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公开(公告)号：CN115960184B
公开(公告)日：2023-12-12
申请号：CN202211187275.1
申请日：2022-09-28
Applicant: 华中农业大学 , 天康生物制药有限公司
IPC: C07K14/285 , C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/40 , A61P31/04 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体，它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应，而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒，还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药(56)对比文件F A Lainson.“Characterization ofepitopes involved in the neutralizationof Pasteurella haemolytica serotype A1leukotoxin”《.Microbiology (Reading)》.1996,第142卷(第Pt9期),第2499-2507页.Carolina Guzmán-Brambila 等.“LKTA andPlpE small fragments fusion proteinprotect against Mannheimia haemolyticachallenge”《.Research in VeterinaryScience》.2012,第93卷(第3期),第1293-1300页.陆奕彤 等.“溶血性曼氏杆菌重要抗原的免疫原性分析”《.江苏农业学报》.2022,第38卷(第2期),第446-452 页.李奕欣 等.“牛溶血性曼氏杆菌白细胞毒素、脂蛋白E和外膜蛋白A的免疫原性研究”《.中国预防兽医学报》.2021,第43卷(第7期),第753-758页.
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公开(公告)号：CN110746504B
公开(公告)日：2021-01-15
申请号：CN201911075944.4
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号：CN110763843B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201911075572.5
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体双抗夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括包被有牛支原体多克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。本发明实现了针对牛支原体抗原的特异性检测，且能够检出牛支原体的敏感度为108CFU/mL。通过对样本进行预增菌处理，含低至1CFU/mL的牛支原体样本均可以达到检测敏感度标准。与现有技术相比，本发明具有操作简便、人员技术水平要求低、主观因素误差小、设备简单等优点，可以快速实现大批量样品的检测分析。
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公开(公告)号：CN110746504A
公开(公告)日：2020-02-04
申请号：CN201911075944.4
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/569 , G01N33/577 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，它是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。该单克隆抗体能与牛支原体发生反应，不与无乳支原体、鸡毒支原体、精氨酸支原体、绵羊肺炎支原体等反应，具有很高的特异性，可用于鉴别牛支原体与无乳支原体。而且能与更多的牛支原体包括临床分离株和标准参考株反应，在牛支原体的检测方面具有一定的广谱性。
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公开(公告)号：CN116751264B
公开(公告)日：2024-04-16
申请号：CN202310647268.3
申请日：2023-05-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了该重组蛋白的制备方法及其在制备牛结节性皮肤病病毒(LSDV)鉴别诊断试剂盒中的应用，属于分子生物学领域。本发明用5个柔性肽串联6个LSDV的特异性片段，克隆融合基因并表达得到该重组蛋白，分子量为18kDa。经验证，该蛋白与LSDV自然感染的阳性血清抗体有很强的反应原性，能用于鉴别诊断山羊痘弱毒疫苗免疫和自然感染LSDV的血清，并且还具有敏感性强、特异性好等优点。本发明为LSDV的血清学检测和防控提供了高价值工具，弥补了国内外鉴别诊断LSDV的空白。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN110763843A
公开(公告)日：2020-02-07
申请号：CN201911075572.5
申请日：2019-11-06
Applicant: 华中农业大学
IPC: G01N33/58 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体双抗夹心ELISA检测试剂盒，该试剂盒包括包被有牛支原体多克隆抗体的酶标板、辣根过氧化物酶标记的抗牛支原体MbovP579蛋白的单克隆抗体，所述单克隆抗体是由杂交瘤细胞株1A2分泌的，所述杂交瘤细胞株1A2保藏在中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2018219。本发明实现了针对牛支原体抗原的特异性检测，且能够检出牛支原体的敏感度为108CFU/mL。通过对样本进行预增菌处理，含低至1CFU/mL的牛支原体样本均可以达到检测敏感度标准。与现有技术相比，本发明具有操作简便、人员技术水平要求低、主观因素误差小、设备简单等优点，可以快速实现大批量样品的检测分析。
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公开(公告)号：CN110483625A
公开(公告)日：2019-11-22
申请号：CN201910537338.3
申请日：2019-06-20
Applicant: 华中农业大学
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体假想蛋白MbovP732，该蛋白具有如序列表SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列，编码所述蛋白的基因，具有如序列表SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列。该蛋白具有反应原性和免疫原性，能特异性地与牛支原体野毒株反应，而不能与疫苗株反应，因此可用于鉴别牛支原体野毒株感染与疫苗株免疫。
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公开(公告)号：CN116948982A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202311127530.8
申请日：2023-09-04
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/10 , G01N33/569 , G01N33/577
Abstract: 本发明属于生物技术领域，公开了基因1型和2型牛病毒性腹泻病毒交叉反应性单克隆抗体及应用。申请人采用BVDV‑1和BVDV‑2的病毒粒子交叉免疫6‑8周龄的雌性BALB/c小鼠，筛选出5株杂交瘤细胞，相加实验结果表明单抗2C11和5A8可用于建立双抗夹心ELISA检测试剂盒。本发明的试剂盒有良好的特异性及灵敏性，最低检测限为104个TCID50的病毒；在37℃高温条件下可保存7 d；且双抗夹心ELISA的批内、批间实验表明变异系数均小于10%，重复性好；该方法为我国牛群两种BVDV的同时检测和净化提供技术支撑。
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公开(公告)号：CN116751264A
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202310647268.3
申请日：2023-05-30
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/065 , C12N15/70 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白，其编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明还公开了该重组蛋白的制备方法及其在制备牛结节性皮肤病病毒(LSDV)鉴别诊断试剂盒中的应用，属于分子生物学领域。本发明用5个柔性肽串联6个LSDV的特异性片段，克隆融合基因并表达得到该重组蛋白，分子量为18kDa。经验证，该蛋白与LSDV自然感染的阳性血清抗体有很强的反应原性，能用于鉴别诊断山羊痘弱毒疫苗免疫和自然感染LSDV的血清，并且还具有敏感性强、特异性好等优点。本发明为LSDV的血清学检测和防控提供了高价值工具，弥补了国内外鉴别诊断LSDV的空白。
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公开(公告)号：CN115960184A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202211187275.1
申请日：2022-09-28
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/285 , C07K16/12 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , G01N33/543 , A61K39/40 , A61P31/04 , C12R1/91
Abstract: 本发明公开了一种溶血性曼氏杆菌(Mannheimia haemolytica)A6血清型白细胞毒素抗原蛋白，其氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。本发明还公开了一种溶血性曼氏杆菌A6血清型白细胞毒素单克隆抗体，它是由保藏编号为CCTCC NO：C2022206的杂交瘤细胞株5D12产生的。该单克隆抗体能与牛溶血性曼氏杆菌A1和A6血清型LKT蛋白发生特异性反应，而且具有中和作用。因此不仅可用于制备LKT毒素蛋白的检测试剂盒，还可用于制备抗溶血性曼氏杆菌的药物，进而在溶血性曼氏杆菌感染疾病的防控中发挥重要作用。
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