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公开(公告)号：CN110763843B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201911075572.5
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体双抗夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括包被有牛支原体多克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。本发明实现了针对牛支原体抗原的特异性检测，且能够检出牛支原体的敏感度为108CFU/mL。通过对样本进行预增菌处理，含低至1CFU/mL的牛支原体样本均可以达到检测敏感度标准。与现有技术相比，本发明具有操作简便、人员技术水平要求低、主观因素误差小、设备简单等优点，可以快速实现大批量样品的检测分析。
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公开(公告)号：CN110746504A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911075944.4
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号：CN110240637A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910480093.5
申请日：2019-06-04
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛分枝杆菌分子伴侣蛋白GroEL2及其编码基因，属于生物和疫苗技术领域。申请人从牛分枝杆菌卡介苗的基因组中克隆获得GroEL2基因，将该基因重组至耻垢分枝杆菌中表达，在确定了其高黏附及侵袭能力后，再将该基因在大肠杆菌中表达，最终获得重组蛋白GroEL2。该蛋白能提高机体的IgG、IgA抗体水平以及机体的Th1型及Th2型细胞免疫水平，具有一定的抗牛分枝杆菌感染能力，在牛分枝杆菌致病机制研究、疫苗和诊断试剂研发中具有应用前景。
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公开(公告)号：CN109385423A
公开(公告)日：2019-02-26
申请号：CN201811163720.4
申请日：2018-10-02
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113
Abstract: 本发明属于动物生化免疫技术领域，具体涉及调控结核分枝杆菌诱导巨噬细胞炎症应答的小分子。所述的小分子命名为miR-18b-5p。本发明通过一系列研究，证实miR-18b-5p在结核分枝杆菌感染的巨噬细胞中显著低表达。miR-18b-5p模拟物和抑制物可抑制和促进感染结核分枝杆菌的巨噬细胞相关炎性因子例如IL-α、IL-6和IL-1β等的表达，miR-18b-5p通过其靶标分子低氧诱导因子(Hif-1α)调节结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用。
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公开(公告)号：CN107043770A
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201610084076.6
申请日：2016-02-05
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/113 , C12N15/11 , C12Q1/68
Abstract: 本发明属于动物生化免疫技术领域，具体涉及一组结核病相关的外周血淋巴细胞miRNA及其应用。本发明的外周血淋巴细胞miRNA可以作为早期检测外周血淋巴细胞miRNA标志蛋白。所述外周血miRNA标志蛋白为联合使用，相关外周血miRNA序列分别如下所述：1)标志蛋白has-miR-374b-5p miRNA序列ACUAUAGAACUUUCCCCCUC A；2)标志蛋白has-miR-625-3p：GACUAUAGAACUUUCCCCCUCA和3)标志蛋白has-miR-362-5p：AAUCCUUGGAACCUAGGUGUGAGU。还公开了扩增上述标志蛋白的引物序列。本发明的标志蛋白可以作为早期检测人结核病的标志物。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN103509756B
公开(公告)日：2015-04-08
申请号：CN201210201726.2
申请日：2012-06-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体单克隆抗体及制备方法和应用，一种牛支原体单克隆抗体的制备方法，其步骤是：1）制备牛支原体抗原；2）抗原免疫小鼠；3）制备分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞以及单抗腹水；4）单抗纯化。本发明用牛支原体地方分离株HB0801抗原免疫小鼠后，用杂交瘤细胞技术获得能高效分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C11，CCTCC NO：C201218，所产生的单克隆抗体可与牛支原体和无乳支原体特异性结合，利用以上单克隆抗体建立了检测牛支原体抗原的夹心ELISA，该方法操作简单，所需时间短，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN103509756A
公开(公告)日：2014-01-15
申请号：CN201210201726.2
申请日：2012-06-19
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/12 , G01N33/577 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体单克隆抗体及制备方法和应用，一种牛支原体单克隆抗体的制备方法，其步骤是：1）制备牛支原体抗原；2）抗原免疫小鼠；3）制备分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞以及单抗腹水；4）单抗纯化。本发明用牛支原体地方分离株HB0801抗原免疫小鼠后，用杂交瘤细胞技术获得能高效分泌牛支原体单克隆抗体的杂交瘤细胞株1C11，CCTCCNO：C201218，所产生的单克隆抗体可与牛支原体和无乳支原体特异性结合，利用以上单克隆抗体建立了检测牛支原体抗原的夹心ELISA，该方法操作简单，所需时间短，灵敏度高。
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公开(公告)号：CN101736085A
公开(公告)日：2010-06-16
申请号：CN200910272782.3
申请日：2009-11-18
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明属于动物病原分子检测领域，涉及牛支原体的环介导等温扩增检测方法。其步骤包括：(1)引物合成：根据牛支原体特异性基因UvrC的序列设计两对特异引物；(2)培养牛支原体；(3)提取牛支原体总DNA；(4)环介导等温扩增反应和(5)环介导等温扩增反应产物分析。在凝胶成像系统的紫外灯下观察是否有梯形条带，且其中最小的一条为157bp大小，或加入SYBR Green I后，若扩增产物变为黄绿色则为牛支原体阳性，若扩增产物为棕色则为牛支原体阴性。本发明可以100％扩增到临床分离到的牛支原体，且特异性强，对呼吸道常见菌可以作鉴别检测。本发明灵敏度高，检测下限为10个拷贝的阳性质粒。1小时出结果。实用性强，不需要昂贵的精密仪器。
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公开(公告)号：CN120005883A
公开(公告)日：2025-05-16
申请号：CN202510094685.9
申请日：2025-01-21
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis,M.bovis）非编码小RNA，属于生物领域。所述非编码小RNA核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，研究发现，ncBCG201过表达BCG菌株在碳饥饿培养条件下的存活能力明显增强，在膜压力培养条件下的存活能力明显下降，过表达菌株在对数生长期表现出更慢的生长速度，且生物被膜成膜能力显著降低。以上结果表明，本发明提供的非编码小RNA能降低牛分枝杆菌的致病性和抗性，在制备牛结核病疫苗方面具有很好的应用前景。
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公开(公告)号：CN119285738A
公开(公告)日：2025-01-10
申请号：CN202411327055.3
申请日：2024-09-23
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/47 , C12N15/12 , C12N15/113 , C12N9/22 , C12N5/10 , C12N15/867 , A61K45/00 , A61K48/00 , A61P31/14 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了SELENON基因在调控宿主抗牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3，BPIV‑3)中的应用。利用CRISPR/Cas9基因编辑技术，构建了SELENON基因敲除的MDBK细胞系和抗BPIV‑3感染的细胞模型，发现基因敲除细胞对BPIV‑3感染表现出显著抗性，BPIV‑3在基因敲除细胞上的增殖速度显著低于野生型细胞，而回补SELENON基因则导致细胞的抗病毒作用消失。以上结果表明，SELENON基因在调控宿主抗病毒中发挥重要作用。本发明从细胞水平上鉴定了SELENON基因的抗病毒调节功能，首次发现该基因可以作为基因编辑细胞和动物设计的潜在靶点应用于抗病育种和牛抗BPIV‑3感染预防与治疗药物的研发，对减少药物滥用，避免疫情发生具有重大意义。
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