的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用

    公开(公告)号:CN114015667B

    公开(公告)日:2023-08-25

    申请号:CN202111398715.3

    申请日:2021-11-19

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的蔗糖磷酸化酶突变体及其应用,属于生物技术领域。本发明提供的蔗糖磷酸化酶的热稳定性较野生型有明显提高,利用此方法生产的蔗糖磷酸化酶突变体在45℃下具有较好的热稳定性,其中,突变体Y334F、突变体P443T及突变体S444D的半衰期相比较于野生型来说有很大的提高,突变体P443T的半衰期大约为170min,比野生型(半衰期为96min)提高了77%。本发明属于酶工程和微生物工程技术领域,其有益效果是得到热稳定性优于野生型蔗糖磷酸化酶的突变体,以便更好地适应工业生产。

    一种甲硫氨酸腺苷转移酶突变体

    公开(公告)号:CN114107243B

    公开(公告)日:2023-04-07

    申请号:CN202111500089.4

    申请日:2021-12-09

    Abstract: 本发明公开了一种甲硫氨酸腺苷转移酶突变体,属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明通过对氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的甲硫氨酸腺苷转移酶的第55位谷氨酸突变成亮氨酸获得的甲硫氨酸腺苷转移酶突变体催化生成腺苷甲硫氨酸的酶活是野生型的1.6倍,Vmax较野生型提高了54%,Kcat/Km较野生型提高了16%;同时也保留了野生型酶良好的产物耐受性。本发明的甲硫氨酸腺苷转移酶突变体在具有良好的产物耐受性的同时显著提高酶活,有助于降低生产成本,提高生产效率,在工业化生产腺苷甲硫氨酸中具有极高的应用前景。

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